Методические указания по определению ровраля в растительном материале, почве, воде методом газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3023-84)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОВРАЛЯ В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ, ПОЧВЕ, ВОДЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

(Дополнение к № 2422-84 от 06.08.81)

1. Краткая характеристика препарата

Действующее вещество — ипродион (гликофен) — 1-изопропилкарбамоил-3-(3',5'-дихлорфенил)-гидантоин.

                      O        Cl
                   __//    __ /             C  H  Cl N O .
    (CH ) CHNHCO-N/  \N__//  \\              13 13  2 2 3
       3 2        \  /   \ __ /

                    O          Cl

Действующее вещество — белые негигроскопичные кристаллы без запаха. Точка плавления — 136 °C. Малорастворимо в воде (13 мг/л при 20 °C), растворимо в большинстве органических растворителей. Технический продукт и препарат стабильны при хранении.

Ровраль малотоксичен для теплокровных животных. LD для крыс — 3,5 50 г/кг при оральном введении.

Ровраль — защитный фунгицид контактного действия. Эффективен в борьбе с болезнями зерновых культур, виноградной лозы, земляники, подсолнечника, цветочных культур.

ПДУ в винограде и землянике — 0,4 мг/кг, в картофеле, огурцах и томатах — не допускается. ПДК в воде и почве не установлены.

2. Методика определения ровраля

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на гидролитическом расщеплении ровраля раствором серной кислоты (1:1), ацилировании ангидридом полифторкарбоновой кислоты и определении образующегося производного методом ГЖХ с электронозахватным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода (n = 5) приведена в табл. 1.

Таблица 1

Анализируемая проба	Диапазон определяемых концентраций (мг/л, мг/кг)	Предел обнаружения (мг/л, мг/кг)	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Доверительный интервал, %
Вода Почва Растительный материал	0,01 — 0,2 0,1 — 1,0 0,1 — 1,0	0,005 0,05 0,05	94 99 92	4 5 11	94 +/- 6 99 +/- 6 92 +/- 13

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-75.

Хлороформ фарм., ГОСТ 20015-74, перегнанный.

Бензол хч, ГОСТ 5955-68.

н-Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Спирт этиловый ректификованный, ГОСТ 5962-67.

Серная кислота концентрированная, ч, ГОСТ 4203-77.

Натрия гидроокись хч, ГОСТ 4328-77, 15% раствор.

Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76.

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77, 1% раствор.

Ангидрид 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты.

    Для  получения  ангидрида 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовую
кислоту  (CF OCF CF COOH) кипятят над равным объемом фосфорного ангидрида 3
            3   2  2

часа, затем отгоняют ангидрид при 112 — 114 °C.

Азот осч, ГОСТ 9293-74, или аргон ч, высший сорт, содержание O <= 2 0,002%.

Газ для отдувки (воздух, азот, гелий, аргон).

Хроматон № AW DMCS (0,16 — 0,20 мм) с 5% XE-60 (ЧССР) или

Хроматон № AW DMCS (0,16 — 0,20 мм) с 5% SE-30 (ЧССР).

Стандартный раствор № 1 ровраля в этиловом спирте с концентрацией 100 мгл/мл.

Стандартные растворы ровраля с концентрацией 0,5, 1,0, 2,0 мкг/мл готовят разбавлением стандартного раствора № 1 дистиллированной водой.

2.3. Приборы и посуда

Хроматограф «Цвет-106» (или любой другой с детектором по захвату электронов).

Колонка стеклянная 1 м x 3 мм.

Ротационный испаритель вакуумный любого типа.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Баня водяная или масляная.

Термометры электроконтактные до 100° и 150°, ГОСТ 9871-75.

Воронки делительные емкостью 100 мл, тип УШ, ГОСТ 8613-75.

Колбы круглодонные емкостью 100 мл КККШ, ГОСТ 10394-72.

Колбы плоскодонные конические емкостью 100 мл и 25 мл, тип КН, ГОСТ 10394-72.

Холодильники с водяным охлаждением, тип ХПТ-КШ, ГОСТ 9499-70.

Воронки фильтрующие диаметром 20 мл, тип ВФ, ГОСТ 9775-69.

Воронки, тип 1а, ГОСТ 8613-75.

Пробирки градуированные со шлифом на 10 мл, тип ПГКШ, ГОСТ 10515-75.

Колбы мерные емкостью 50 мл, тип 1а, ГОСТ 1770-74.

Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10.

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71.

Фильтры бумажные.

2.4. Проведение определения

2.4.1 Отбор проб

Вода. Пробу воды объемом 100 мл экстрагируют в делительной воронке хлороформом порциями по 20 мл и два раза по 10 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C.

Почва, растительный материал. Анализируемую навеску (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу емкостью 100 мл и приливают 30 мл экстрагента (смесь равных объемов ацетона и 1% водного раствора хлористого кальция).

Встряхивают колбу на аппарате для встряхивания 30 мин., отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Операцию повторяют и смывают колбу и фильтрат 10 мл экстрагента. Из объединенного экстракта отгоняют ацетон на ротационном испарителе при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку, в колбу для отгонки приливают 10 мл хлороформа, энергично встряхивают несколько раз и переносят хлороформ в делительную воронку.

Ровраль экстрагируют в делительной воронке этим хлороформом и еще два раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C до 1 — 2 капель. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

2.4.2 Гидролиз, получение производных для ГЖХ и количественное определение

Приливают в колбы 2,5 мл воды и 2,5 мл концентрированной серной кислоты и выдерживают два часа при 120 °C с обратным холодильником. Охлаждают, смывают стенки и шлиф холодильника 5 мл воды, приливают в колбу 5 мл бензола, а затем нейтрализуют при охлаждении 15% раствором гидроокиси натрия до pH 10, контролируя по универсальной индикаторной бумаге. Закрывают колбу притертой пробкой и энергично встряхивают в течение минуты, затем переливают содержимое колбы в делительную воронку. Отделяют бензольный слой и фильтруют его через 0,5 см слой безводного сульфата натрия, засыпанного в фильтрующую воронку. Из фильтрата пипеткой отбирают 0,5 мл раствора, переносят в градуированную пробирку и прикапывают микрошприцем 2 мкл реагента — ангидрида 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты. Через 5 мин. помещают пробирку в стаканчик с водой комнатной температуры, растворитель и избыток реагента отдувают через суженную стеклянную трубку в токе воздуха или инертного газа, не допуская сильного вспенивания, до 1 — 2 капель раствора. При пропускании газа через сухую пробирку наблюдаются потери. К остатку приливают 0,5 мл гексана, встряхивают и вводят 5 мкл раствора в хроматограф.

2.5. Условия хроматографирования

Газ-носитель — аргон ч. При разработке Методики в качестве газа-носителя использовали аргон ч, при использовании азота осч чувствительность детектирования увеличивается в 4 — 5 раз.

Скорость газа-носителя через колонку — 45 мл/мин.

Скорость газа-носителя на продувку детектора — 150 мл/мин.

Температура испарителя — 250 °C, термостатов детектора — 250 °C, колонки (XE-60) — 180 °C.

                                         -12                            -10
    Рабочая  шкала  электрометра  20 x 10    А при работе с аргоном и 10

при работе c азотом осч.

Время удерживания: абсолютное — 2 мин. 28 с, относительное (относительно гексахлорбензола) — 1,55.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят по калибровочному графику.

Для построения калибровочного графика вносят по 1 мл стандартного раствора ровраля, содержащего 0,5, 1,0, 2,0 мкг ровраля, приливают 1,5 мл воды и 2,5 мл серной кислоты и проводят гидролиз, ацилирование, ГЖХ-анализ так, как описано выше.

Строят график зависимости H = f(C),

где:

H — высота пика, мм;

C — содержание ровраля в стандартном растворе, мкг.

Содержание ровраля в анализируемой пробе рассчитывают по уравнению:

                                  A

X = -, P

где:

X — содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг (мг/л);

A — количество препарата, найденное по калибровочному графику, мкг;

3. Требования безопасности

Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, применяемые при работе с органическими растворителями, кислотами и щелочами. Работа с ангидридом 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты проводится в вытяжном шкафу.

---