ФС.2.1.0457. Фармакопейная статья. Нитизинон

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Нитизинон Нитизинон Nitisinonum	ФС.2.1.0457
	Вводится впервые

C14H10F3NO5 [104206-65-7]	М.м. 329,23

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-[2-Нитро-4-(трифторметил)бензоил]циклогексан-1,3-дион.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% нитизинона C14H10F3NO5 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. От белого до светло-желтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетонитриле, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нитизинона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученный с помощью диодно-матричного детектора в области длин волн от 200 до 380 нм, должен соответствовать спектру поглощения пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 139,5 до 141,0 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — метанол — фосфорной кислоты раствор 0,02 М 200:300:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Срок годности раствора — 24 ч при температуре 10 °C.

Раствор стандартного образца нитизинона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нитизинона, прибавляют 15 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2 — 3 мин, периодически встряхивая колбу, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. Срок годности раствора — 24 ч.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нитизинона и доводят объем раствора ПФ до метки. Срок годности раствора — 24 ч.

Раствор примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 1, растворяют в 50 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2 мин, периодически встряхивая колбу и не допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор хранят при температуре не выше 8 °C.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца нитизинона, прибавляют 50 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 3 мин, периодически встряхивая. Колбу герметично закрывают, выдерживают в термостате при температуре 60 °C в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,1 мл раствора примеси 1, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Раствор хранят при температуре не выше 8 °C.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нитизинона и доводят объем раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1: 2-нитро-4-(трифторметил)бензойная кислота [320-94-5].

Примесь 2: циклогексан-1,3-дион [504-02-9].

Примесь 3: 6-(трифторметил)-3,4-дигидро-1H-ксантен-1,9(2H)-дион.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Температура образца	10 °C;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 240 нм;
Объем пробы	30 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания пика нитизинона.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нитизинон — 1 (около 16 мин); примесь 2 — около 0,1; примесь 1 — около 0,3; примесь 3 — около 0,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика нитизинона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 1 и примеси 3 должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

• фактор асимметрии пика (AS) нитизинона должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика нитизинона должно быть не более 5,0% (6 введений);

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 — 1,8; примесь 2 — 0,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 1 \cdot 1}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot 100 \cdot 25} ,

где S1 — площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора сравнения;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска стандартного образца нитизинона, мг;

P — содержание нитизинона в стандартном образце нитизинона, %.

Допустимое содержание примесей:

• примесь 1 — не более 0,15%;
• примесь 2 — не более 0,15%;
• любая другая примесь — не более 0,10%;
• сумма примесей — не более 0,5%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,1% (ОФС «Хлориды»). В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, прибавляют 25 мл воды, перемешивают на магнитной мешалке в течение 30 мин, периодически встряхивая, и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания родственные примеси со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 70 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца нитизинона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нитизинона, растворяют в 15 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2 — 3 мин, периодически встряхивая колбу, и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	55 x 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм;
Объем пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	1,5-кратное от времени удерживания пика нитизинона.

Хроматографируют раствор стандартного образца нитизинона и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона:

• фактор асимметрии пика (AS) нитизинона должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика нитизинона должно быть не более 2,0% (6 введений).

Содержание нитизинона C14H10F3NO5 в субстанции в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 2 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot 10 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика нитизинона на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца нитизинона, мг;

P — содержание нитизинона в фармакопейном стандартном образце нитизинона, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

При температуре не выше 8 °C.

---