МУК 4.1.892-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 4-[(2-гидрокси-3-изопропиламино)пропокси]фенилацетамида бензоата (бензоата атенолола) в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 4-[(2-ГИДРОКСИ-3- ИЗОПРОПИЛАМИНО)ПРОПОКСИ]ФЕНИЛАЦЕТАМИДА БЕНЗОАТА (БЕНЗОАТА АТЕНОЛОЛА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

с момента утверждения

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

Структурная формула: (не приводится).

М. м. 388,48.

Бензоат атенолола. Кристаллический порошок белого цвета с температурой плавления 156 — 158 °С. Растворим в воде и этаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

Характеристика метода

Определение основано на хроматографировании вещества в тонком слое на пластинках Сорбфил с последующим обнаружением хроматограмм раствором нингидрина и денситометрировании окрашенных зон при длине волны 513 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме — 4 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе — 0,5 мг/куб. м (при отборе 40,0 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,5 до 5,0 мг/куб. м.

Определению не мешают 4-[(2,3-эпокси)пропокси]фенилацетамид, этиловый и изопропиловый спирт.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели.

Хроматографическая камера для ТСХ размером 10 х 20 см, ГОСТ 23932-79.

Пластинки для тонкослойной хроматографии Сорбфил ПТСХ-П-А, ТУ 26-11-17-89.

Хроматографическая камера для ТСХ, ГОСТ 23932-79.

Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 19908-80.

Вакуумная установка.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79.

Посуда стеклянная лабораторная, ГОСТ 1770-74Е, 20292-74.

Реактивы, растворы, материалы

Бензоат атенолола фармакопейный с содержанием не менее 99,0%.

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.

Метиловый спирт, ГОСТ 6965-77.

Хлороформ, ТУ 6-09-4263-76.

Аммиак водный, 25% раствор, ГОСТ 3760-79.

Нингидрин, х.ч. (ЧСФР).

Подвижный растворитель: хлороформ-метанол (50:10) мл. В камеру дополнительно помещают бюкс с 25 мл 25% раствора аммиака.

Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в этаноле при нагревании, охлаждают, доводят объем раствора до метки и перемешивают.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 40-60-100-200-300-400 мкг/мл вещества готовят соответствующим разбавлением этанолом стандартного раствора № 1. Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 40,0 л воздуха. Хранение проб допускается в течение 3 суток в холодильнике.

Подготовка к измерению

На линию старта (от края 1,5 см) наносят с помощью микропипетки по 0,1 мл растворов с концентрацией вещества от 40 до 400 мкг/мл, которые готовят аналогично пробам (но растворяют в 1 мл этанола). Диаметр пятна не должен превышать 0,5 см. Пластинку высушивают на воздухе в течение 3 мин. и помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей хлороформ-метанол (50:10) мл и бюксом вместимостью 25 мл с 25% раствором аммиака.

    После  того как фронт растворителя пройдет до конца пластинки,
ее  вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф при температуре

120 °С на 5 мин. Затем пластинку опрыскивают проявляющим реактивом

и  помещают  в  сушильный  шкаф  при  температуре 120 °С на 3 мин.
Бензоат  атенолола проявляется в виде оранжево-коричневых пятен на
светлом фоне с R  = 0,73 +/- 0,02.

            f

Интенсивность окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют отражение (Т) в %. Оптическая плотность (Д) и отражение (Т) связаны между собой соотношением:

Д = -lg T,

где Т — выражено в %, тогда:

                    1

Д = lg — х 100 или Д = 2 — lg Т. Т

По средним результатам из пяти определений строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс — соответствующее им количество вещества в мкг в градуировочном растворе.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, доливают 6 мл этанола и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра — 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60 — 65 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этанола и используют полученный раствор для анализа.

Далее поступают аналогично градуировочным растворам.

При использовании планиметра количество вещества «М» (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:

                           m х S
                                х

M = ------, S ст

где:
m - содержание вещества на пятне стандарта, мкг;
S  - площадь пятна пробы, кв. мм;
 х
S   - площадь пятна стандарта, кв. мм.
 ст

При использовании денситометра содержание вещества в анализируемом объеме находят по градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию бензоата атенолола в воздухе «С» (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х в

С = --------, б х V

где:

а — содержание вещества, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

                      V  (273 + 20) х Р
                       t

V = -------------------, (273 + t°) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  - барометрическое давление, кПа

(101,33 кПа = 760 мм рт. ст.); t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V на t соответствующий коэффициент.

Т, °С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2038	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1400	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0635	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0357
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9655	0,9605	0,9658	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9891	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Название вещества	Опубликованные Методические указания
Тетрафторбромэтан	Методические указания на фотометрическое определение фторорганических соединений в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 187
Диметилкетазин	Методические указания на фотометрическое определение гидразина в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 108
Цианокобаламин /витамин В / 12	Методические указания на фотометрическое определение кобальта и его соединений в воздухе. Сборник МУ, в. 1 — 5, М., 1981, с. 14. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Сборник МУ № 25, М., 1989, с. 100

---