ФС.2.1.0473. Фармакопейная статья. Аминосалициловая кислота

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Аминосалициловая кислота Аминосалициловая кислота Acidum aminosalicylicum	ФС.2.1.0473
	Вводится впервые

C7H7NO3 [65-49-6]	М.м. 153,14

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-Амино-2-гидроксибензойная кислота.

Содержит не менее 98,5% и не более 100,5% аминосалициловой кислоты C7H7NO3 в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

<*> Темнеет на свету.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в спирте 96%, мало растворим в воде и эфире.

<*> Растворяется в разбавленных растворах азотной кислоты и в натрия гидроксида растворе концентрированном.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 250 мг субстанции, растворяют в 3 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и 12,5 мл фосфатного буферного раствора pH 7,0 (1), доводят объем раствора водой до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 265 нм и 299 нм. Отношение значений оптических плотностей A265/A299 должно быть 1,53 +/- 0,03.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и 0,1 мл раствора железа(III) хлорида; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Полученный раствор выдерживают в течение 3 ч; не должно быть осадка.

4. Качественная реакция. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления диацетильного производного. От 191 до 197 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и нагревают на водяной бане для выпаривания в течение 30 мин, прибавляют 40 мл воды, фильтруют, охлаждают и выдерживают до выпадения кристаллического осадка. Осадок собирают на фильтре, тщательно промывают водой и высушивают в эксикаторе в течение 1 ч при температуре 105 °C.

pH раствора. От 3,0 до 3,7 (насыщенный раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,2 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,7 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в ацетонитриле и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг 3-аминофенола (примесь A) и 5,0 мг месалазина (примесь B), растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Примечание

Примесь A: 3-аминофенол [591-27-5].

Примесь B (месалазин): 5-амино-2-гидроксибензойная кислота [89-57-6].

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм силикагель октилсилильный, дезактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,25 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФ А, %	ПФ Б, %
0 — 15	100	0
15 — 30	100 \rightarrow 40	0 \rightarrow 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемый раствор и раствор сравнения.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота — 1 (около 17 мин); примесь A — около 0,31; примесь B — около 0,39.

Для идентификации примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площадь пика примеси A умножают на 0,62.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси A не должна превышать трехкратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
• площадь пика примеси B не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03%).

Хлориды. Не более 0,042% (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,12 г субстанции в 2 мл азотной кислоты разведенной 16%, прибавляют 23 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Раствор тетрабутиламмония гидроксида. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,54 г тетрабутиламмония гидроксида, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор тетрабутиламмония гидроксида — динатрия гидрофосфата раствор 0,05 М — натрия дигидрофосфата раствор 0,05 М 150:425:425.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг (точная навеска) парацетамола, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) субстанции и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика аминосалициловой кислоты.

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота — 1; парацетамол — около 0,83.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

• разрешение (RS) между пиками аминосалициловой кислоты и парацетамола должно быть не менее 1,7;
• относительное стандартное отклонение отношений площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола должно быть не более 1,0% (6 введений).

После использования колонку промывают в течение 30 мин смесью метанол — вода — фосфорная кислота 77:23:0,6 и затем в течение 30 мин смесью метанол — вода 50:50.

Содержание аминосалициловой кислоты C7H7NO3 в субстанции в процентах (X) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле:

X = \frac{B_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 25 \cdot 100}{B_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,

где B1 — отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме испытуемого раствора;

B0 — отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме стандартного раствора;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты, мг;

P — содержание аминосалициловой кислоты в фармакопейном стандартном образце аминосалициловой кислоты, %;

W — потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично закрытой упаковке, в защищенном от света месте.

---