ФС.2.1.0623. Фармакопейная статья. Рифабутин
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 22.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Рифабутин Рифабутин Rifabutinum | ФС.2.1.0623 |
| Вводится впервые |
 | |
| C46H62N4O11 [72559-06-9] | М.м. 847,01 |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
[(9S,12E,14S,15R,16S,17R,18R,19R,20S,21S,22E,24Z)-6,18,20-Тригидрокси-7,9,15,17,19,21,25-гептаметил-1'-(2-метилпропил)-14-метокси-5,10,26-триоксо-3,5,9,10-тетрагидроспиро{9,4-[эпокси(пентадека-1,11,13-триен)имино]-2H-фуро[2',3':7,8]нафто[1,2-d]имидазол-2,4'-пиперидин}-16-ил]ацетат.
Содержит не менее 96,0% и не более 102,0% рифабутина C46H62N4O11 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Красно-фиолетовый аморфный порошок.
Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде и спирте 96%.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рифабутина.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (А) (раздел «Количественное определение»).
ИСПЫТАНИЯ
1. Примесь A. Определение проводят методом ТСХ (ОФС Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.
Подвижная фаза. Ацетон — петролейный эфир 23:77.
Растворитель. Метанол — метиленхлорид 50:50.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси A (1-(2-метилпропил)пиперидин-4-он [72544-16-2]), растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг) и раствора стандартного образца примеси A (0,3 мкг). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и помещают в камеру насыщенную парами йода на 5 мин, вынимают пластинку, опрыскивают крахмала раствором с калия йодидом, выдерживают в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси A, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца примеси A (не более 0,3%).
2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — буферный раствор 500:500.
Буферный раствор. Растворяют 13,6 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 8,5% до 6,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца рифабутина (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рифабутина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца рифабутина (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рифабутина (А) и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца рифабутина, растворяют в 2 мл метанола, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5% и выдерживают при комнатной температуре в течение 4 мин. К полученному раствору прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3% и доводят объем раствора ПФ до метки.
Примесь B: 3-аминорифамицин S [51756-80-0].
Примесь C: 21,31-дидегидрорифабутин [2241829-23-0].
Примесь D: 3-амино-4-иминдорифамицин S [62041-01-4].
Примесь E: 16-O-дезацетилрифабутин [100324-63-8].
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца рифабутина (Б) и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Рифабутин — 1 (около 9 мин); примесь E — около 0,5; примесь B — около 0,6; примесь D — около 0,9; примесь C — около 1,3.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между вторым пиком из трех продуктов разложения и пиком рифабутина должно быть не менее 2,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 1,0%) и площадь только одного такого пика может превышать 0,5 площади пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (0,5%);
- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трехкратную площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 3,0%).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 0,05%).
Вода. Не более 2,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,3% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.
Хроматографируют раствор стандартного образца рифабутина (А) и испытуемый раствор.
Содержание рифабутина C46H62N4O11 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика рифабутина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (А);
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца рифабутина, мг;
P — содержание рифабутина в фармакопейном стандартном образце рифабутина, %;
W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.