ОФС.1.9.1.0001.18. Общая фармакопейная статья. Генотерапевтические лекарственные препараты

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Генотерапевтические лекарственные препараты	ОФС.1.9.1.0001.18 Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на генотерапевтические лекарственные препараты (ГенЛП), относящиеся к биологическим лекарственным препаратам (БЛП).

Генотерапевтические лекарственные препараты — лекарственные препараты, фармацевтическая субстанция которых является рекомбинантной нуклеиновой кислотой или включает в себя рекомбинантную нуклеиновую кислоту, позволяющую осуществлять регулирование, репарацию, замену, добавление или удаление генетической последовательности. ГенЛП, полученные с помощью ряда биотехнологических процессов, предназначены для доставки терапевтического гена, производимого in vivo или ex vivo, в клетки человека или животных с последующей экспрессией in vivo. Нуклеиновая кислота в ГенЛП используется для модификации генетического материала клетки в соответствии с системой доставки. Перенос гена, представляющего собой участок ДНК, осуществляется носителем — вектором вирусного или невирусного происхождения, который может быть включен в клетку человека или животного.

Принцип действия генотерапевтических препаратов заключается в доставке нового генетического материала в клетки-мишени с помощью вектора — системы, переносящей генетический материал. Для переноса генов используются два основных типа векторов:

• бактериальная плазмидная ДНК — природная или синтезированные нуклеиновые кислоты или они связаны с носителем или адъювантом, или в комплексе с другими молекулами (липидами или биополимерами);
• вирусные векторы — вирусы, как правило, не способные к репликации, например, аденовирусы, ретровирусы, вирусы простого герпеса.

Оба типа векторов создают при помощи генетической инженерии с целью экспрессии определенного белка в клетке-мишени.

После переноса векторами генетического материала, он может находиться в цитоплазме, или встраиваться в ядро клетки-реципиента в зависимости от способности ДНК вектора интегрировать в геном клетки-хозяина. В результате происходит генетическая модификация клеток-мишеней для экспрессии требуемого продукта. С учетом специфических свойств конкретного генотерапевтического лекарственного средства и технологии его производства требования, приведенные в настоящей общей фармакопейной статье, могут быть дополнены или изменены в соответствующей фармакопейной статье или нормативной документации. Необходимость замены или использования дополнительных требований для конкретного лекарственного средства должна быть обоснована.

Данная общая фармакопейная статья не распространяется на ДНК-вакцины, препараты клеточной терапии и лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК.

ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Биологическая фармацевтическая субстанция — фармацевтическая субстанция, произведенная с использованием биологического источника, которая является основой для получения ГенЛП. должна быть охарактеризована с использованием физических, химических и биологических испытаний, качество, которой определяется этими испытаниями в сочетании с контролем процессов ее производства;

Ген — последовательность ДНК, кодирующая один или несколько белков.

Вектор — агент трансмиссии (молекула нуклеиновой кислоты, чаще всего ДНК), переносящий генетическую информацию из одной клетки в другую.

Плазмидный вектор — бактериальная плазмида, используемая для переноса гена или генов чужеродной ДНК в клетку хозяина (бактерию) и обеспечивающая размножение чужеродных генов в этих клетках.

Вирусный вектор — вектор, произведенный путем модификации вируса с помощью методов молекулярной биологии для удаления определенных и удерживания некоторых, но не всех, материнских генов вируса. При удалении генов, ответственных за способность вируса к репликации, созданный вектор является неспособным к репликации;

Плазмида — часть ДНК, обычно существующая в бактериальной клетке в виде кольцевой структуры, отделенной от клеточной хромосомы. Плазмида может быть модифицирована с помощью методов молекулярной биологии, выделена из бактериальной клетки и использована для переноса и встраивания ее ДНК в геном другой клетки;

Экспрессирующая конструкция — вектор, который содержит кодирующую последовательность рекомбинантного белка и элементы, необходимые для его экспрессии.

ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ПРОИЗВОДСТВУ

Производство ГенЛП отличается сложностью и многообразием технологических процессов, т.к. связано с биологическими процессами и материалами, такими, как культивирование клеток или экстракция материала из живых организмов. Биологические процессы характеризуются вариабельностью, что приводит к непостоянству спектра и природы сопутствующих продуктов.

Технология получения ГенЛП является новой, требующей дальнейшего совершенствования с учетом специфических особенностей каждого препарата. В связи с этим, к контролю данных препаратов следует применять гибкий подход в зависимости от опыта производства и использования препарата, а также с учетом новых разработок. Все этапы производства фармацевтической субстанции и готового ГенЛП должны быть полностью валидированы. Необходимо обязательное проведение процедур, обеспечивающих постоянство условий производства и характеристик готового препарата. Должны быть созданы и тщательно охарактеризованы главный (ГБК) и рабочий (РБК) банки клеток, в отношении которых должен проводиться регулярный контроль качества. Все процессы производства, использующие клеточные культуры, должны быть валидированы на предмет отсутствия чужеродных вирусов.

Производство вирусных векторов основано на системах банка культур эукариотических клеток и вирусного посевного материала. Вирусные векторы характеризуются с помощью пригодных валидированных методик. Генетическая стабильность вектора определяется допустимым количеством пассажей и оценивается соответствующими методиками.

Производство плазмидных векторов основано на системе банка бактериальных клеток.

Технология производства ГенЛП должна гарантировать обеспечение получения вектора требуемого качества, а также клеток-продуцентов для культивирования вектора.

Исходные вещества, используемые в производстве ГенЛП подлежат контролю (если применимо). Проводятся испытания: подлинности, специфической активности (если применимо), чистоты и безопасности в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота», ОФС «Бактериальные эндотоксины». Используемые в процессе производства клетки и материалы биологического происхождения должны быть охарактеризованы в объеме и соответствовать требованиям безопасности согласно ОФС «Требования к клеточным культурам — субстратам производства иммунобиологических лекарственных препаратов». При оценке рисков контаминации исходного сырья и исходных материалов особое внимание уделяется риску, связанному с контаминацией возбудителями губчатой энцефалопатии животных (ОФС «Уменьшение риска передачи возбудителей губчатой энцефалопатии животных при применении лекарственных средств») и латентными вирусами (ОФС «Вирусная безопасность»). Необходимо проводить регулярный контроль исходных материалов, непосредственно контактирующих с технологическим оборудованием или веществами, участвующими в производственном процессе.

ИСПЫТАНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ

Субстанция представляет собой несколько объединенных очищенных биомасс с возможным добавлением стабилизатора, например, декстрозы и других вспомогательных веществ. По завершении смешивания всех составляющих, субстанция должна быть подвергнута стерилизующей фильтрации. В случае возможных нативных изменений активного вещества и компонентов, входящих в состав субстанции, повторная стерилизующая фильтрация не проводится.

Для предотвращения нежелательного изменения первоначальных свойств, которое может произойти вследствие многократных пересевов или большого числа генераций (пассажей бактериальных клеток, вирусов или клеточных культур), производство биологических фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов, получаемых из бактериальных культур или размножением вирусов в культурах клеток, эмбрионах птиц, тканях и органах животных, должно быть основано на системе главной и рабочей посевных культур и (или) банков клеток (ГБК и РБК). Данная система может быть неприменимой к некоторым типам высокотехнологичных лекарственных препаратов. Количество генераций (удвоений, пассажей) между посевной культурой или банком клеток и биологической фармацевтической субстанцией, либо лекарственным препаратом должно соответствовать требованиям спецификаций в регистрационном досье или протоколе клинических исследований. Посевные культуры и банки клеток необходимо создавать, хранить и использовать таким образом, чтобы риск их контаминации или изменения был сведен к минимуму (например, хранение в герметичных контейнерах в жидком азоте). Используемые в процессе производства клетки и материалы биологического происхождения должны быть охарактеризованы и приведены в соответствие с требованиями микробиологической и вирусной безопасности, указанными в ОФС «Требования к клеточным культурам субстратам производства биологических лекарственных препаратов».

Субстанции, используемые при получении лекарственных препаратов, выпускаемые на разных производствах, должны быть зарегистрированы в установленном порядке.

Качество фармацевтической субстанции и методы ее испытаний оцениваются по приведенным ниже показателям.

Описание. Субстанция должна соответствовать требованиям, указанным в нормативной документации.

Подлинность. Подлинность определяется с помощью комплекса методов, позволяющих специфически идентифицировать действующее вещество, произведенное или выделенное из биологического источника. Для подтверждения подлинности могут быть использованы следующие методы испытания: спектрофотометрический, метод секвенирования кодирующего участка и другие валидированные методы с доказанной специфичностью. Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.

Прозрачность раствора. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».

Цветность раствора. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей».

pH. Приводится допустимый интервал значений pH. Субстанция должна выдерживать требования, определенные в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Чистота. Родственные соединения и посторонние примеси. Данное испытание проводится в случае возможной деструкции активного вещества, произведенного или выделенного из биологического источника в процессе производства, или появления технологических примесей. Требования к чистоте, родственным соединениям и посторонним примесям должны обеспечивать безопасность и эффективность субстанции. Чистота субстанции должна быть определена с помощью ионообменной ВЭЖХ. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография» (ионообменная хроматография) или другими подходящими валидированными методами.

Стерильность. Должна быть стерильна. Данное испытание вводят для субстанций, используемых в производстве готовых стерильных лекарственных средств, которые не подвергаются процедуре повторной стерилизации. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Стерильность».

Пирогенность или бактериальные эндотоксины. Должна быть апирогенна или выдерживать требования по содержанию бактериальных эндотоксинов. Данные испытания проводят для субстанций, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального применения. Субстанции должны выдерживать тест на пирогенность или бактериальные эндотоксины без проведения повторной стерилизации. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Пирогенность» или ОФС «Бактериальные эндотоксины».

В случае если, субстанция не обладает пирогенными свойствами и в процессе производства не может быть загрязнена пирогенными примесями не бактериальной природы, целесообразно проводить испытание на бактериальные эндотоксины.

Аномальная токсичность. Должна быть нетоксична. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность».

Данное испытание обязательно для фармацевтической субстанции, произведенной для реализации с целью введения в государственный реестр лекарственных средств РФ.

Вирусная безопасность. ГенЛП, полученные из крови, плазмы крови, органов и тканей человека не должны содержать поверхностного антигена вируса гепатита B (HBsAg), антител к вирусам гепатитов B, C, ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Определение проводят в соответствии с ОФС «Лекарственные препараты из плазмы крови человека».

Химические показатели (если применимо). Указывают требования к количественному содержанию белка, нуклеиновых кислот, полисахаридов и др. и метод их определения. При определении действующего вещества субстанции используют подходящие валидированные методы анализа.

Вещества, вносимые в субстанцию. Проводят количественное определение содержания веществ, используемых в качестве сорбента, адъюванта, консерванта, стабилизатора и др. Каждый показатель указывают в самостоятельном разделе.

Для фармацевтической субстанции, произведенной для реализации с целью введения в государственный реестр лекарственных средств РФ, данное испытание обязательно.

Специфическая активность. Должно быть предусмотрено определение специфической активности соответствующими валидированными методиками с использованием стандартных образцов. Методики должны быть приведены в фармакопейной статье или нормативной документации на субстанцию.

Транспортирование и хранение (где применимо). В герметичном контейнере при температуре, указанной в нормативной документации. Для замороженного раствора недопустимо повторное замораживание и оттаивание.

ИСПЫТАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА

Описание. Приводится описание свойств ГенЛП для конкретной лекарственной формы.

Подлинность. Подтверждают различными методами биологического, микробиологического, иммунобиологического, молекулярного, химического или физико-химического анализа, позволяющими специфически идентифицировать лекарственный препарат.

Прозрачность раствора. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».

Цветность раствора. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей».

Однородность массы дозированных лекарственных форм (для лиофилизатов). Указывается допустимый интервал средней массы и отклонение от средней массы. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».

pH. Приводится допустимый интервал значений pH. Препарат должен выдерживать требования, определенные в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Механические включения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Время растворения. Должно быть приведено время полного растворения ГенЛП с указанием объема применяемого растворителя.

Потеря в массе при высушивании. Указываются нормативные требования в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» методом, предназначенным для биологических лекарственных препаратов.

Чистота. Родственные соединения, посторонние примеси. Указываются нормативные требования к содержанию родственных примесей и метод анализа (например, метод ионообменной хроматографии ДНК, основанный на адсорбции молекул ДНК на неподвижной фазе) с подробным описанием методики.

Специфическая активность. Испытание проводят с помощью методов количественного определения содержания активного вещества, которое произведено или выделено из биологического источника в соответствии с ОФС «Биологические лекарственные препараты». Выбор метода определения специфической активности in vitro и/или in vivo зависит от вида ГенЛП; предпочтительны те валидированные методы, которые с наибольшей достоверностью характеризуют эффективность лекарственного препарата при его практическом применении. Определение специфической активности должно осуществляться с использованием соответствующих стандартных образцов, откалиброванных по отношению к Международным стандартным образцам (при их наличии).

Пирогенность или бактериальные эндотоксины. Препарат должен быть апирогенным или соответствовать требованиям по бактериальным эндотоксинам, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания для препаратов, предназначенных для парентерального введения, проводят в соответствии с ОФС «Пирогенность» или ОФС «Бактериальные эндотоксины». Для ГенЛП, которые обладают пирогенными свойствами и в процессе производства не могут быть загрязнены пирогенными примесями небактериальной природы, следует проводить испытание на бактериальные эндотоксины.

Стерильность. Должен быть стерильным. Испытание проводят методом прямого посева или мембранной фильтрации в соответствии с ОФС «Стерильность».

Аномальная токсичность. Должен быть нетоксичным. Предварительно, тест-дозу разводят 0,9% раствором натрия хлорида и вводят внутримышечно каждому испытуемому животному, если не указано иначе в фармакопейной статье или нормативной документации. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность».

Неорганический фосфор (для ГенЛП, содержащих бактериальную плазмидную ДНК). В нормативной документации указывают допустимое содержание неорганического фосфора в процентах. Определение проводят спектрофотометрическим методом в соответствии с ОФС «Спектрофотометрическое определение фосфора».

Декстроза в растворе (для ГенЛП содержащих бактериальную плазмидную ДНК). В нормативной документации указывают допустимое содержание декстрозы в растворе испытуемого образца. Определение проводят поляриметрическим методом в соответствии с ОФС «Поляриметрия» с использованием удельного угла вращения декстрозы (глюкозы) [a]D20 = 52,5°.

Однородность дозирования. В нормативной документации указывают содержание основного вещества. Определение проводят спектрофотометрическим методом в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Количественное определение активного вещества. В нормативной документации указывают диапазон нормативных требований. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография» (ионообменная хроматография) или другими подходящими валидированными методами.

Вирусная безопасность. В ГенЛП, полученных из крови, плазмы крови, органов и тканей человека, должна быть подтверждена вирусная безопасность в отношении поверхностного антигена вируса гепатита B (HBsAg); антитела к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ-1, 2), антигена p24 ВИЧ-1; антитела к вирусу гепатита C.

Растворители, выпускаемые в комплекте с лиофилизированным препаратом. В качестве растворителей лиофилизированных препаратов используют растворители, разрешенные к медицинскому применению в РФ при соответствующем пути введения, не влияющие на качество препарата.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Биологические лекарственные препараты» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».

Транспортирование и хранение. В соответствии с ОФС «Биологические лекарственные препараты» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств». Условия хранения ГенЛП должны обеспечивать сохранность всех свойств препарата на протяжении регламентированного срока его годности. Препарат должен храниться в защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °C.

---