ФС.2.1.0561. Фармакопейная статья. Рилпивирина гидрохлорид. Рилпивирин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Рилпивирина гидрохлорид Рилпивирин Rilpivirini hydrochloridum	ФС.2.1.0561
	Вводится впервые

C22H18N6·HCl [700361-47-3]	М.м. 402,9

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-[(4-{2,6-Диметил-4-[(1E)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрила гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% рилпивирина гидрохлорида C22H18N6·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в диметилформамиде, практически нерастворим в воде, метаноле, этаноле.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,0 г натрия октансульфоната в 1000 мл воды, прибавляют 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и перемешивают.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор — ацетонитрил 300:700. Срок годности — 24 ч.

Растворитель. Метанол — ацетонитрил 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора — 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора — 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А) и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор Z-изомера. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мг Z-изомера рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Z-изомер: 4-[(4-{2,6-диметил-4-[(1Z)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрил [500287-94-5].

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в 2 мл растворителя, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,5 мл раствора Z-изомера и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 290 нм;
Объем пробы	5 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 20	50 \rightarrow 35	50 \rightarrow 65
20 — 30	35 \rightarrow 10	65 \rightarrow 90
30 — 38	10	90
38 — 38,5	10 \rightarrow 50	90 \rightarrow 50
38,5 — 50	50	50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика рилпивирина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

• разрешение (RS) между пиками рилпивирина и Z-изомера должно быть не менее 1,5;
• фактор асимметрии пика (AS) рилпивирина должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б):

• относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 5,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 20 \cdot 1 \cdot 1}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot 10 \cdot 100} ,

где S1 — площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б);

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;

P — содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида, %.

Допустимое содержание примесей:

• Z-изомер — не более 0,5%;
• любая другая примесь — не более 0,1%;
• сумма примесей — не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3В), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора — 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А), полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Объем пробы	10 мкл;

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 18	45 \rightarrow 30	55 \rightarrow 70
18 — 20	30 \rightarrow 10	70 \rightarrow 90
20 — 25	10	90
25 — 25,1	10 \rightarrow 45	90 \rightarrow 55
25,1 — 32	45	55

Хроматографируют раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида:

• фактор асимметрии пика (AS) рилпивирина должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 2,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание рилпивирина гидрохлорида C22H18N6·HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 20 \cdot 1 \cdot 10 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 20 \cdot 1 \cdot 10 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика рилпивирина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;

P — содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---