Временные методические указания по газохроматографическому определению титуса в почве, зеленой массе, воде

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6186-91)

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИТУСА В ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, ВОДЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Титус — N-((1,6-диметоксипиримидин-2ил)аминокарбонил)-3-(этилсульфонил)-2-пиридинсульфамид — применяется как гербицид в посевах ячменя.

       SO CH CH
 // \ /  2  2  3

\ / \	C H S № O . OCH 14 17 2 5 7 N ──/ 3

         2        \ __ /
                  N ── \
                        OCH
                           3

1. Характеристика препарата

Титус представляет собой белое кристаллическое вещество, не имеющее запаха, растворимое в хлороформе, хлористом метилене, ацетоне, ацетонитриле.

2. Методика определения титуса в почве, зеленой массе

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении титуса из проб исследуемых объектов смесью буферного раствора pH 7 и метанола, очистке и концентрировании экстрактов с последующим определением методом газожидкостной хроматографии с электронозахватным детектором.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

ПРЕДЕЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Объект	Предел обнаружения, мг/кг, мг/л	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Относительное стандартное отклонение, %	Доверительный интервал среднего, %, при n = 5, P = 0,95
Почва Зеленая масса Вода	0,03 0,09 0,001	79,2 63,8 88,4	79,2 +/- 1,95 63,8 +/- 1,9 88,4 +/- 0,6	5,1 4,9 1,24	6,3 7,3 1,4

3. Реактивы, растворы, материалы

Титус.

Метиловый спирт, хч, ГОСТ 6995-77.

Буферный раствор (калий фосфорнокислый двузамещенный 1 М) pH 7.

Фосфорная кислота, хч, ГОСТ 2156-76.

Метилен хлорид, ч, ТУ 6-09-3716-74.

Хлороформ, ГОСТ 20015-74.

Ацетон, осч, 9-5 ТУ 6-09-3513-86.

Трифторуксусный ангидрид, ТУ 6-09-4135-75.

Пиридин, ч, ГОСТ 13647-78.

Хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм) с 5% XE-60.

    Приготовление  смеси  для   экстракции   (25%   метанола,  75%
буферного раствора pH 7): к 150 мл 1 М K HPO   прибавить  1350  мл
                                        2   4
дистиллированной   воды,  довести  pH  раствора  до  7  с  помощью
концентрированной  фосфорной кислоты (2 - 2,5 мл) (pH проверить на

pH-метре). Затем прибавить 500 мл метанола и тщательно перемешать. Конечное pH смеси должно быть 7,5.

Основной стандартный раствор титуса, содержащий 100 мкг/мл, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл в хлороформе.

Раствор хранят в холодильнике не более месяца. Рабочие растворы титуса 2 — 10 мкг/мл. Хранят растворы в холодильнике не более 5 дней.

4. Приборы и посуда

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75.

Колбы конические, 50, 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (тип «Цвет», «Газохром» или др.).

Микрошприцы на 10 мкл, ТУ 2-833-106.

Колонки стеклянные хроматографические, длина 1 м, d = 3 мм.

5. Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Минздравом СССР за № 2051-79 от 21 августа 1979 г. Пробы хранят в морозильной камере (-14 — 20 °C).

6. Проведение определения

Экстракция и очистка экстрактов

Почва, зеленая масса. 50 г почвы (10 г измельченного растительного материала) помещают в коническую колбу, заливают 70 — 100 мл экстракционной смеси и встряхивают 1 час. Фильтрат сливают. Повторяют экстракцию дважды с 70 мл смеси в течение 15 мин. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку и проводят экстракцию препарата 3 раза по 50 мл метиленхлоридом (хлороформом). Отделяют метиленхлорид и упаривают досуха при температуре бани не выше 40 °C.

Вода. Пробу воды (1 л) помещают в делительную воронку, доводят pH до 7,5 и экстрагируют препарат по 50 мл метиленхлоридом, каждый раз встряхивая воронку 3 — 5 мин. Объединяют метиленхлоридный экстракт и упаривают при температуре бани не выше 40 °C до объема 0,2 — 0,3 мл.

Определение методом ГЖХ

Удаляют остаток растворителя на воздухе. К сухому остатку пробы приливают 50 мкл трифторуксусного ангидрида и 10 мкл пиридина. Выдерживают приготовленный раствор в течение 30 мин. при комнатной температуре, после чего добавляют 1 мл хлороформа и 5 мл дистиллированной воды, интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз хлороформную фазу упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона. После чего 4 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф.

Параллельно проводят аналогичную подготовку стандартного раствора титуса (5 мкг и 3 мкг) и контрольную пробу. Расчеты выполняют по сравнению пиков фторпроизводного титуса в стандартном растворе и в пробе.

Условия хроматографирования

Хроматограф с ДПР.

Колонка стеклянная, длина 1 м, d = 3 мм.

Носитель — хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм).

Неподвижная фаза — 5% XE-60.

Температура испарителя — 250 °C;

детектора — 250 °C;

колонки — 180 °C.

Скорость газа-носителя — 55 мл/мин. (через колонку); - 150 мл/мин. (на поддувку).

Вводимый объем — 4 мкл.

Время удерживания фторпроизводного титуса — первый пик 7 мин. 48 с;

второй пик — 27 мин.

Минимально детектируемое количество — 9 нг.

Содержание титуса в пробе рассчитывают по формуле:

                        C   x S   x V   x V
                         ст    пр    ст    0

X = --------------------,

                           S   x V   x M
                            ст    пр

где:

X — количество препарата в пробе, мг/кг, мг/л;

C — содержание вещества в стандарте, мкг/мл; ст

V — объем стандарта, вводимого в колонку газового ст хроматографа, мкл;

V — объем анализируемой пробы, введенный в колонку газового пр хроматографа, мкл;

V — общий объем анализируемой пробы, мл; 0

S — площадь пика анализируемой пробы, кв. мм; пр

S — площадь пика стандарта, кв. мм; ст

7. Техника безопасности

Выполняются в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР», № 2255-81 от 20.10.81.

---