Временные методические указания по определению остаточных количеств Ивина и его комплексов в воде методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6077-91)
29 июля 1991 г. № 6077-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИВИНА И ЕГО КОМПЛЕКСОВ В ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Торговое назначение: Ивин (1); потейтин (Ивин-ян) (2); капанин (Ивин-Х); Ивин-П (4), ТУ 88 УССР 192-076-86.
(1) N-окись 2,6-лутидина (N -окись 2,6-диметилпиридина).
//\
| 7 9 |
|---|
/\\ /\ H C \\/ CH М.м. 123,15. 3 N
O
(2) Комплекс N-окиси 2,6-лутидина с янтарной кислотой.
//\
| 11 15 5 |
|---|
/\\ /\ H C \\/ CH x HO C(CH ) CO H М.м. 241,24. 3 N 3 2 2 2 2
O
(3) — Комплекс N-окиси 2,6-лутидина с хлористоводородной кислотой.
//\
| 7 10 |
|---|
/\\ /\ H C \\/ CH М.м. 159,6. 3 N 3
OHCl
(4) — Комплекс N-окиси 2,6-лутидина с пиколиновой кислотой.
//\
| 13 14 2 3 |
|---|
/\\ /\ H C \\/ CH //\ М.м. 246,27. 3 N 3 // \ O /\\ / HO C \\/ 2 N
Химически чистый препарат Ивин представляет собой бесцветную, прозрачную жидкость со слабым специфическим запахом. Комплексы Ивина — вещества со специфическим запахом основного вещества (Ивина). Ивин хорошо растворим в воде, спирте, ацетоне и др. органических растворителях, гигроскопичен.
Комплексы Ивина растворимы в воде и спирте (метиловом и этиловом).
Препараты Ивина и его комплексы устойчивы в течение года при хранении в герметичной посуде при температуре 20 +/- 5 °C и влажности не более 80%.
Ивин и его комплексы малотоксичны:
Ивин — ЛД при пероральном введении 1390 мг/кг для белых 50 мышей; для крыс — 1645 мг/кг;
Ивин-Ян — ЛД для мышей при пероральном введении 4550 мг/кг; 50
Ивин-Х — ЛД для мышей при пероральном введении 2450 мг/кг. 50
Ивин и его комплексы предложены как высокоэффективные регуляторы роста для овощных культур.
2. Методика определения Ивина, комплексов Ивина в воде
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод включает упаривание анализируемой пробы досуха в присутствии соляной кислоты на ротационном испарителе, вымывание препарата этиловым спиртом, упаривание спирта, нейтрализацию сухого остатка, экстрагирование бензолом и определение ТСХ.
2.1.2 Метрологическая характеристика
Нижний предел обнаружения, мг/л, — 0,0006.
Диапазон определяемых концентраций, мг/л, — 0,0006 — 0,605.
Среднее значение определения C, %, — 90,1.
Стандартное отклонение S, %, +/- 7,0.
Относительное стандартное отклонение Sr, %, — 2,2.
Доверительный интервал дельта, %, +/- 4 (n = 10).
2.1.3 Избирательность метода
Определению не мешают неорганические и органические примеси, присутствующие в воде.
2.2. Реактивы, растворы и материалы
Ивин и его комплексы, ТУ 88 УССР 192-076-86.
Бензол, чда, ГОСТ 5955-75.
Бутанол-1, чда, ГОСТ 6006-78.
Гидроксид калия, чда, ГОСТ 24363-80.
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Соляная кислота, хч, ГОСТ 3118-77.
Уксусная кислота, чда, ГОСТ 61-75, ледяная.
Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5962-67.
Хроматографические пластинки «Силуфол» UV 254 (ЧССР), размер 150 x 150 и 200 x 200 мм.
Стандартные растворы Ивина в бензоле с содержанием 0,01 и 0,001 мг/мл. Навеску 100 мг Ивина, помещенную в мерную колбу на 100 мл, растворяют в бензоле. Рабочие растворы готовят разбавлением полученного 0,1% раствора. На хроматограмму наносят: 0,001% (0,01 мг/мл) раствор — 0,1 мл (1 мкг); 0,01 мл (0,1 мкг); 0,0001% (0,001 мг/мл) раствор — 0,5 мл (0,5 мкг); 0,1 мл (0,1 мкг); 0,05 мл (0,05 мкг).
Растворы стабильны в течение месяца при хранении в плотно закрытой колбе при температуре 20 +/- 5 °C.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Хроматоскоп со светофильтром 254 нм, ТУ 64-1-1618-77.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
Весы ВЛП-200, МВ 20М, ГОСТ 24104-80.
Водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл и 25 мл.
Колбы круглодонные на шлифе, ГОСТ 25336-82, вместимостью 500 мл.
Колбы остродонные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 мл.
Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74, на 1, 2, 5 и 10 мл.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл.
Микрошприцы МШ-1, МШ-10, ТУ 2-833-106, на 1 мкл и 10 мкл.
Стеклянный фильтр ХУ-1 пор. 41, ГОСТ 25336-82.
2.4. Подготовка к определению
Подготовить пластинки «Силуфол» UV 254 размером 5 x 10. На расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки нанести осторожно, стараясь не повредить поверхность сорбента, линию старта и линию финиша (4 см от старта).
Хроматографическую камеру за 1 час до начала хроматографирования заполняют подвижной фазой до уровня 0,5 — 0,7 см. Для контроля насыщения парами элюента в камеру можно опустить полоску фильтровальной бумаги шириной 5 см.
2.5. Отбор проб
Отбор проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за № 2051-79. Отобранные пробы следует хранить в стеклянной таре в темном месте.
2.6. Проведение определения
2.6.1 Вода
250 мл отобранной пробы помещают в круглодонную колбу на 500 мл. К пробе добавляют 0,2 мл HCl конц. и упаривают досуха на ротационном испарителе. Из сухого остатка этиловым спиртом <*> вымывают хлористоводородную соль Ивина (5 мл, 3 мл, 3 мл). Упаривают этиловый спирт досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл дистиллированной воды, нейтрализуют (или разлагают соль Ивина) водный раствор гидроксидом калия (добавляют 1 — 2 гранулы твердого KOH). Раствор фильтруют, используя стеклянный фильтр, промывают осадок (одновременно смывают колбу) бензолом (3 мл, 3 мл). Фильтрат переносят в делительную воронку, отделяют бензольный раствор, а водный еще дважды (2 мл, 2 мл) подвергают экстракции. Объединяют бензольные вытяжки, упаривают на роторном испарителе до объема 0,2 — 0,5 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку. На ту же пластинку наносят стандартные растворы от 0,06 — 0,12 мкг Ивина и проводят хроматографирование в системе растворителей бутанол-1:уксусная кислота:вода (7:3:1). В случае получения интенсивного пятна пробы следует пробу разбавить. После окончания процесса хроматографирования пластинку извлекают из камеры и сушат на воздухе.
<*> Делается с целью уменьшения примесей.
После удаления растворителя хроматограмму наблюдают в ультрафиолетовом свете при 254 нм. Ивин обнаруживается в виде темных пятен на белом фоне, R = 0,38 +/- 0,2. Минимально
f
открываемое количество на хроматограммах 0,04 мкг.
2.7. Обработка результатов
Количественное определение Ивина либо его комплексов проводят сравнением размеров пятен хроматографируемой пробы и стандартных растворов. Для расчета содержания Ивина и его комплексов в хроматографируемой пробе выбирают пятно стандарта, наиболее близкое по размерам к пятну пробы.
Расчет содержания Ивина либо его комплексов в литре раствора производят по формуле:
E
A — содержание Ивина либо его комплекса в анализируемом растворе, мг/л;
E — содержание Ивина (его комплекса) в анализируемом бензольном растворе, мкг;
3. Требования безопасности
Весы и хроматоскоп должны быть заземлены. Работа с органическими растворителями и кислотами только в вытяжном шкафу.