ФС.2.1.0443. Фармакопейная статья. Левотироксин натрия гидрат. Левотироксин натрия

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Левотироксин натрия гидрат Левотироксин натрия Levothyroxinum natricum hydricum	ФС.2.1.0443
	Вводится впервые

C15H10I4NNaO4·xH2O [25416-65-3]	М.м. 798,9 (безводный)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-Амино-3-[4-(4-гидрокси-3,5-дииодфенокси)-3,5-дииодфенил]пропаноат натрия гидрат.

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% левотироксина натрия C15H10I4NNaO4 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. Содержит переменное количество воды.

СВОЙСТВА

Описание. Почти белый или слегка коричневато-желтый кристаллический порошок.

<*> Гигроскопичен.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96%, очень мало или практически нерастворим в воде.

<*> Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика левотироксина на хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты разведенной 9,8%, нагревают на водяной бане и, с осторожностью, продолжают нагревать на открытом пламени, повышая температуру до 600 +/- 50 °C. Нагревание продолжают до исчезновения частиц черного цвета. Полученный после сжигания остаток растворяют в 2,0 мл воды; полученный раствор должен давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +16 до +20 в пересчете на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 23 мл слегка кипящей смеси хлористоводородной кислоты раствор 1 М — спирт 96% 1:4, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», должен выдерживать сравнение с эталоном BY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 900 мл воды, прибавляют 1,97 г фосфорной кислоты концентрированной и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,97 г фосфорной кислоты концентрированной и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. ПФА — спирт 96% 25:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия и 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина, содержащего примеси F и G, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: (2S)-2-амино-3-[4-(4-гидрокси-3-иодфенокси)-3,5-дииодфенил]пропановая кислота [6893-02-3].

Примесь F: (2S)-2-амино-3-{4-[4-(4-гидрокси-3,5-дииодфенокси)-3,5-дииодфенокси]-3,5-дииодфенил}пропановая кислота [911661-90-0].

Примесь G: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 225 нм;
Объем пробы	25 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 10	70	30
10 — 40	70 \rightarrow 20	30 \rightarrow 80
40 — 50	20	80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левотироксин — 1 (около 11 мин); примесь A — около 0,5; примесь F — около 2,0; примесь G — около 2,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора А. Для идентификации пиков примесей F и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левотироксина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора А:

• разрешение (RS) между пиками примеси A и левотироксина должно быть не менее 5,0;
• фактор асимметрии пика (AS) левотироксина и примеси A должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси A не должна превышать площадь пика примеси A на хроматограмме стандартного раствора А (не более 1,0%);
• площадь пика примеси F не должна превышать пятикратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,5%);
• площадь пика примеси G не должна превышать трехкратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,3%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2%);
• сумма примесей — не более 2,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (менее 0,05%).

Вода. От 6,0% до 12,0% (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца левотироксина натрия. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца левотироксина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия фактор асимметрии пика (AS) левотироксина должен быть не более 1,5.

Содержание левотироксина натрия C15H10I4NNaO4 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 10 \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100 \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 25 \cdot 10 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика левотироксина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика левотироксина на хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия, мг;

P — содержание левотироксина натрия в фармакопейном стандартном образце левотироксина натрия, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °C.

---