ФС.2.6.0030.18. Фармакопейная статья. Колхикум аутумнале. Колхикум. Настойка гомеопатическая матричная
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 15.03.2019 и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.
| Колхикум аутумнале Колхикум Colchicum autumnale Colchicum Настойка гомеопатическая матричная | ФС.2.6.0030.18 |
| Вводится впервые |
Настоящая фармакопейная статья распространяется на Колхикум аутумнале (Колхикум) — Colchicum autumnale (Colchicum) настойку гомеопатическую матричную, получаемую из свежих клубнелуковиц, собранных весной безвременника осеннего — Colchicum autumnale L., сем. лилейных — Liliaceae, и применяемую для производства/изготовления гомеопатических лекарственных средств.
Для получения настойки необходимо:
| Безвременника осеннего клубнелуковиц свежих | - 100 г |
|---|---|
| Спирта этилового 86% (м/м) или 90% (о/о) | - достаточное количество для получения настойки |
Получение настойки гомеопатической матричной осуществляют по способу 2 ОФС «Настойки гомеопатические матричные».
Прозрачная жидкость от желтовато-коричневого до красновато-коричневого цвета с характерным запахом.
Раствор стандартного образца (СО) колхицина. Около 0,01 г СО колхицина растворяют в 10 мл спирта 96%.
Раствор стандартного образца (СО) колхамина. Около 0,01 г СО колхамина растворяют в 10 мл спирта 96%.
Натрия хлорида раствор 0,1%. Раствор 1 г/л.
На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят раздельно полосами длиной 10 мм по 10 мкл настойки и растворов СО колхицина и СО колхамина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч смесью бутанол — уксусная кислота ледяная — вода (40:10:10) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и рассматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме раствора СО колхицина должна обнаруживаться зона светло-коричневого цвета.
На хроматограмме раствора СО колхамина должна обнаруживаться зона коричневого цвета выше зоны на хроматограмме раствора СО колхицина.
На хроматограмме испытуемой настойки должны обнаруживаться (по возрастанию от линии старта) зоны: ярко-голубого цвета, светло-коричневого цвета на уровне зоны на хроматограмме раствора СО колхицина, коричневого цвета на уровне зоны на хроматограмме раствора СО колхамина, светло-коричневого цвета и ярко-голубого цвета; допускается обнаружение дополнительных зон.
2. К 5 мл настойки прибавляют 5 мл натрия хлорида раствора 0,1%, 10 мл этилацетата и встряхивают; отделяют органическую фазу, переносят в фарфоровую чашку и упаривают досуха на водяной бане. К остатку прибавляют 0,2 мл серной кислоты концентрированной, появляется желтое окрашивание. К смеси прибавляют 0,2 мл кислоты азотной концентрированной; окраска изменяется на фиолетовую (алкалоиды).
Сухой остаток. Не менее 2,0% (ОФС «Настойки»).
Плотность. От 0,930 до 0,950 (ОФС «Плотность»).
Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС «Настойки»).
<> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола» (<> контролируется в течение технологического процесса).
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Содержание суммы алкалоидов колхицина и колхамина в настойке должно быть не менее 0,06% и не более 0,12%, в пересчете на колхицин.
Раствор стандартного образца (СО) колхицина. Около 0,01 г (точная навеска) СО колхицина помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным и защищают от света.
Проверка пригодности хроматографической системы.
Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются следующие условия:
- эффективность хроматографической колонки должна быть не менее 3000 теоретических тарелок для пика колхицина и не менее 7000 для пика колхамина;
- коэффициент симметрии для пиков колхицина и колхамина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.
- относительное стандартное отклонение площади пика колхицина, рассчитанное по 3 последовательным хроматограммам раствора стандартного образца не более 2,0%.
Около 1,0 г настойки (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора подвижной фазой до метки и перемешивают (испытуемый раствор).
| Время, мин | A, об. % | B, об. % |
|---|---|---|
| 0 — 11 | 77 | 23 |
| 11 — 13 | 77 \rightarrow 50 | 23 \rightarrow 50 |
| 13 — 15 | 50 | 50 |
| 15 — 16 | 50 \rightarrow 77 | 50 \rightarrow 23 |
| 16 — 20 | 77 | 23 |
Хроматографируют раствор СО колхицина, получая не менее 3 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».
Хроматографируют попеременно испытуемый раствор и раствор СО колхицина, получая не менее 3 хроматограмм. Расчет содержания суммы алкалоидов проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат 2 основных пика: пик колхицина и пик колхамина с относительным временем удерживания 0,35 (по колхицину).
Содержание суммы алкалоидов колхицина и колхамина в пересчете на колхицин в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 10 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot 10 \cdot a \cdot 100} ,
где: S — сумма площадей двух пиков алкалоидов на хроматограмме испытуемого раствора;
P — содержание колхицина в СО, %;
S0 — площадь пика на хроматограмме СО колхицина;
Испытание четвертого десятичного разведения (D4)
Измеряют оптическую плотность разведения D4 при длине волны 230 нм по отношению к спирту 43% (по массе). Оптическая плотность разведения D4 должна быть не более 0,10.
Приготовление четвертого десятичного разведения D4 производят в соответствии с ОФС «Настойки гомеопатические матричные».
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные».