ГОСТ 23452-2015. Межгосударственный стандарт. Молоко и молочные продукты. Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов

(введен в действие Приказом Росстандарта от 30.11.2015 № 2082-ст)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ГОСТ 23452-79"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-23452-79" "ГОСТ 23452-79. Межгосударственный стандарт. Молоко и молочные продукты. Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов (введен Постановлением Госстандарта СССР"
  n1["ГОСТ 23452-2015"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-23452-2015" "ГОСТ 23452-2015. Межгосударственный стандарт. Молоко и молочные продукты. Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов (введен в действие Приказом Росстандар"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2015 г. № 2082-ст

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ

Milk and milk products. Methods for determination of the hlororganic pesticides residues

ГОСТ 23452-2015

МКС 67.100.10

Дата введения <*> 1 июля 2016 года

<*> Дату введения стандарта в действие на территории государств устанавливают их национальные органы по стандартизации.

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Государственным бюджетным учреждением Ярославской области «Ярославский государственный институт качества сырья и пищевых продуктов» (ГБУ ЯО «ЯГИКСПП»)

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 12 ноября 2015 г. № 82-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2015 г. № 2082-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 23452-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2016 г.

5 ВЗАМЕН ГОСТ 23452-79

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

1. Область применения

Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочные продукты и устанавливает методы определения содержания хлорорганических пестицидов (альфа-, бета- и гамма-изомеров гексахлорциклогексана (ГХЦГ), 4,4'-дихлордифенилтрихлорэтана (ДДТ), 4,4'-дихлордифенилдихлорэтилена (ДДЭ), 4,4'-дихлордифенилдихлорэтана (ДДД):

• методом хроматографии в тонком слое в диапазоне измерений массовой концентрации хлорорганических пестицидов 0,05 — 5,0 мг/кг;
• методом газожидкостной хроматографии с использованием газового хроматографа с электронозахватным детектором в диапазоне измерений массовой концентрации хлорорганических пестицидов 0,005 — 0,5 мг/кг.

2. Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.010-76 Система стандартов безопасности труда. Взрывобезопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования

ГОСТ 12.1.019-2009 <**> Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

<**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009 «Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 427-75 Линейки измерительные металлические. Технические условия

ГОСТ 1277-75 Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 3760-79 Реактивы. Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ ISO 3890-1-2013 Молоко и молочные продукты. Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов). Часть 1. Общие положения и методы экстракции

ГОСТ ISO 3890-2-2013 Молоко и молочные продукты. Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов). Часть 2. Методы очистки экстракта и подтверждение

ГОСТ ИСО 5725-1-2003 <*> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-1-2003 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».

ГОСТ ИСО 5725-3-2002 <**> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерения

<**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерения».

ГОСТ ИСО 5725-4-2003 <***> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений

<***> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-4-2003 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».

ГОСТ ИСО 5725-6-2003 <4*> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

<4*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2003 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».

ГОСТ 5867-90 <5*> Молоко и молочные продукты. Методы определения жира

<5*> В Российской Федерации действуют ГОСТ Р 51331-99 «Йогурты. Общие технические условия», ГОСТ 29247-91 «Консервы молочные. Методы определения жира», ГОСТ Р ИСО 2446-2011 «Молоко. Метод определения содержания жира».

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9293-74 Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809.1-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты

ГОСТ 26809.2-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, отбор проб и подготовка их к анализу. Часть 2. Масло из коровьего молока, спреды, сыры и сырные продукты, плавленые сыры и плавленые сырные продукты

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на территории государства по соответствующему указателю стандартов и классификаторов, составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3. Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины в соответствии с [1] и [2], а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 тонкослойная хроматография: Метод разделения и анализа смеси веществ, основанный на использовании тонкого слоя адсорбента в качестве неподвижной фазы, где разделяемые вещества, в зависимости от сорбционной способности, по-разному распределяются между сорбирующим слоем и протекающим через него элюентом.

3.2 газожидкостная хроматография: Метод разделения и анализа смеси веществ, основанный на их различных температурах кипения и взаимодействия с неподвижной жидкой фазой в потоке газа-носителя.

4. Сокращения

В настоящем стандарте использованы следующие сокращения:

\alpha - \text{ГХЦГ} - \text{альфа} - \text{изомер} гексахлорциклогексана.

\beta - \text{ГХЦГ} - \text{бета} - \text{изомер} гексахлорциклогексана.

\gamma - \text{ГХЦГ} - \text{гамма} - \text{изомер} гексахлорциклогексана.

ДДТ-4,4'-дихлордифенилтрихлорэтан.

ДДЭ-4,4'-дихлордифенилдихлорэтилен.

ДДД-4,4'-дихлордифенилдихлорэтан.

5. Сущность метода

5.1 Метод тонкослойной хроматографии

Метод основан на предварительной экстракции хлорорганических пестицидов, очистке экстракта, разделении аналитов в тонком слое адсорбента хроматографической пластины и их количественном определении путем визуального сопоставления интенсивности окраски пятен и измерения площади пятна на пластине испытуемого экстракта и площади пятна рабочего градуировочного раствора.

5.2 Метод газожидкостной хроматографии

Метод основан на предварительной экстракции хлорорганических пестицидов, очистке экстракта и последующем количественном определении пестицидов с помощью газожидкостной хроматографии с электронозахватным детектором методом абсолютной калибровки.

6. Отбор проб

Отбор и подготовка проб к анализу — по ГОСТ 26809.1, ГОСТ 26809.2.

До начала проведения измерений пробы всех молочных продуктов, за исключением молочных консервов и других молочных продуктов в запаянных или закатанных банках, хранят при температуре от 4 °C до 8 °C, пробы мороженого — при температуре не выше 2 °C.

7. Условия проведения измерений

При выполнении измерений в лаборатории следует соблюдать следующие условия:

8. Метод тонкослойной хроматографии

8.1 Средства измерения, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы

Камера для хроматографирования: сосуд с плоским дном, закрывающийся пришлифованной крышкой.

Облучатель хроматографический типа УФС 254/365 по нормативной документации.

Весы по ГОСТ OIML R 76-1, обеспечивающие точность взвешивания с пределом допускаемой абсолютной погрешности +/- 0,0005 г.

Шкаф сушильный лабораторный любого типа, поддерживающий температуру до 200 °C с погрешностью +/- 5 °C по ГОСТ 14919.

Микрошприц вместимостью 10 мм3 с относительной погрешностью дозирования не более 5%.

Линейка 300 по ГОСТ 427.

Пластины для тонкослойной хроматографии Сорбфил (тип сорбента — силикагель СТХ-1А, зернение 5 — 17 мкм, толщина слоя 90 — 130 мкм, связующее — силиказоль, УФ индикатор-254, тип подложки — ПЭТФ, размер пластины 100 x 100 мм).

Груша резиновая медицинская вместимостью 100 см3.

Шпатель металлический.

Пипетки 1-2-2-1, 1-2-2-2, 1-2-2-5, 1-2-2-10 по ГОСТ 29227.

Колба мерная с притертой пробкой 2-100-2 по ГОСТ 1770.

Колбы круглодонные К-25-29/32 по ГОСТ 25336.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч.д.а.

н-Гексан х.ч. или ч.д.а.

Ацетон ч.д.а. по ГОСТ 2603.

Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, ч.д.а.

\alpha - \text{ГХЦГ} массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

\beta - \text{ГХЦГ} массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

\gamma - \text{ГХЦГ} массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

ДДТ массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

ДДД массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

ДДЭ массовой долей основного вещества не менее 97,0%.

Допускается применение других средств измерения и вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

8.2 Подготовка к проведению измерений

8.2.1 Приготовление градуировочных растворов хлорорганических пестицидов

8.2.1.1 Приготовление градуировочных растворов пестицидов массовой концентрацией 100 мкг/см3

Градуировочные растворы готовят объемно-весовым способом для каждого пестицида отдельно.

В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят (0,010 +/- 0,001) г пестицида и добавляют 10 — 15 см3 н-гексана, растворяют содержимое и доводят объем в колбе н-гексаном до метки.

Срок хранения градуировочных растворов пестицидов в склянках с плотно завинчивающимися крышками при температуре (4 +/- 2) °C — не более 6 мес.

8.2.1.2 Приготовление проявляющего реактива

В мерной колбе вместимостью 100 см3 растворяют 0,5 г азотнокислого серебра в 5 см3 дистиллированной воды, добавляют 7 см3 раствора аммиака и доводят объем в колбе ацетоном до метки.

Проявляющий реактив готовят непосредственно перед проведением анализа.

8.2.2 Подготовка пластины для хроматографирования

Пластину для хроматографирования помещают в хроматографическую камеру, на дно которой налито небольшое количество аммиака, и оставляют. После подъема фронта аммиака до конца пластины ее вынимают из камеры и сушат в вытяжном шкафу до исчезновения запаха аммиака.

Перед использованием пластину активируют в сушильном шкафу при температуре (65 +/- 2) °C в течение 4 мин.

Пластину для хроматографирования готовят непосредственно перед проведением анализа.

8.2.3 Подготовка хроматографической камеры

В хроматографическую камеру наливают смесь подвижных растворителей н-гексана-ацетона в соотношении 6:1 по объему для насыщения ее парами. Объем подвижного растворителя должен находиться на высоте не более, чем 0,5 см от уровня дна камеры.

Хроматографическую камеру готовят за 1 ч до начала хроматографирования.

8.2.4 Подготовка пробы продукта

Подготовку пробы продукта, экстракцию хлорорганических пестицидов и очистку экстракта осуществляют по ГОСТ ISO 3890-1, ГОСТ ISO 3890-2.

8.3 Проведение измерений

Сухой очищенный остаток, полученный по 8.2.4 непосредственно перед проведением измерений, растворяют в круглодонной колбе вместимостью 25 см3, вносят пипеткой 1 см3 н-гексана и перемешивают. Отбирают 0,01 см3 полученного раствора и наносят на линию старта хроматографической пластины, находящуюся от края на расстоянии 2,0 см. Слева и справа от пробы на расстоянии не менее 10 мм наносят по 0,02 см3 градуировочных растворов хлорорганических пестицидов, приготовленных по 8.2.1.1, массовой концентрации 2 мкг/см3 каждого пестицида соответственно.

Пластины с нанесенными растворами пестицидов помещают в камеру для хроматографирования.

После того, как фронт растворителя поднимется на 1 см, пластину вынимают из камеры и оставляют на несколько минут до исчезновения запаха. Затем пластину орошают проявляющим реактивом и подвергают действию ультрафиолетового света в течение 10 — 15 мин на расстоянии 20 см от источника света.

При наличии хлорорганических пестицидов на белом фоне пластинки появляются пятна серо-черного цвета, которые располагаются в следующем порядке (снизу вверх): \gamma - \text{ГХЦГ} (Rf <*> = 0,21), \beta - \text{ГХЦГ} (Rf = 0,26), \alpha - \text{ГХЦГ} (Rf = 0,30), ДДД (Rf = 0,32), ДДЭ (Rf = 0,66), ДДТ (Rf = 0,89).

<*> Rf — отношение расстояния от линии старта до центра зоны вещества к расстоянию от линии старта до фронта растворителя. Величина Rf величина постоянная для соответствующего пестицида и описанной выше системы и зависит от ряда условий: способа элюирования, качества и активности сорбента, толщины слоя, качества растворителей, количества нанесенного вещества, длины пробега растворителей, положения стартовой линии и пр.

По значениям соответствующих Rf определяют наличие хлорорганических пестицидов, присутствующих в продукте.

Для количественного определения пестицидов каждый образец анализируют не менее двух раз, проведя предварительную оценку содержания пестицидов пробы и градуировочных растворов. Объемы градуировочных растворов и их концентрации подбираются в зависимости от интенсивности окраски сравниваемых пятен и их площадей.

8.4 Обработка результатов измерений

Расчет массовой концентрации пестицидов в пробе проводят путем сопоставления площади пятна испытуемого экстракта и площади пятна градуировочного раствора, наиболее близкого по интенсивности окраски к пятну экстракта.

Массовую концентрацию каждого из хлорорганических пестицидов в анализируемой пробе X, мг/кг, вычисляют по формуле

X = \frac{m \cdot S_{1} \cdot V_{1}}{m_{1} \cdot S_{2} \cdot V_{2} \cdot k} , (1)

где m — количество пестицида в 1 см3 стандартного раствора пестицида, мкг;

m1 — масса анализируемой пробы по 8.2.4 продукта, г;

S1 — площадь пятна, полученного при нанесении анализируемого экстракта, см2;

S2 — площадь пятна, полученного при нанесении градуировочного раствора, см2;

V1 — объем экстракта, в котором перерастворен сухой остаток, см3;

V2 — объем анализируемого экстракта, нанесенного на пластину, см3;

k — коэффициент извлечения.

Коэффициент извлечения k для каждого хлорорганического пестицида определяют отдельно с использованием контрольной пробы, в которую заранее вносят известное количество пестицида и проводят через все стадии анализа.

Коэффициент извлечения k рассчитывают по формуле

k = \frac{X - X_{\text{пр}}}{X_{\text{доб}}} , (2)

где X — массовая концентрация пестицида в пробе с добавкой, мг/кг;

Xпр — массовая концентрация пестицида в пробе, мг/кг;

Xдоб — массовая концентрация добавки пестицида, мг/кг.

Площади пятен, мм2, полученных при нанесении анализируемого экстракта S₁ и полученных при нанесении стандартного раствора S₂ вычисляют по формулам

S_{1} = \frac{\pi \cdot D_{1}^{2}}{4} и (3)

S_{2} = \frac{\pi \cdot D_{2}^{2}}{4} , (4)

где D1 — диаметр пятна, полученного при нанесении анализируемого экстракта, см;

D2 — диаметр пятна, полученного при нанесении стандартного раствора, см.

При нанесении всей пробы V1 = V2.

В случае, когда необходимо определить массовую концентрацию хлорорганических пестицидов в пересчете на массовую долю жира, вычисляют по формуле

X = \frac{100 \cdot m \cdot S_{1} \cdot V_{1}}{m_{1} \cdot S_{2} \cdot V_{2} \cdot k \cdot B} , (5)

где 100 — коэффициент пересчета на 1 кг жира.

B — массовая доля жира в продукте, %.

Массовую долю жира продукта определяют по ГОСТ 5867.

Вычисление массовой концентрации хлорорганических пестицидов в анализируемой пробе проводят до третьего десятичного знака. Окончательный результат округляют до второго десятичного знака.

8.5 Метрологические характеристики

Метод тонкослойной хроматографии обеспечивает получение результатов измерения с метрологическими характеристиками (при P = 0,95), не превышающими значений, приведенных в таблице 1.

Таблица 1

Метрологические характеристики

8.6 Обработка результатов определения

Результат определения представляют в виде

X = (\overline{X} \pm U),\text{мг}/\text{кг} , (6)

где \overline{X} — среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, (мг/кг);

U — абсолютная расширенная неопределенность измерений при коэффициенте охвата k = 2, %, рассчитываемая по формуле

U = 0,01 \cdot U_{\text{отн}} \cdot \overline{X} , (7)

где Uотн — относительная расширенная неопределенность измерений (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2, определенная по таблице 1, %.

Числовое значение результата определения должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение расширенной неопределенности измерений.

Допускается результат измерений представлять в виде

X = (\overline{X} \pm U_{\text{лаб}}),\text{мг}/\text{кг} . (8)

При условии Uлаб <= U, где Uлаб — значение расширенной неопределенности измерений, установленное при реализации настоящего метода в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений в лаборатории.

Числовое значение результата определения должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение расширенной неопределенности измерений.

9. Метод газожидкостной хроматографии

9.1 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы

Вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы — по 8.1 со следующим дополнением:

Хроматограф газовый, оснащенный электронозахватным детектором, и программным обеспечением для сбора и обработки данных.

Колонки капиллярные кварцевые для хроматографического разделения длиной 25 - ₅₀ м и внутренним диаметром от 0,25 мм до 0,50 мм с нанесенной неподвижной фазой средней полярности типа (95%)-диметил-(5%)-дифенилполисилоксана и толщиной пленки 0,25 — 0,5 мкм.

Допускается использование набивных колонок длиной 1 — 3 м и внутренним диаметром 3 — 4 мм с использованием в качестве сорбента хроматон зернением 0,16 мм — 0,20 мм с нанесенной неподвижной фазой типа SE или OV и толщиной пленки 0,5 мкм.

Подготовка набивной колонки приведена в приложении А.

Колбы мерные с притертыми пробками 2-10-2, 2-25-2 по ГОСТ 1770.

Насос вакуумный.

Стекловата или стекловолокно.

Азот газообразный по ГОСТ 9293, ос.ч.

Емкости для жидких проб стеклянные (виалы), вместимостью 2 см3, снабженные крышками с силиконовой мембраной.

9.2 Подготовка к проведению измерений

9.2.1 Подготовка реактивов и материалов

9.2.1.1 Приготовление основных градуировочных растворов хлорорганических пестицидов массовой концентрации 100 мкг/см3

Приготовление основных градуировочных растворов хлорорганических пестицидов массовой концентрации 100 мкг/см3 — по 8.2.1.1.

9.2.1.2 Приготовление промежуточных градуировочных растворов хлорорганических пестицидов № 1 массовой концентрации 10 мкг/см3

Промежуточный градуировочный раствор № 1 для каждого пестицида готовят отдельно.

В мерную колбу вместимостью 25 см3 пипеткой вносят 2,5 см3 основного градуировочного раствора пестицида по 9.2.1.1 и доводят до метки н-гексаном и перемешивают.

Срок хранения промежуточных градуировочных растворов пестицидов № 1 в склянках с плотно завинчивающимися крышками при температуре (4 +/- 2) °C — не более 2 мес.

9.2.1.3 Приготовление промежуточных градуировочных растворов хлорорганических пестицидов № 2 массовой концентрации 1 мкг/см3

Промежуточный градуировочный раствор № 2 для каждого хлорорганического пестицида готовят отдельно.

В мерную колбу вместимостью 25 см3 пипетками вносят 2,5 см3 промежуточного градуировочного раствора № 1 по 9.2.1.2 и доводят до метки н-гексаном и перемешивают.

Срок хранения промежуточных градуировочных растворов пестицидов № 2 в склянках с плотно завинчивающимися крышками при температуре (4 +/- 2) °C — не более 2 мес.

9.2.1.4 Приготовление рабочих градуировочных растворов хлорорганических пестицидов

Для приготовления рабочих градуировочных растворов пестицидов массовой концентрации 0,02 мкг/см3, 0,05 мкг/см3, 0,1 мкг/см3, 0,2 мкг/см3 и 2,0 мкг/см3 отбирают пипетками по 0,2 см3, 0,5 см3, 1 см3, 2 см3 промежуточного раствора № 2 соответственно для каждого пестицида и переносят в мерные колбы на 10 см3, а для раствора массовой концентрации 2,0 мкг/см3 отбирают пипеткой 2 см3 промежуточного раствора № 1 в мерную колбу на 10 см3, доводят н-гексаном до метки и перемешивают.

Срок хранения рабочих градуировочных растворов пестицидов в склянках с плотно завинчивающимися крышками при температуре (4 +/- 2) °C — не более одного месяца.

9.2.2 Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа к работе проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации.

Условия хроматографирования, обеспечивающие наилучшее разделение пиков, для конкретного хроматографа и колонки подбираются индивидуально.

Рекомендуемые условия хроматографирования приведены ниже:

а) при работе с капиллярными колонками:

температура детектора — от 270 °C до 290 °C;

температура испарителя — 230 °C;

программирование температуры — двухступенчатое: начальная температура колонки — 150 °C и время анализа при этой температуре — 2 мин; скорость повышения температуры — 5 °C/мин; конечная температура колонки — 250 °C и время поддержания конечной температуры — 20 мин;

газ-носитель — азот;

давление газа-носителя — 0,8 кгс/см2;

скорость прохождения газа-носителя через колонку — 1 - 2 см3/мин;

скорость потока газа-носителя на сбросе — от 38 см3/мин до 39 см3/мин;

скорость газа-поддува в детектор — 40 см3/мин;

инжектируемый объем пробы — 1 мм3;

б) при работе с набивными стеклянными колонками:

температура детектора — 250 °C;

температура испарителя — 230 °C;

температурный режим — изотермический;

температура колонки — 200 °C;

газ-носитель — азот;

скорость газа-носителя — 30 см3/мин;

инжектируемый объем пробы — 1 мм3.

9.2.3 Градуировка хроматографа

Градуировка хроматографа заключается в определении времен удерживания и площадей пиков анализируемых пестицидов и выполняется путем анализа рабочих градуировочных растворов пестицидов по 9.2.1.4 в порядке возрастания массовой концентрации компонентов и условий, приведенных в 9.2.2. Каждый из градуировочных растворов анализируют не менее трех раз.

Расхождение между максимальным и минимальным значениями времен удерживания определяемых компонентов не должны отличаться друг от друга более чем на 1%.

На основании полученных результатов с помощью компьютерной системы сбора и обработки данных методом наименьших квадратов устанавливается уравнение градуировочного графика, и определяются градуировочные коэффициенты для каждого хлорорганического пестицида отдельно.

Примечание - Градуировочные коэффициенты для каждого хлорорганического пестицида признаются приемлемыми, если они получены с коэффициентом корреляции не ниже 0,99.

Периодическую проверку градуировочных характеристик проводят, анализируя 1 — 2 градуировочных раствора не менее одного раза в две недели.

Градуировочная зависимость признается стабильной, если выполняется условие

|Ck — C| <= 0,10·C, (9)

где \overline{C_{k}} — среднеарифметическое значение полученных массовых концентраций пестицида, мкг/см3;

C — заданное значение массовой концентрации пестицида в растворе, используемом для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3.

Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется, то выясняют причины полученного отрицательного результата и процедуру контроля повторяют.

9.2.4 Подготовка пробы продукта

Подготовку пробы продукта, экстракцию хлорорганических пестицидов и очистку экстракта осуществляют по ГОСТ ISO 3890-1, ГОСТ ISO 3890-2.

9.3 Проведение измерений

Для оценки фона (чистоты аналитической системы) каждый раз перед началом измерения инжектируют в прибор 1 мм3 чистого растворителя (н-гексана) и записывают хроматограмму, на которой не должны присутствовать посторонние пики.

Сухой очищенный остаток, полученный по 9.2.4, непосредственно перед проведением измерений, растворяют в круглодонной колбе вместимостью 25 см3, вносят пипеткой 2 см3 н-гексана и перемешивают. Переносят в виалу и отбирают 1 мм3 анализируемой пробы продукта, вводят ее в испаритель газового хроматографа и выполняют хроматографическое разделение в условиях, приведенных в 9.2.3.

По каждой анализируемой пробе проводят два параллельных измерения в условиях повторяемости.

9.4 Обработка результатов измерений

Идентификацию хлорорганического пестицидов на полученной хроматограмме, из очищенного экстракта анализируемой пробы, проводят, сравнивая время удерживания полученных пиков с временем удерживания пиков, полученных по градуировочным растворам хлорорганических пестицидов.

Массовую концентрацию каждого хлорорганического пестицида в анализируемой пробе, X, мг/кг, вычисляют по формуле

X = \frac{C \cdot V}{m \cdot k} , (11)

где C — массовая концентрация хлорорганического пестицида в анализируемой пробе, найденная по градуировочному графику мкг/см3;

V — конечный объем экстракта пробы, см3;

m — масса пробы, используемой для экстракции, г;

k — коэффициент извлечения.

Коэффициент извлечения k для каждого пестицида определяется исполнителем отдельно с использованием контрольной пробы, в которую заранее вносят известное количество пестицида и проводят через все стадии анализа.

Коэффициент извлечения k рассчитывают по формуле

k = \frac{X - X_{\text{пр}}}{X_{\text{доб}}} , (12)

где X — массовая концентрация пестицида в пробе с добавкой, мг/кг;

Xпр — массовая концентрация пестицида в пробе, мг/кг;

Xдоб — массовая концентрация добавки пестицида в пробу, мг/кг.

В случае, когда необходимо определить массовую концентрацию хлорорганических пестицидов в пересчете на массовую долю жира, применяют формулу

X = \frac{100 \cdot C \cdot V}{m \cdot k \cdot B} , (13)

где 100 — коэффициент пересчета на 1 кг жира.

B — массовая доля жира в продукте, %.

Массовую долю жира продукта определяют по ГОСТ 5867.

Вычисление массовой концентрации хлорорганических пестицидов в анализируемой пробе проводят до третьего десятичного знака.

9.5 Метрологические характеристики

Метод газожидкостной хроматографии обеспечивает получение результатов измерения с метрологическими характеристиками (при P = 0,95), не превышающими значений, приведенных в таблице 2.

Таблица 2

Метрологические характеристики

9.6 Оформление результатов определения

Результаты определения представляют в виде

X = (\overline{X} \pm U),\text{мг}/\text{кг} , (14)

где \overline{X} — среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, (мг/кг);

U — абсолютная расширенная неопределенность измерений при коэффициенте охвата k = 2, %, рассчитываемая по формуле

U = 0,01 \cdot U_{\text{отн}} \cdot \overline{X} , (15)

где Uотн — относительная расширенная неопределенность измерений (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2 определенная по таблице 2, %.

Допускается результат измерений представлять в виде

X = (\overline{X} \pm U_{\text{лаб}}),\text{мг}/\text{кг} , (16)

при условии Uлаб <= U, где Uлаб — значение расширенной неопределенности измерений, установленное при реализации настоящего метода в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений в лаборатории.

Числовое значение результата измерений должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение расширенной неопределенности измерений.

9.7 Контроль качества результатов измерений

Контроль качества результатов измерений предусматривает:

• оценку погрешности измерений при реализации отдельной контрольной процедуры проводят методом добавок с использованием стандартных образцов для контроля, сравнивая результат контрольной процедуры с нормативом контроля по [3];
• контроль стабильности результатов измерений проводят на основе контроля стандартного отклонения промежуточной прецизионности и контроля стабильности показателя правильности по ГОСТ ИСО 5725-6 с применением контрольных карт Шухарта.

При неудовлетворительных результатах контроля качества результатов измерений выясняют и устраняют причины отклонений.

9.8 Проверка приемлемости результатов измерений

9.8.1 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости

Проверку приемлемости результатов измерений хлорорганических пестицидов, полученных в условиях повторяемости, проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6.

Результаты измерений, выполненные в условиях повторяемости, считаются приемлемыми, если выполняется условие:

|X_{1} - X_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \overline{X} . (17)

Если данное условие не выполнено, то проводят повторные измерения и проверку приемлемости результатов измерений в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-6.

При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам анализа.

9.8.2 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений массовой концентрации хлорорганических пестицидов в анализируемой пробе, полученных в условиях воспроизводимости (в двух лабораториях), проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6.

Результаты измерений, выполненные в условиях воспроизводимости, считаются приемлемыми, если выполняется условие

|X_{1} - X_{2}| \leq 0,01 \cdot R \cdot \overline{X} . (18)

В случае если предел воспроизводимости превышен, необходимо выяснить, обусловлено ли расхождение в результатах низкой прецизионностью метода измерений и/или различием в анализируемых пробах. Для проверки прецизионности в условиях повторяемости каждая из лабораторий должна следовать процедурам, описанным в ГОСТ ИСО 5725-6.

10. Требования, обеспечивающие безопасность

При выполнении работ следует соблюдать следующие требования:

• помещение, в котором проводят анализ, должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией в соответствии с ГОСТ 12.4.021. Работу с реактивами необходимо проводить в вытяжном шкафу. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных требованиями ГОСТ 12.1.005;
• требования электробезопасности — по ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации приборов;
• требования взрывобезопасности — по ГОСТ 12.1.010;
• помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004, ГОСТ 12.1.018 и быть оснащено средствами пожаротушения — по ГОСТ 12.4.009;
• при работе с концентрированными кислотами и щелочами необходимо использовать спецодежду, защитные очки и резиновые перчатки. При выполнении анализов соблюдают требования безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

К выполнению работ допускаются лица, имеющие квалификацию инженер, техник или лаборант, владеющие знаниями в области газовой хроматографии, навыками проведения анализа и изучившие инструкцию по эксплуатации используемой аппаратуры.

Приложение А (справочное)

ПОДГОТОВКА НАБИВНОЙ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ КОЛОНКИ

Стеклянную колонку длиной 1 — 3 м и внутренним диаметром 3 — 4 мм последовательно промывают этиловым спиртом, ацетоном и хлороформом, сушат при температуре 100 °C — 120 °C в сушильном шкафу и заполняют носителем Хромосорб W-HP или Хроматон N-AW-DMCS (N-AW-HMDS или N-Super) (фракция 0,125 — 0,16 мм или 0,16 — 0,20 мм) с нанесенной неподвижной фазой SE-30, SE-54, OV-17 или SE-60.

Для заполнения хроматографической колонки один ее конец, который в дальнейшем будет подсоединяться к детектору, закрывают тампоном из стекловолокна, промытого последовательно ацетоном и н-гексаном, и присоединяют к вакуумному насосу. Затем включают насос и заполняют колонку носителем с фазой, добавляя последний небольшими порциями и постукивая колонку палочкой с резиновым концом при постоянно работающем насосе, следя за тем, чтобы носитель заполнял колонку равномерно без разрывов.

Заполненную сорбентом колонку устанавливают в термостат колонок и прогревают в потоке газа носителя для удаления летучих соединений, присоединяя один ее конец к устройству ввода пробы. Во избежание загрязнения детектора другой конец колонки к детектору не подсоединяют. Кондиционирование колонки целесообразно проводить следующим образом. Установив расход азота через колонку 35 — 45 см3/мин, выдерживают колонку при температуре 60 °C — 70 °C в течение 20 — 30 мин. Затем поднимают температуру термостата колонок со скоростью 2 — 3 град/мин от 230 °C до 250 °C и при такой температуре кондиционируют колонку в течение 8 ч.

Библиография