ФС.2.4.0006.22. Фармакопейная статья. Женьшеня настоящего корней экстракт сухой

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Женьшеня настоящего корней экстракт сухой Panacis ginseng radicibus extractum siccum	ФС.2.4.0006.22 Вводится впервые

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Женьшеня настоящего корней экстракт сухой, получаемый из собранных в конце августа — начале сентября и высушенных корней дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения женьшеня настоящего — Panax ginseng C.A. Mey, сем. аралиевых — Araliaceae, экстракцией спиртом подходящей концентрации, применяемый для производства лекарственных препаратов.

Содержит не менее 4,0% суммы гинсенозидов в пересчете на гинсенозид Rb1 и абсолютно сухую субстанцию.

Описание

Аморфный порошок от светло-желтого цвета с сероватым оттенком или без оттенка до коричневого цвета с характерным запахом.

---

<*> Гигроскопичен, комкуется.

Подлинность

Высокоэффективная жидкостная хроматография

Времена удерживания двух пиков на хроматограмме испытуемого раствора, полученного для количественного определения, должно соответствовать временам удерживания основных пиков на хроматограммах растворов стандартных образцов гинсенозида Rb1 и гинсенозида Rg2.

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов

Испытуемый раствор. 0,15 г субстанции растворяют в 10,0 мл метанола 70% и перемешивают.

Раствор стандартного образца (СО) женьшеня экстракта сухого. 0,15 г СО женьшеня экстракта сухого растворяют в 10,0 мл метанола 70% и перемешивают.

Подвижная фаза (ПФ). Бутанол, воду и этилацетат смешивают в соотношении 100:50:25, оставляют смесь для разделения фаз на 10 мин. Используют верхний слой.

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля в виде полос длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 20 мкл раствора стандартного образца (СО) женьшеня экстракта сухого. Пластинку с нанесенными пробами сушат до удаления следов растворителей, затем помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму обрабатывают анисового альдегида раствором уксуснокислым в метаноле, выдерживают при температуре 100 — 105 °C в течение 5 — 10 мин и просматривают при длине дневном свете.

На хроматограмме раствора СО женьшеня экстракта сухого должны обнаруживаться не менее восьми зон адсорбции от светло-фиолетового до фиолетового цвета (гинсенозиды).

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться не менее восьми зон адсорбции от светло-фиолетового до фиолетового цвета, соответствующие по расположению, цвету и размеру зонам адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (гинсенозиды); допускается обнаружение других зон адсорбции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,0%. В соответствии с требованиями ОФС «Потеря в массе при высушивании».

Тяжелые металлы. Не более 0,01%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Приготовление растворов

Буферный раствор. 3,5 г динатрия гидрофосфата дигидрата и 7,2 г калия дигидрофосфата растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1000 мл, доводят объем раствора те же растворителем метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. Около 0,100 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл буферного раствора, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора наносят на картридж для твердофазной экстракции (октадецилсилил силикагель, 0,50 г/45 мкм), предварительно активированный 5 мл метанола, а затем 20 мл воды. Проводят элюирование 20 мл воды, затем 15 мл метанола 30%. Элюаты проверяют на отсутствие гинсенозидов и отбрасывают или заменяют картридж на аналогичный. Затем проводят элюирование 20 мл метанола, элюат собирают и выпаривают на роторном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 2,0 мл метанола и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца (СО) женьшеня экстракта сухого. Около 0,100 г (точная навеска) СО женьшеня экстракта сухого помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл буферного раствора, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора наносят на картридж для твердофазной экстракции и далее раствор готовят аналогично приготовлению испытуемого раствора.

Раствор стандартного образца (СО) гинсенозида Rb1. Около 0,003 г (точная навеска) гинсенозида Rb1 растворяют в 5,0 мл метанола.

Раствор стандартного образца (СО) гинсенозида Rg2. Около 0,003 г (точная навеска) гинсенозида Rg2 в 5,0 мл метанола.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 1,0 мл раствора стандартного образца (СО) гинсенозида Rb1 смешивают с 1,0 мл стандартного образца (СО) гинсенозида Rg2.

Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если для хроматограммы раствора для проверки хроматографической системы выполняются следующие условия:

• разрешающая способность между пиками гинсенозида Rb1 и гинсенозида Rg2 должна быть не менее 1,5;
• эффективность хроматографической колонки для пика гинсенозида Rb1 должна быть не менее 15000 теоретических тарелок;

• относительное стандартное отклонение, рассчитанное по пику гинсенозида Rb1 не должно превышать 2,0% (6 введений).

Колонка	125 x 4,6 мм, сорбент октадецилсилильный силикагель (C18), 5 мкм
Подвижная фаза (ПФ)	ПФ A: воды, доведенная до pH 2 фосфорной кислотой ПФ B: ацетонитрил

Время, мин	A, об. %	B, об. %
0 \rightarrow 8	80	20
8 \rightarrow 40	80 \rightarrow 60	20 \rightarrow 40
40 \rightarrow 45	60 \rightarrow 40	40 \rightarrow 60
45 \rightarrow 57	40 \rightarrow 0	60 \rightarrow 100

Скорость потока, мл/мин	1,0
Температура колонки, °C	35
Детектор	спектрофотометрический
Длина волны, нм	203
Объем вводимой пробы, мкл	20

Относительное время удерживания: гинсенозид Rb1 — 1 (около 33 мин); гинсенозид Rg2 — около 0,98; также должны обнаруживаться пики с относительными временами удерживания около 0,53; 0,54; 0,88; 1,04; 1,08 и 1,17.

Хроматографируют попеременно испытуемый раствор, раствор стандартного образца (СО) женьшеня экстракта сухого, раствор стандартного образца (СО) гинсенозида Rb1 и раствор стандартного образца (СО) гинсенозида Rg2, получая не менее 3 хроматограмм для каждого из растворов.

Содержание суммы гинсенозидов в пересчете на гинсенозид Rb1 и абсолютно сухую субстанцию в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S — сумма площадей пиков гинсенозидов Rb1 и Rg2, а также неидентифицированных пиков с относительными временами удерживания 0,53; 0,54; 0,88; 1,04; 1,08; 1,17 на хроматограмме испытуемого раствора;

So — площадь пика гинсенозида Rb1 на хроматограмме раствора испытуемого раствора;

a — навеска субстанции, г;

ao — навеска СО гинсенозида Rb1, г;

W — потеря в массе при высушивании субстанции, %;

P — содержание основного вещества в СО гинсенозида Rb1, %.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

---