Временные методические указания по определению остаточных количеств димилина в яблоках тонкослойной хроматографией
Актуально на 02.11.2026.
Как цитировать: "Временные методические указания по определению остаточных количеств димилина в яблоках тонкослойной хроматографией". 6075-91. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6075-91
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6075-91)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
29 июля 1991 г. № 6075-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМИЛИНА В ЯБЛОКАХ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Название по номенклатуре ИСО, СЭВ — дифлюбензурон.
Химическое название N-(2,6-дифторбензил)-N-(4-хлорфенил).
_____F _____ C H ClF N O . // \\ CONHCONH // \\Cl 14 9 2 2 2 \ ___ / \ ___ / ─── F ─── М.м. 310,7.
В чистом виде кристаллы белого цвета с Т. пл. 230 — 230 °C. -8
Давление паров при °C 0,013 мПа (9,8 x 10 мм рт. ст.). Растворимость в воде при 20 °C 0,1 мг/л, в неполярных растворителях - 10 г/л, в ацетоне - 6,5 г/л при 25 °C, в
диметилформамиде — 104 г/л, диоксане — 20 г/л.
ЛД орально для мышей и крыс 4640 мг/кг, для кроликов 2000 50 мг/кг. СК для рыб 130 — 140 мг/л. 50
В США МДУ в пищевых продуктах 0,05 мг/кг. Допустимое суточное потребление (ADJ) 0,02 мг/кг. В СССР МДУ в яблоках 0,1 мг/кг.
Применяется в качестве инсектицида на яблонях, цитрусовых, овощах.
2. Методика определения димилина в яблоках тонкослойной хроматографией
2.1. Основные положения
2.1.1. Метод основан на извлечении димилина из яблок смесью гексан — ацетон, очистке экстракта кислотно-щелочным перераспределением димилина и определении тонкослойной хроматографией на пластинках «Силуфол».
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Диапазон измеряемых концентраций — 0,03 — 3,30 мг/кг.
Предел обнаружения в хроматографируемой пробе — 0,2 мкг.
Предел обнаружения в яблоках — 0,03 мг/кг.
Среднее значение определения стандартных количеств димилина в яблоках при n = 15 +/- 10%.
Доверительный интервал среднего определения при n = 5 и p = 0,95 87 +/- 12%.
Размах варьирования R 70 — 100%.
2.1.3 Избирательность метода
Метод селективен. Избирательность метода обеспечивается сочетанием двух систем подвижных растворителей различной полярности и двух проявляющих реагентов.
2.2. Реактивы и растворы
Этилацетат, хч, ГОСТ 22300-76.
Бензол, чда, ГОСТ 5955-75.
Хлороводородная кислота, HCl, чда, ГОСТ 3118-77, концентрированная.
Гидроксид калия, ч, ГОСТ 24363-80.
Гидроксид натрия, NaOH, ГОСТ 11078-78, очищенный 4 н раствор.
Сульфат натрия, хч, ГОСТ 4166-76, безводный.
Калий йодистый, KI, хч, ГОСТ 4232-74.
Натрий нитрит, Na NO , ГОСТ 4197-74. 2 3
Уксусная кислота, ГОСТ 61-75, ледяная.
Калий марганцевокислый, KMnO , ч, ГОСТ 20490-75. 4
Проявляющий реагент № 1. Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г KI и доводят до 500 мл дистиллированной водой. Раствор хранить в темном месте. Срок годности 2 недели. На обработку одной хроматограммы идет около 1 мл реагента.
Проявляющий реагент № 2. Раствор А. К смеси, состоящей из 46 мл воды и 4 мл концентрированной HCl, добавляют 1,5 г нитрита натрия. Раствор Б. Растворяют 2,8 г KOH в 50 мл дистиллированной воды и прибавляют 0,3 г а-нафтола.
Растворы А и Б готовят перед использованием.
Стандартный раствор димилина в ацетоне с содержанием 1000 мг/мл (раствор 1) и 10 мкг/мл (раствор 2).
Стандартные растворы димилина стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.
Пластинки «Силуфол», производства «Хемапол», ЧССР, размером 150 x 150 мм.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Камеры хроматографические, стеклянные, с пришлифованными крышками, ГОСТ 25336-82Е, или аналогичные.
Лампа УФ-света, ртутно-кварцевая, с широким диапазоном волн, ТУ 46-22-236-79, или аналогичная.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный.
Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82Е.
Колбы плоскодонные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 500, 250 мл.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 500 мл.
Пипетки с делениями, ГОСТ 20292-74Е.
Пробирки градуированные с пробками на шлифах, ГОСТ 1770-74Е, вместимостью 5 мл.
Эксикатор, ГОСТ 25336-82Е, вместимостью не менее 2 л.
Микрошприц на 100 мкл или микропипетка, ГОСТ 20392-74Е, на 0,1 мл.
2.4. Подготовка к определению
Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей гексан:ацетон (2:1) и бензол:этилацетат (6:1) для насыщения камер парами подвижного растворителя. Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше чем на 0,7 — 1,0 см от уровня дна камеры.
Камеру для хроматографирования готовят следующим образом: на дно эксикатора помещают чашку Петри с 5 г KMnO , а затем к ее
4
содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной HCl. Камеру закрывают прошлифованной крышкой. Камера может быть
использована через 5 — 10 минут.
2.5. Отбор проб
Отбор проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Минздравом СССР 21.08.1979, № 2051-79.
2.6. Проведение определения
Пробу измельченных яблок (30 г) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, добавляют 70 мл смеси гексана с ацетоном (2:1) и 0,2 мл концентрированной HCl. Димилин экстрагируют при помощи механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт пропускают через пористый фильтр со слоем безводного сульфата натрия в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию димилина повторяют еще два раза тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (N 10 г), а затем фильтруют через пористый фильтр в круглодонную колбу вместимостью 500 мл. Сульфат натрия промывают 2 — 3 раза смесью гексан — ацетон (2:1) общим объемом № 10 мл и полученный раствор также переносят в круглодонную колбу. С помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. Остаток из колбы количественно с помощью 10 мл ацетона переносят в делительную воронку на 500 мл, добавляют 250 мл дистиллированной воды и около 0,5 мл 4 н NaOH до pH 10. Экстракт промывают три раза гексаном, порциями по 50 мл. Гексановую фазу отбрасывают. К водной фазе пипеткой добавляют около 0,5 мл концентрированной HCl до pH 1. И трижды экстрагируют димилин гексаном, порциями по 50 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (~ 5 г), а затем порциями фильтруют в грушевидную колбу вместимостью 50 мл. Каждую порцию концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 — 2 мл. Последнюю порцию гексана удаляют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и тщательно обмывают стенки колбы растворителем. Для хроматографирования отбирают с помощью микрошприца на 100 мкл или микропипеткой на 0,1 мл аликвотную часть раствора (0,1 — 0,2 мл) и наносят на хроматографическую пластинку «Силуфол». Справа и слева от рабочей пробы таким же образом по 0,1 мл наносят серию стандартных растворов с содержанием 0,2; 0,4; 0,6...1,0 мкл димилина, подготовленных следующим образом: в ряд градуированных пробирок вместимостью 5 мл пипеткой на 1 мл из стандартного раствора № 2 переносят 1, 2, 3... мл и доводят до метки гексаном.
Хроматограмму развивают в системе гексан:ацетон (2:1) или бензол:этилацетат (6:1). После развития хроматограмму на 15 минут помещают под лампу УФ-света, затем после полного выветривания паров хлора хроматограмму обрабатывают проявляющим реагентом № 1.
Димилин на хроматограммах проявится в виде темно-серых пятен сначала на белом, а затем на бежевом фоне с R 0,40 +/- 0,05 - в
f
первой системе подвижных растворителей и 0,35 +/- 0,02 - во второй. Линейный диапазон определения 0,2 - 1,0 мкг в хроматографируемой пробе. Пятна стабильны в течение нескольких
месяцев.
В качестве альтернативного проявления используют проявляющий реагент № 2. Хроматограмму после облучения в УФ-свете последовательно обрабатывают растворами А и Б. Димилин проявляется в виде красных пятен на бледно-желтом фоне. Линейный диапазон определения — 0,5 — 10 мкг. Пятна стабильны в течение длительного времени.
2.7. Обработка результатов анализа
Количественное определение димилина в анализируемой пробе проводят путем сравнения площадей и интенсивности пятен рабочей пробы и серии стандартных растворов и содержание его (X) в мг/кг вычисляют по формуле:
A x V
A — количество димилина, найденное в хроматографической пробе, мкг;
V — объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл; а
3. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности, принятые для работы с пестицидами и горючими растворителями.