ФС.2.6.0014.18. Фармакопейная статья. Бриония. Настойка гомеопатическая матричная

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Бриония Bryonia Настойка гомеопатическая матричная	ФС.2.6.0014.18
	Взамен ФС 42-0158-05

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Бриония — Bryonia, настойку гомеопатическую матричную, получаемую из свежих, собранных перед цветением корней брионии двудомной — Bryonia cretica ssp. dioica (Jacq.) Tutin или брионии белой — Bryonia alba L., сем. тыквенных — Cucurbitaceae, и применяемую для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

Для получения настойки необходимо:

Брионии корней свежих (при содержании влаги не менее 70%)	- 100 г
Спирта этилового 86% (м/м) или 90% (о/о)	- достаточное количество для получения настойки

Примечание

Получение настойки гомеопатической матричной осуществляется по методу 2 ОФС «Настойки гомеопатические матричные».

Описание

Прозрачная жидкость от светло-желтого до темно-желтого цвета без характерного запаха.

Подлинность

Приготовление растворов

Ванилина раствор в фосфорной кислоте. 0,50 г ванилина растворяют в смеси, состоящей из 15,0 мл кислоты ортофосфорной концентрированной и 85,0 мл спирта 96%, осторожно перемешивают. Срок годности 2 сут.

Раствор стандартного образца (СО) фенолфталеина. 0,1 г СО фенолфталеина растворяют в 10 м спирта 96%. Раствор используют свежеприготовленным.

1. Тонкослойная хроматография.

В делительную воронку вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл настойки, прибавляют 20,0 мл хлороформа, встряхивают в течение 3 мин и оставляют до разделения фаз. Нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл. Хлороформное извлечение выпаривают с помощью роторного испарителя при нагревании на кипящей водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл этилового спирта 96% (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят полосой длиной 10 мм и шириной не более 2 мм 15 мкл испытуемого раствора и 0,5 мкл раствора СО фенолфталеина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 10 мин смесью растворителей: хлороформ — ацетон (6:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, хроматограмму вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают ванилина раствором в фосфорной кислоте, выдерживают при температуре 100 °C в течение 5 — 8 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора СО фенолфталеина в нижней трети должна обнаруживаться зона адсорбции розового цвета, обесцвечивающаяся в течение нескольких минут.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: на линии старта зона адсорбции серо-коричневого или желто-коричневого цвета, зона адсорбции желтого цвета ниже уровня зоны адсорбции СО фенолфталеина, выше несколько зон фиолетового и розово-фиолетового цвета на уровне или немного ниже зоны адсорбции СО фенолфталеина, три и более зон от фиолетового до ярко-фиолетового цвета выше уровня зоны адсорбции СО фенолфталеина и еще выше зона красновато-фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции желтого или светло-фиолетового цвета.

2. К 2 мл настойки прибавляют 0,2 мл железа (III) хлорида раствора 1%; должно наблюдаться образование коричневого окрашивания с помутнением. К полученной смеси осторожно по стенке пробирки прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной; на границе раздела фаз должно наблюдаться образование сине-зеленого окрашивания (гликозиды).

3. К 2 мл настойки, прибавляют 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10% и 0,1 мл пикриновой кислоты насыщенного раствора, нагревают в течение 3 мин на кипящей водяной бане; должно наблюдаться окрашивание красного цвета (гликозиды).

Сухой остаток. Не менее 1,7% (ОФС «Настойки»).

Плотность. От 0,940 до 0,965 (ОФС «Плотность»).

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС «Настойки»).

<> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола» (<> контролируется в течение технологического процесса).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Суммы кукурбитацинов в пересчете на кукурбитацин E (C32H44O8; М.м. 556,7) в настойке должно быть не менее 0,001% и не более 0,020%

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) кукурбитацина E. Около 2,0 мг (точная навеска) СО кукурбитацина E помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, прибавляют 4 мл метанола, перемешивают до полного растворения, доводят объем раствора метанолом до метки, перемешивают.

Срок годности растворов не более 30 сут при хранении в плотно укупоренной таре в прохладном, защищенном от света месте.

Проверка пригодности хроматографической системы.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

• относительное стандартное отклонение площади пика кукурбитацина E должно быть не более 2,0%;
• фактор асимметрии пика кукурбитацина E должен быть не более 2,0;
• эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику кукурбитацина E, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.

Около 5,0 г (точная навеска) настойки фильтруют через нейлоновый фильтр (с размером пор 0,45 мкм) в мерную колбу, вместимостью 5 мл и доводят спиртом 90% до метки (испытуемый раствор).

Условия хроматографирования

Колонка	150 x 4,6 мм, октадецилсилилсиликагель (C18) для хроматографии, 3 — 10 мкм;
Подвижная фаза	А — вода для хроматографии; Б — ацетонитрил для хроматографии;
Способ элюирования	программа градиента

Время (мин)	A, об. %	B, об. %
0 — 2	80	20
2 — 22	80 \rightarrow 40	20 \rightarrow 60
22 — 23	40 \rightarrow 80	60 \rightarrow 20
23 — 28	80	20

Скорость потока, мл/мин	1,5
Температура колонки, °C	35
Детектор	УФ-спектрофотометрический
Длина волны, нм	270
Объем вводимой пробы, мкл	10
Время хроматографирования, мин	40

Хроматографируют попеременно испытуемый раствор и раствор СО кукурбитацина E, получая не менее 3 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».

Время удерживания пиков веществ относительно кукурбитацина E (время удерживания кукурбитацина E около 15 мин) составляет:

кукурбитацин D/1,2,23,24 — тетрагидрокукурбитацин I	- около 0,59;
кукурбитацин I/L	- около 0,70;
кукурбитацин B	- около 0,89;
23,24-дигидрокукурбитацин B	- около 0,92;
23,24-дигидрокукурбитацин E	- около 1,04.

Время регистрации хроматограммы должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания пика кукурбитацина E.

Содержание суммы кукурбитацинов в настойке гомеопатической матричной в пересчете на кукурбитацин E в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a \cdot 10 \cdot 100} = \frac{S \cdot a_{0} \cdot P}{S_{0} \cdot a \cdot 2}

S — сумма площадей пиков кукурбитацинов на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика кукурбитацина E на хроматограмме раствора СО кукурбитацина E;

a — навеска настойки, г;

a0 — навеска стандарта, г;

P — содержание кукурбитацина E в стандартном образце, %.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные».

Хранить с осторожностью.

---