Библиотека
Скачать PDF

ФС.2.1.0585. Фармакопейная статья. Тенофовира дизопроксила фумарат. Тенофовир

Министерство здравоохранения Российской Федерации · № ФС.2.1.0585Действующий акт

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

Примечание

Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 23.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Тенофовира дизопроксила фумарат
Тенофовир
Tenofoviri disoproxili fumaras		ФС.2.1.0585
Вводится впервые
рис. 1
C19H30N5O10P·C4H4O4
[202138-50-9]		М.м. 635,51

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфоната] (2E)-бут-2-ендиоат (1:1).

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% тенофовира дизопроксила фумарата C19H30N5O10P·C4H4O4 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, легко растворим или растворим в метаноле, мало растворим или очень мало растворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 114 до 118 °C (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Буферный раствор. Растворяют 7,7 г аммония ацетата в 800 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором 5% или уксусной кислотой ледяной до 6,8, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол — буферный раствор 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 25,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают около 50,0 мг фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФ, доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 10 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[([(2S)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат] [1280130-08-6].

Хроматографические условия

Колонка 150 x 4,0 мм, силикагель модифицированный \alpha_{1} - \text{кислотным} гликопротеином для хиральной хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки 15 °C;
Температура образца 4 — 8 °C;
Скорость потока 0,8 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 260 нм;
Объем пробы 10 мкл;
Время хроматографирования 30 мин.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тенофовира дизопроксил — 1,0 (около 7 мин); примесь A — 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тенофовира дизопроксила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками тенофовира дизопроксила и примеси A должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

  • фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси A в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

  • примесь A — не более 1,0%.

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют 1,41 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 5,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). 2-Метил-2-пропанол — метанол — буферный раствор 25:275:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). 2-Метил-2-пропанол — метанол — буферный раствор 25:675:300.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 5,0 мг фумаровой кислоты, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 7,5 мг тенофовира (примесь 1) и 7,5 мг аденина (примесь 2), растворяют в ПФА и доводят объем раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и доводят объем раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь 1: ({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфоновая кислота [147127-20-6].

Примесь 2: 9H-пурин-6-амин [73-24-5].

Примесь 3: ({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат) [211364-69-1].

Примесь 4: ({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил){[(этоксикарбонил)окси]метил}[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат] [1422284-16-9].

Примесь 5: (пропан-2-ил)({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат] [1246812-40-7].

Примесь 6: бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-{[(пропан-2-илокси)карбонил]амино}-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат] [1244022-54-5].

Примесь 7: тетракис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)метиленбис[азандиил-9H-пурин-6,9-диил(2R)-1,2-пропандиилоксиметилен]бис(фосфонат), [1093279-76-5].

Хроматографические условия

Колонка 250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки 35 °C;
Температура образца 4 — 8 °C;
Скорость потока 1,0 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 260 нм;
Объем пробы 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин ПФА, % ПФБ, %
0 — 2 100 0
2 — 30 100 \rightarrow 0 0 \rightarrow 100
30 — 45 0 100
45 — 50 0 \rightarrow 100 100 \rightarrow 0
50 — 60 100 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тенофовира дизопроксил — 1 (около 21 мин); фумаровая кислота — около 0,10; примесь 1 — около 0,12; примесь 2 — около 0,14; примесь 3 — около 0,22; примесь 4 — около 0,78; примесь 5 — около 0,80; примесь 6 — около 1,38; примесь 7 — около 1,76.

Идентификация примесей. Для идентификации пика фумаровой кислоты используют хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тенофовира дизопроксила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей 1 и 2 должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата:

  • фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 — 0,47; примесь 2 — 0,23; примесь 3 — 0,68; примесь 4 — 1,39; примесь 6 — 1,37.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot 100 \cdot 10 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей;

P — содержание действующего вещества в фармакопейном стандартном образце тенофовира дизопроксила фумарата, %;

Допустимое содержание примесей:

  • примесь 3 — не более 1,0%;
  • примесь 5 — не более 0,3%;
  • примеси 1, 2, 4, 6 и 7 — не более 0,15% каждая;
  • любая другая примесь — не более 0,10% каждая;
  • сумма примесей — не более 2,0%.

Не учитывают пики с относительным временем удерживания менее 0,1 от времени удерживания пика тенофовира дизопроксила, пика фумаровой кислоты и пики, площадь которых меньше площади пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Хлорметилизопропилкарбонат. Не более 0,15%. Определение проводят методом ГХ (анализ равновесного пара, ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Во флакон для парофазного анализа помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 5,0 мл бензилового спирта, закрывают и перемешивают до получения раствора.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) хлорметилизопропилкарбоната, растворяют в бензиловом спирте и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора бензиловым спиртом до метки. Во флакон для парофазного анализа помещают 5,0 мл полученного раствора.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора бензиловым спиртом до метки.

Хроматографические условия

Колонка длина 30 м; внутренний диаметр 0,53 мм ID, покрытая 3 мкм пленкой поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана;
Газ-носитель азот;
Деление потока 1:5;
Температура инжектора 180 °C;
Температура детектора 260 °C;
Температура колонки 75 °C в течение 5 мин,
нагрев до 150 °C со скоростью 10 °C/мин,
нагрев до 230 °C со скоростью 40 °C/мин,
230 °C в течение 5 мин;
Детектор пламенно-ионизационный.

Условия для парофазного хроматографирования

Объем флакона 20 мл;
Температура инкубации 90 °C;
Время инкубации 20 мин;
Скорость перемешивания 600 об/мин;
Температура шприца 105 °C;
Время продувки 2 мин;
Время хроматографирования 19,5 мин;
Растворитель (холостой раствор) бензиловый спирт.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика хлорметилизопропилкарбоната должно составлять не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика хлорметилизопропилкарбоната должно быть не более 15% (6 введений).

Содержание хлорметилизопропилкарбоната (X) в процентах вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot 5 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot 50} ,

где S1 — площадь пика хлорметилизопропилкарбоната на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика хлорметилизопропилкарбоната на хроматограмме раствора сравнения;

a1 — навеска субстанции, г;

a0 — навеска хлорметилизопропилкарбоната, г.

Вода. Не более 1,0% (ОФС «Определение воды», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. Фумаровая кислота. Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 5,804 мг фумаровой кислоты C4H4O4.

Содержит не менее 17,5% и не более 19,0% фумаровой кислоты в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

2. Тенофовира дизопроксила фумарат. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие тенофовира дизопроксил и его примеси, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,0 мл триэтиламина в 500 мл воды и доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 6,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — буферный раствор 450:550.

Растворитель. Ацетонитрил — вода 5:95.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка 250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки 30 °C;
Температура образца 4 — 8 °C;
Скорость потока 1,0 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 260 нм;
Объем пробы 10 мкл;
Время хроматографирования 20 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата:

  • относительное стандартное отклонение, площади пика тенофовира дизопроксила должно быть не более 2,0%;
  • фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,0.

Содержание тенофовира дизопроксила фумарата C19H30N5O10P·C4H4O4 в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, мг;

P — содержание тенофовира дизопроксила фумарата в фармакопейном стандартном образце тенофовира дизопроксила фумарата, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.