МУК 4.1.1357-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовых концентраций О,О-диметил-S-[(2-оксо-6-хлоросазол (4,5-в)пиридин-3(2Н)-ил)метил] тиофосфата (азаметиофоса) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания

(утв. Минздравом России 16.05.2003)

16 мая 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ О,О-ДИМЕТИЛ-S- [(2-ОКСО-6-ХЛОРОСАЗОЛ(4,5-В)ПИРИДИН-3(2Н)-ИЛ)МЕТИЛ] ТИОФОСФАТА (АЗАМЕТИОФОСА) МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

с момента утверждения

1. Методические указания подготовлены: Научно-исследовательским институтом медицины труда РАМН, в составе Л.Г. Макеева (руководитель), Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун, Г.Ф. Громова, при участии А.И. Кучеренко (Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России).

2. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.

4. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения РФ Г.Г. Онищенко 16 мая 2003 года.

5. Введены впервые.

Введение

Сборник методических указаний «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (Вып. 41) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник 19 методик контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений», МИ 2335-95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа», МИ 2336-95 «Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в гигиенических нормативах - ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны», дополнениях 2, 3, 4, 6 к ним и дополнениях 2, 3, 4 и 5 к ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание азаметиофоса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне концентраций 0,5 — 5,0 мг/куб. м.

2. Характеристика вещества

2.1 Структурная формула (не приводится).

2.2 Эмпирическая формула C H ClN O PS.

                           9 10   2 5

2.3 Молекулярная масса 324,68.

2.4 Регистрационный номер CAS 35575-96-3.

2.5 Физико-химические свойства.

    Азаметиофос - белое  кристаллическое вещество,  d = 1,6 г/куб.
*см* при 20 °С,  растворимость  в  воде  0,11%,  Т    = 89 °С, легко

                                            пл.

растворим в бензоле, метаноле, этаноле.

Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

2.6 Токсикологическая характеристика.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) азаметиофоса в воздухе рабочей зоны 1,0 мг/куб. м.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений азаметиофоса с погрешностью, не превышающей +/- 13% при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации азаметиофоса выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием при длине волны 290 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания азаметиофоса в анализируемом объеме пробы — 0,01 мкг.

Нижний предел измерения концентрации азаметиофоса в воздухе 0,5 мг/куб. м (при отборе 20 куб. дм воздуха).

Метод специфичен в условиях приготовления различных препаративных форм. Измерению не мешают сопутствующие вещества: тальк, глина, сахар, кизельгур.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостный, фирмы «Waters» США, модель 996 с градиентной системой элюирования, автосэмплером и УФ-детектором типа «диодная матрица» Колонка аналитическая, хроматографическая из нержавеющей стали длиной 250 мм и внутренним диаметром 2 мм, заполненная Separon C-18 (размер частиц 5 мкм)

Аспирационное устройство, модель 822                ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатель                                    ТУ 95-72-05-77
Фильтры АФА-ВП-10                                     ТУ 95-743-80
Весы аналитические ВЛР-200                          ГОСТ 24104-88Е
Колбы мерные, вместимостью 25 куб. см                ГОСТ 1770-74Е

Стаканы химические вместимостью 25 куб. см ГОСТ 25336-82Е Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 куб. см ГОСТ 29227-91 Пробирки колориметрические, вместимостью 10 куб. см ГОСТ 25336-82Е

5.2 Реактивы

Азаметиофос — фирма «Сиба-Гейги», Швейцария с содержанием основного вещества не менее 98%, сертификационный № СУА 18809 Ацетонитрил, х.ч. для жидкостной хроматографии ТУ 6-09-14-2167-84 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

Допускается использование других средств измерения, вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже утвержденных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.004-76.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.005-88.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.

8. Условия измерений

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 84,0 — 106,6 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1 Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор азаметиофоса в этаноле с концентрацией 1 мг/куб. м готовят растворением 25 мг азаметиофоса в мерной колбе вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор № 1 с концентрацией 100 мкг/куб. см готовят разведением 2,5 куб. см основного стандартного раствора этанолом в мерной колбе вместимостью 25 куб. см. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.

9.1.3. Градуировочные растворы с концентрацией азаметиофоса от 1 до 10 мкг/куб. см готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 этанолом. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.4. Состав элюента: А-ацетонитрил: В-дистиллированная вода. А:В = 35:65.

9.2 Подготовка прибора

Подготовку жидкостного хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3 Установление градуировочной характеристики

Количественный анализ азаметиофоса проводят методом абсолютной градуировки. Для этого вводят в хроматограф по 10 куб. мм каждого градуировочного раствора.

Градуировочный график строят в координатах: количество введенного азаметиофоса (мкг) — площадь пиков (условные единицы). Градуировку выполняют не менее чем по 6 точкам, проводя 5 параллельных измерений для каждой концентрации согласно табл. 1.

Таблица 1

ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ АЗАМЕТИОФОСА

№ стандарта	Стандартный раствор азаметиофоса № 1, куб. см	Этанол, куб. см	Концентрация азаметиофоса в градуировочном растворе, мкг/куб. см	Содержание азаметиофоса в хроматографируемом объеме, мкг
1	0,25	24,75	1,0	0,01
2	0,5	24,5	2,0	0,02
3	0,75	24,25	3,0	0,03
4	1,25	23,75	5,0	0,05
5	2,0	23,0	8,0	0,08
6	2,5	22,5	10,0	0,1

Условия проведения анализа: температура термостата колонки 20 °С; элюент: ацетонитрил:дистиллированная вода = 36:65;

    скорость подачи элюента                      0,5 куб. см/мин.;
    длина волны УФ-детектора                               290 нм;
    объем вводимой пробы                               10 куб. мм;
    время удерживания азаметиофоса                    5 мин. 42 с.

Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в месяц и при изменении условий анализа.

9.4 Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 2 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ОБУВ азаметиофоса необходимо отобрать 20 куб. дм воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение месяца в пробирках с притертыми пробками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан вместимостью 25 куб. см и дважды экстрагируют этанолом по 5 куб. см. Экстракты объединяют. Степень десорбции азаметиофоса с фильтра 98%. Хроматографический анализ проб выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Количественное содержание азаметиофоса в хроматографируемом объеме (мкг) определяют по предварительно построенному градуировочному графику.

11. Вычисление результатов измерения

Концентрацию азаметиофоса в воздухе (С, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание азаметиофоса в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, куб. мм;

б — объем раствора пробы, взятой для анализа, куб. мм;

V — объем воздуха, отобранного для анализа (куб. дм) и приведенного к стандартным условиям (Прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде:

С +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м, Р = 0,95,

значение ДЕЛЬТА = 0,005 + 0,130С мг/куб. м,

где ДЕЛЬТА — характеристика погрешности;

С — значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых	Наименование метрологической характеристики
концентраций азаметиофоса, мг/куб. м	характеристика погрешности ДЕЛЬТА, мг/куб. м, р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, мг/куб. м (р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, мг/куб. м (р = 0,95, m = 2)
0,5 — 5,0	0,005 + 0,13С	0,002 + 0,17С	0,02 + 0,34С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе (С).

13.1 Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике.

    После  отбора  пробы  экстракт с фильтра  делят на  две равные
части,  первую  из которых  анализируют  в точном  соответствии  с
прописью  методики  и получают  результат анализа исходной рабочей

пробы (С ). 1

    Вторую  часть  разбавляют  соответствующим растворителем в два
раза и  снова  делят  на  две  равные  части,  первую  из  которых
анализируют  в  точном  соответствии  с прописью методики, получая
результат анализа  рабочей пробы, разбавленной в два раза (С ). Во

                                                        2

вторую  часть  делают  добавку  анализируемого  компонента  (X) до
массовой   концентрации   исходной   рабочей   пробы  (С )  (общая

                                                    1

концентрация  не  должна  выходить  за  верхнюю  границу диапазона
измерения)  и  анализируют  в   точном   соответствии  с  прописью
методики,  получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в
два  раза,  с  добавкой  (С ). Результаты анализа исходной рабочей

                       3

пробы (С ),  рабочей пробы, разбавленной в два раза (С ) и рабочей
        1                                             2
пробы,  разбавленной  в  два  раза, с  добавкой  (С )  получают по

                                               3

возможности  в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик
с  использованием   одного  набора  мерной  посуды,  одной  партии

реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

                   |С  - С  - Х| + |2C  - C | = К,
                     3    2           2    1

где:
С  - результат анализа рабочей пробы;
 1
С  - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;
 2
С  - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза,
 3

с добавкой анализируемого компонента; Х — величина добавки анализируемого компонента; К — норматив оперативного контроля погрешности.

К = 0,002 + 0,17С мг/куб. м

13.2 Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

                           |C  - C | <= D,
                             1    2

где:
С  - результат анализа рабочей пробы;
 1
С  - результат анализа  этой  же  пробы,  полученный в  другой
 2

лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов; D — допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,02 + 0,34С мг/куб. м

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Методические указания разработаны: НИИ медицины труда РАМН (Е. Н. Грицун); ОАО НИЦБЫТХИМ (С. А. Медведева).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (T 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

                         V  х (273 + 20) x Р
                          t

                       V   = -------------------,
                        20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.

ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 (коэффициентов (Прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

Давление Р, кПа/мм рт. ст.
°С	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/ 750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	0,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9830	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Название вещества	Опубликованные методические указания
1	2
Желатин	МУ № 1719-77 «Методические указания на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок». — Вып. 1 — 5. — М., 1981. — 235 с.
Крахмал	-«-»
Сахарная пудра (сахароза)	-«-»

---