Временные методические указания по определению плантвакса в зерне и воде хроматографией в тонком слое
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "Временные методические указания по определению плантвакса в зерне и воде хроматографией в тонком слое". 3001-84. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-3001-84
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3001-84)
27 апреля 1984 г. № 3001-84
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПЛАНТВАКСА В ЗЕРНЕ И ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ
1. Краткая характеристика препарата
Плантвакс (оксикарбоксин) — 2-метил-5,6-дигидро-1,4-оксатиин-4,4-диоксид-5-карбоновой кислоты анилид.
/ \
O SO
\ ____ / 2
H C CONHC H
3 6 5
Эмпирическая формула: C H NO S.
12 13 4
Температура плавления: 127,5 — 130 °C.
В 1 л растворителя растворяется (г плантвакса): в воде 1, в бензоле 34, в ацетоне 360, в метаноле 70, в этаноле 30.
Выпускается в виде 20-процентного к.э., 10-процентного дуста и 5-процентных гранул.
Плантвакс — системный фунгицид, рекомендуемый для борьбы с ржавчиной пшеницы.
2. Методика определения плантвакса в зерне и воде
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении пестицида из исследуемой пробы хлороформом и дальнейшем определении методом хроматографии в тонком слое адсорбента («Силуфол», силикагель).
В качестве подвижного растворителя использовали смесь хлороформа и эфира в соотношении = 5:2.
Обнаружение зон локализации пестицида в тонком слое сорбента основано на термическом либо УФ-разложении препарата до аминосоединения, диазотировании его нитритом натрия в солянокислой среде и азосочетании полученных солей фенилдиазония с N-(1-нафтилэтилендиамином) либо альфа-нафтиламином, альфа-нафтолом.
Возможно обнаружение зон локализации плантвакса другим способом: УФ-разложение препарата, N-галогенирование с последующим проявлением образующихся продуктов о-толидином (или йод-крахмальным реактивом).
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Нижний предел обнаружения плантвакса с помощью реакции диазотирования и азосочетания — 0,2 мкг (N-1-нафтилэтилендиамин), 0,5 мкг (альфа-нафтиламин), 1,0 мкг (альфа-нафтол), с помощью реакции N-галогенирования — 0,5 — 1,0 мкг.
Чувствительность определения плантвакса в зерне — 0,07 мг/кг, в воде — 0,015 мг/л.
Средний процент определения заданных количеств пестицида (0,1 мг/л или мг/кг) — 68,0 (в зерне), 35,0 (в воде), стандартное отклонение 17,6% (зерно), 5% (вода).
Диапазон определяемых концентраций — 0,5 — 10 мкг.
Доверительный интервал среднего при P = 0,95 и n = 5 85,0 — +/- 4,9% (для воды) и 68,0 +/- 14,0% (для зерна).
2.2. Реактивы и растворы
Алюминия окись II степени активности, МРТУ 6-09-5296-68.
Гипс (кальций сернокислый CaSO x 2H O). В течение 2 суток прокаливают 4 2
при 180 °C и просеивают через сито 100 меш.
Калия йодид хч, ГОСТ 4232-74.
Кислота соляная хч, ГОСТ 3116-77.
Калий едкий чда, ГОСТ 9286-78.
Крахмал водорастворимый ч, ГОСТ 10163-76.
Метилен хлористый, ТУ 6-09-3716-74, хч.
Натрий азотистокислый хч, ГОСТ 4197-74.
Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76, хч.
Калия перманганат, ГОСТ 20490-75, хч.
альфа-Нафтиламин чда, ГОСТ 8827-74.
альфа-Нафтол чда, ГОСТ 5838-70.
N-(1-нафтилэтилендиамин)дигидрохлорид ч, ТУ 6-09-2544-72.
Силикагель «Л» (5 — 40 мк), ЧССР.
Эфир для наркоза, Госфармакопея СССР.
Проявляющие реагенты (готовят непосредственно перед проявлением): № 1: а) <*> К смеси, состоящей из 46 мл дистиллированной воды и 4 мл концентрированной соляной кислоты, прибавляют 1 г азотистокислого натрия;
<*> Расход реагентов на одну пластинку — 5 мл.
б) N-(1-нафтилэтилендиамин)дигидрохлорид, 1-процентный раствор в этиловом спирте;
в) альфа-нафтиламин, 10-процентный раствор в этиловом спирте;
г) альфа-нафтол (3 г едкого калия растворяют в 50 мл дистиллированной воды, прибавляют 0,5 г альфа-нафтола).
№ 2. Хлорирующий реагент. Готовят смесь равных объемов 1,5-процентного раствора перманганата калия и 12-процентного раствора соляной кислоты.
о-Толидиновый реагент: а) 0,1 г о-толидина растворяют в 0,1 мл уксусной кислоты; б) 0,4 г йодистого калия растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды.
Растворы «а» и «б» объединяют и разбавляют водой до 100 мл.
Йод-крахмальный реагент. Готовят 1-процентный раствор йодистого калия и 2-процентный водный раствор крахмала, последний заваривают. Смешивают эти растворы в соотношении 1:1.
Стандартный раствор плантвакса готовят растворением 10 мг препарата в ацетоне (50 мл). Раствор содержит 200 мкг/мл.
2.3. Приборы и посуда
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронки химические, диаметр 6 см, ГОСТ 26-13-64.
Воронки делительные, емк. 250, 500 мл, ГОСТ 10054-75.
Камера для опрыскивания, ТУ 11-430-70.
Камера для хроматографирования размером 150 — 200 мм.
Колбы мерные емк. 50, 100 мл, ГОСТ 1776-74.
Колбы круглодонные, н/ш, емк. 150, 200 мл, ГОСТ 10-394-63.
Лампа кварцевая ПРК-4 или ПРК-7.
Микропипетка, ГОСТ 1770-74 (для нанесения стандартного раствора).
Пластинки стеклянные размером 90 x 120 мм.
Пипетки емк. 1, 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74.
Прибор для отгонки растворителя.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Цилиндры мерные, емк. 25, 50, 100, 250 мл, ГОСТ 1770-74.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1 Приготовление пластинок
1,5 г растворимого крахмала заваривают в 15 мл воды, прибавляют 110 мл воды и 40 г силикагеля «Л» (или 60 г окиси алюминия), размешивают до образования однородной массы и по 5 г наносят на стеклянные пластинки, равномерно распределяя ее по поверхности. Сушат пластинки на воздухе в течение суток при комнатной температуре.
2.4.2 Отбор проб
Пробы для проведения анализа отбираются согласно «Унифицированным правилам отбора сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденным зам. Главного государственного санитарного врача СССР, № 2051-79.
2.5. Проведение определения
2.5.1 Экстракция, очистка экстракта
Зерно. 25 — 50 г зерна (пшеница, овес) помещают в коническую колбу, приливают хлороформ в таком количестве (~ 50 мл), чтобы проба была полностью покрыта им, и экстрагируют в течение 1 часа, периодически перемешивая пробу.
Экстракцию повторяют еще дважды по 50 мл растворителя, проводя экстракцию в течение 30 мин. каждый раз. Экстракты объединяют и фильтруют через бумажный фильтр («синяя лента»). Упаривают на ротационном испарителе досуха. Колбы охлаждают. Прибавляют 20 мл смеси воды и ацетона в соотношении 3:1. Помещают колбы в морозильную камеру холодильника на 1,5 — 2 часа. Производят фильтрование растворов через плотный бумажный фильтр («синяя лента»). Прибавляют несколько капель соляной кислоты (конц.) до pH = 1 и производят экстракцию хлороформом трижды по 20 мл каждый раз в течение 5 мин. Экстракты объединяют и пропускают через воронку, заполненную б/в сернокислым натрием. Упаривают на ротационном испарителе до небольшого объема (0,05 мл) и наносят на хроматографическую пластинку. В качестве свидетеля наносят стандартный раствор плантвакса (200 мкг/мл) в количестве 5 — 10 мкг.
Вода. 200 мл анализируемой воды помещают в делительную воронку, подкисляют соляной кислотой до pH = 1 и экстрагируют хлороформом или хлористым метиленом трижды по 50 мл. Экстракты объединяют и фильтруют через слой безводного сернокислого натрия и упаривают до небольшого объема (0,05 мл). Сконцентрированную пробу количественно наносят на хроматографическую пластинку.
2.5.2 Хроматографирование
Производят хроматографирование экстрактов в системе растворителей хлороформ + эфир = 5:2 <*>. Когда фронт растворителя поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе и облучает УФ-светом в течение 30 мин. на расстоянии 25 см от источника. Обрабатывают пластинку
проявляющим реактивом № 1 (вначале реактивом «а»), через 1 мин. — реактивом «б» или «в», «г». При наличии плантвакса появляются пятна сиреневого (N -1-нафтилэтилендиамин) или розового цвета (альфа-нафтиламин, 1 альфа-нафтол). Величина R плантвакса 0,38 — 0,40 («Силуфол»), 0,77 f (силикагель) и 0,70 (окись алюминия).
<*> Объем подвижной фазы на камеру размером h = 20 см, d = 14 см составляет 50 мл.
Другой метод обнаружения плантвакса состоит в следующем. После УФ-разложения препарата производят хлорирование, поместив пластинку в эксикатор, на дне которого находится хлорирующий реактив, в течение 3-х минут. Пластинку вынимают из эксикатора и оставляют в вытяжном шкафу в течение 1 часа для удаления избытка хлора. Обрабатывают пластинку о-толидиновым или йод-крахмальным реактивом. Сушат пластинку на воздухе и облучают УФ-светом в течение 5 мин. При наличии плантвакса появляются пятна сине-фиолетового цвета.
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.
Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается до 10 мкг. При большем содержании на пластинку наносят часть раствора.
Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:
A x S
2
X — содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг;
A — содержание препарата в стандартном растворе, мкг;
S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1
S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2
2.7. Требования техники безопасности
Соблюдать требования техники безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.