МУК 4.1.1370-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций 2-[(4-хлорфенил)-фенилацетил]-1,Н-инден-1,3(2Н)-диона(хлорфасинона) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания

(утв. Минздравом России 16.05.2003)

16 мая 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2-[(4-ХЛОРФЕНИЛ)- ФЕНИЛАЦЕТИЛ]-1,Н-ИНДЕН-1,3(2Н)-ДИОНА(ХЛОРФАСИНОНА) МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

с момента утверждения

1. Методические указания подготовлены: Научно-исследовательским институтом медицины труда РАМН, в составе Л.Г. Макеева (руководитель), Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова, при участии А.И. Кучеренко (Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения РФ Г.Г. Онищенко 16 мая 2003 года.

5. Введены впервые.

Введение

Сборник методических указаний «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (Вып. 41) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник 19 методик контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений», МИ 2335-95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа», МИ 2336-95 «Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах - ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны», дополнениях 2, 3, 4, 6 к ним и дополнениях 2, 3, 4 и 5 к ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание хлорфасинона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне концентраций 0,005 — 0,066 мг/куб. м.

2. Характеристика вещества

2.1 Структурная формула (не приводится).

2.2 Эмпирическая формула С Н СlО .

                           23 15   3

2.3 Молекулярная масса 374,83.

2.4 Регистрационный номер CAS 3691-35-8.

2.5 Физико-химические свойства.

Хлорфасинон — кристаллический порошок белого цвета, Т 142 — пл. 144 °С, не растворим в воде, хорошо растворим в хлороформе, бензоле.

Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

2.6 Токсикологическая характеристика.

Хлорфасинон является антикоагулянтом (нарушает свертываемость крови, повышает проницаемость сосудов).

Класс опасности — первый.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) хлорфасинона в воздухе рабочей зоны 0,01 мг/куб. м.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений хлорфасинона с погрешностью, не превышающей +/- 9% при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации хлорфасинона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием при длине волны 280 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания хлорфасинона в анализируемом объеме пробы — 0,006 мкг.

Нижний предел измерения концентрации хлорфасинона в воздухе 0,005 мг/куб. м (при отборе 60 куб. дм воздуха).

Измерению не мешает сопутствующее вещество — этилфенацин.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы.

5.1 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостной фирмы Хьюлетт-Паккард, модель НР-1050 с градиентной системой элюирования, автосэмплером и УФ-детектором типа «диодная матрица» Колонка из нержавеющей стали длиной 150 мм и внутренним диаметром 4 мм, заполненная Spherisorb ODS-2 (размер частиц 5 мкм)

Аспирационное устройство модель 822             ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатель                                ТУ 95-72-05-77
Фильтры обеззоленные "синяя лента"              ТУ 6-09-1676-77
Весы аналитические лабораторные ВЛА-200         ГОСТ 24104-88Е
Колбы мерные, вместимостью 25 куб. см           ГОСТ 1770-74Е

Стаканы химические, вместимостью 25 куб. см ГОСТ 25336-82Е Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см ГОСТ 29227-91 Пробирки колориметрические, вместимостью 10 куб. см ГОСТ 25336-82Е Ротационный испаритель ИР-1М с набором колб ТУ 25-11-917-76

5.2 Реактивы, растворы

Хлорфасинон — продукт фирмы «Лифа», Италия, с содержанием основного вещества не менее 98%, сертификационный № 13509920

Хлороформ, ч.                                   ТУ 6-09-4263-76
Спирт метиловый, х.ч.                           ГОСТ 6995-67
Ацетонитрил, х.ч. для жидкостной хроматографии  ТУ 6-09-14-2167-84

Ортофосфорная кислота, 85%-ный раствор

и 0,2%-ный раствор                              ГОСТ 10678-76
Вода бидистиллированная                         ГОСТ 7602-72

Допускается использование других средств измерения, вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже утвержденных в разделе.

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим и среднеспециальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84,0 — 106,6 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1 Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор хлорфасинона в хлороформе с концентрацией 1 мг/куб. см готовят растворением 25 мг хлорфасинона в мерной колбе вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор № 1 с концентрацией 40 мкг/куб. см готовят разведением 1 куб. см основного стандартного раствора хлороформом в мерной колбе вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.3. Градуировочные растворы с концентрацией хлорфасинона от 0,6 до 8,0 мкг/куб. см готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 хлороформом. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.4 Состав элюента:

А — ацетонитрил: метанол: ортофосфорная кислота (85%) = 1:1:0,01.

В — ортофосфорная кислота (0,2%, по объему).

Ортофосфорную кислоту 0,2%-ную (по объему) готовят следующим образом: к 99,8 куб. см бидистиллированной воды приливают 0,2 куб. см ортофосфорной кислоты.

9.2 Подготовка прибора

Подготовку жидкостного хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3 Установление градуировочной характеристики

Количественный анализ проводят методом абсолютной градуировки. Для этого вводят в хроматограф по 10 куб. мм каждого градуировочного раствора.

Градуировочный график строят в координатах: количество введенного хлорфасинона (мкг) — площадь пика (приборные единицы). Градуировку выполняют по 5 точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации согласно табл. 1.

Стандартный раствор хлорфасинона № 1, куб. см	Хлороформ, куб. см	Концентрация хлорфасинона в градуировочном растворе, мкг/куб. см	Содержание хлорфасинона в хроматографируемом объеме, мкг
0,15	9,85	0,6	0,006
0,3	9,7	1,2	0,012
0,5	9,5	2,0	0,02
1,0	9,0	4,0	0,04
2,0	8,0	8,0	0,08

Условия проведения анализа градуировочных растворов и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки                  20 °С
    Скорость подачи элюента                         1 куб. см/мин.
    Длина волны УФ-детектора                        280 нм
    Объем вводимой пробы                            10 куб. мм
    Время удерживания хлорфасинона                  4 мин. 27 с

Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в три месяца и при изменении условий анализа.

9.4 Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 10 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ПДК хлорфасинона необходимо отобрать 60 куб. дм воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение месяца в пробирках с притертыми пробками.

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан вместимостью 25 куб. см и дважды экстрагируют хлороформом по 5 куб. см. Экстракты объединяют и переносят в остродонную колбу и упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 40 °С. Степень десорбции хлорфасинона с фильтра 98%. Сухой остаток растворяют в 0,5 куб. см хлороформа. Хроматографический анализ проб выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Количественное содержание хлорфасинона в хроматографируемом объеме (мкг) определяют по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию хлорфасинона в воздухе (С, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание хлорфасинона в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, куб. мм;

б — объем раствора пробы, взятой для анализа, куб. мм;

V — объем воздуха, отобранного для анализа (куб. дм) и приведенного к стандартным условиям (Прилож. 1).

Результат количественного анализа представляют в виде:

Значение ДЕЛЬТА = 0,00066 + 0,088С мг/куб. м, где ДЕЛЬТА — характеристика погрешности; С — значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе.

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Диапазон определяемых	Наименование метрологической характеристики
концентраций хлорфасинона мг/куб. м	характеристика погрешности ДЕЛЬТА, мг/куб. м р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, мг/куб. м (р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, мг/куб. м (р = 0,95, m = 2
0,005 — 0,066	0,00066 + 0,088С	0,00026 + 0,12С	0,0025 + 0,35С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе (С).

13.1 Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике.

    После отбора пробы экстракт с  фильтра  делят  на  две  равные
части, первую  из  которых  анализируют  в  точном  соответствии с
прописью методики и получают  результат  анализа  исходной рабочей

пробы (С ). 1

    Вторую часть разбавляют соответствующим  растворителем  в  два
раза и снова делят на  две  равные  части,   первую   из   которых
анализируют в точном соответствии  с  прописью  методики,  получая
результат анализа рабочей пробы, разбавленной  в два раза (С ). Во

                                                        2

вторую  часть  делают  добавку   анализируемого  компонента (X) до
массовой   концентрации   исходной   рабочей   пробы  (C )  (общая

                                                    1

концентрация не  должна  выходить  за  верхнюю  границу  диапазона
измерения)  и  анализируют  в  точном   соответствии   с  прописью
методики, получая результат  анализа рабочей пробы, разбавленной в
два раза, с добавкой (С ).  Результаты  анализа  исходной  рабочей

                   3

пробы (С ), рабочей пробы, разбавленной в два  раза (С ) и рабочей
        1                                             2
пробы,  разбавленной  в  два  раза  с  добавкой  (С )  получают по

                                               3

возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает  один аналитик
с  использованием  одного  набора  мерной   посуды,  одной  партии

реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

                |С  - С  - Х| + |2С  - С | <= К,
                  3    2           2    1

где:
С  - результат анализа рабочей пробы;
 1
С  - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;
 2
С  - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза,
 3

с добавкой анализируемого компонента; Х — величина добавки анализируемого компонента; К — норматив оперативного контроля погрешности.

К = 0,00026 + 0,12С мг/куб. м

13.2 Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

                           |С  - С | <= D,
                             1    2

где:
С  - результат анализа рабочей пробы;
 1
С  - результат анализа этой  же  пробы,  полученный  в  другой
 2

лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов; D — допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,0025 + 0,35C мг/куб. м

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Методические указания разработаны: НИИ медицины труда РАМН (Е.Н. Грицун, А.В. Кудряшов).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (Т 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

                         V  х (273 + 20) х Р
                          t

                       V   = -------------------,
                        20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  кПа  (101,33  кПа  =  760 мм

рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 (коэффициентов (Прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

Давление Р, кПа/мм рт. ст.
°С	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/ 750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	0,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9830	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Название вещества	Опубликованные методические указания
1	2
Желатин	МУ № 1719-77 «Методические указания на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок». — Вып. 1 — 5. — М., 1981. — 235 с.
Крахмал	-«-»
Сахарная пудра (сахароза)	-«-»

---