МУК 4.1.3138-13. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации (R)-3-гидрокси-альфа-[(метиламино)метил]бензометанола гидрохлорида (фенилэфрина гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методические указания

(утв. Роспотребнадзором 20.11.2013)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ (R)-3-ГИДРОКСИ-АЛЬФА-[(МЕТИЛАМИНО)МЕТИЛ]БЕНЗОМЕТАНОЛА ГИДРОХЛОРИДА (ФЕНИЛЭФРИНА ГИДРОХЛОРИД) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (ВЭЖХ)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1. Подготовлены ФГБУ «Научно-исследовательский институт медицины труда» РАМН (Л.Г. Макеева, Н.С. Горячев, Е.М. Малинина, Е.Н. Грицун).

2. Разработаны: ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России (Н.Г. Иванов); ОАО «ВИЦ БАВ» (М.И. Голубева, Л.И. Крымова); ОАО «Фармстандарт Томскхимфарм» (С.А. Еникеева, Ю.Н. Шубенкина).

3. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Протокол от 29 октября 2013 г. № 3).

4. Утверждены вр.и.о. руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 20 ноября 2013 г.

Введение

Сборник методических указаний «Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны» (выпуск 54) разработан с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) и является обязательным при осуществлении санитарного контроля.

Включенные в данный сборник методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.016-79 «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» с изм. 1, ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» с изм. 1, ГОСТ Р 8.563-09 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений», ГОСТ Р ИСО 5725-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и ниже их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.2308-07 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и дополнениях к ним.

Методические указания по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для лабораторий «ФБУЗ ФЦГиЭ», санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов и других заинтересованных министерств и ведомств.

Свидетельство о государственной метрологической аттестации № 01.00225/205-7-12.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для измерения массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 0,25 — 3,0 мг/м3.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИЮПАК: фенилэфрина гидрохлорид.

Эмпирическая формула: C_{9}H_{13}NO_{2} \cdot HCl .

Молекулярная масса: 203,67.

Регистрационный номер CAS: 61-76-7.

Фенилэфрина гидрохлорид — белый или почти белый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса, с температурой плавления 140 — 145 °C. Легко растворим в воде, спирте этиловом 96%-м, 0,1%-м водном растворе о-фосфорной кислоты.

Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль.

Фенилэфрина гидрохлорид относится к адреномиметическим препаратам, оказывает симпатомиметическое, вазоконстрикторное, мидриатическое и кардиотоническое действие. Умеренно опасен при введении в желудок, малотоксичен при введении в брюшную полость, оказывает местное раздражающее действие на слизистые оболочки и кожу, обладает способностью проникать через кожные покровы. При ингаляции оказывает влияние на ЦНС, ССС, функцию печени и почек.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) фенилэфрина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны 0,5 мг/м3.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентных условий и проведении анализа в точном соответствии с прописью методика обеспечивает выполнение измерений массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида с метрологическими характеристиками, не превышающими значения, представленные в табл. 1 (при доверительной вероятности P = 0,95).

Метрологические параметры

2. Метод измерений

Измерение массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым спектрофотометрическим (УФ) детектированием. Метод основан на разделении фенилэфрина гидрохлорида и других компонентов анализируемой смеси на хроматографической колонке, заполненной сорбентом, с последующей регистрацией фенилэфрина гидрохлорида с помощью ультрафиолетового детектора. Сигнал детектора прямо пропорционален концентрации фенилэфрина гидрохлорида.

Измерение проводят при длине волны 216 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Нижний предел измерения содержания фенилэфрина гидрохлорида в анализируемом объеме раствора пробы — 0,05 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида в воздухе 0,25 мг/м3 (при отборе 200 дм3 воздуха).

Метод специфичен в условиях приготовления препаративных форм на основе фенилэфрина гидрохлорида. Измерению не мешают сопутствующие вещества, входящие в состав таблеток \text{Максиколд}^{®} — активные компоненты: парацетамол, аскорбиновая кислота и вспомогательные вещества: кроскармеллоза натрия, кальция гидрофосфат, этилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, магния стеарат, тальк.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1 Средства измерений

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2 Реактивы

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

3.3 Вспомогательные устройства и материалы

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, 12.1.005-88 (с изм. 1).

4.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004-90.

4.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2009 и инструкцией по эксплуатации прибора.

4.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленные ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускается специалист, имеющий высшее образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедший обучение и владеющий техникой анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), освоивший метод анализа в процессе тренировки и уложившийся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

6. Условия измерений

6.1 Процессы приготовления растворов и подготовку проб к анализу проводят в следующих условиях:

- <a id="p100114"></a>температура воздуха                        (20 +/- 5) °C;

- <a id="p100115"></a>атмосферное давление                       (84 - 106) кПа;<br>
- <a id="p100116"></a>относительная влажность воздуха, не более  80%.

6.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

7.1 Подготовка посуды

7.2 Приготовление растворов

7.2.3 Приготовление о-фосфорной кислоты раствора 0,1%

7.2.4 Приготовление элюента А

7.2.5 Приготовление элюента Б

7.3 Подготовка хроматографа

7.4 Установление градуировочной характеристики

Градуировочные растворы используют свежеприготовленные. Растворы устойчивы в течение 1 ч.

Инжектируют в хроматограф по 0,01 см3 каждого из градуировочных растворов.

По полученным данным строят градуировочную характеристику зависимости площади пика (приборные единицы) от содержания фенилэфрина гидрохлорида в хроматографируемом объеме (мкг).

7.5 Условия хроматографирования градуировочных

    Длина волны детектора     216 нм.
    Объем вводимой пробы      0,01 см3.
    Температура колонки       40 °C.

Подвижная фаза — линейный градиент в соответствии со следующей программой (табл. 3):

Градиентный режим

За время удерживания фенилэфрина гидрохлорида принимается время удерживания пика стандарта фенилэфрина гидрохлорида, полученного при анализе стандартного раствора, с погрешностью +/- 5%.

Допускается изменять профиль градиента для достижения соответствия критериям пригодности хроматографической системы.

7.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.

Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества по п. 7.4 (в начале, середине и конце измерений) и анализируют в точном соответствии с прописью методики.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

\frac{S_{\text{изм}} - S_{\text{гр}}}{S_{\text{гр}}} \_\_\_\_ \cdot 100 \leq K_{\text{гр}} , (1)

где S_{\text{изм}} , S_{\text{гр}} — значение площади пика (приборные единицы) фенилэфрина гидрохлорида в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

K_{\text{гр}} — норматив контроля, K_{\text{гр}} = 0,5 \cdot \delta ,

где \pm \delta — границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировочной характеристики, предусмотренной методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики прибор градуируют заново.

7.7 Отбор проб воздуха

Отбор проб проводят с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 с изменением № 1 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», раздел 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Одновременно отбирают две параллельные пробы.

Воздух с объемным расходом 20 дм3/мин аспирируют в течение 10 мин через фильтр, помещенный в фильтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для определения 1/2 ОБУВ фенилэфрина гидрохлорида отбирают не менее 200 дм3 воздуха. Отобранные пробы можно хранить в бюксах в течение трех дней.

8. Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс, приливают 5,0 см3 0,1%-го раствора о-фосфорной кислоты, помешивая при этом стеклянной палочкой в течение 10 мин для лучшего растворения вещества, затем фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно обрабатывают 5,0 см3 0,1%-го раствора о-фосфорной кислоты, снова тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм в мерную пробирку вместимостью 10,0 см3, объем раствора доводят до метки 0,1%-м раствором о-фосфорной кислоты.

Хроматографический анализ выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Регистрируют не менее двух хроматограмм для каждой пробы, соблюдая все условия, требуемые для градуировки хроматографической системы.

Количественное определение содержания фенилэфрина гидрохлорида (в мкг) в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в 0,1%-м растворе о-фосфорной кислоте вспомогательных веществ, входящих в состав препаративных форм фенилэфрина гидрохлорида.

9. Вычисление результатов измерений

где а — содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

B — общий объем раствора пробы, см3;

б — хроматографируемый объем раствора пробы, см3;

V_{20} — объем воздуха, отобранный для анализа (дм3) и приведенный к стандартным условиям (Прилож. 1).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

где C_{1} , C_{2} — результаты параллельных определений массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида в воздухе, мг/м3;

r — значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями МВИ.

10. Оформление результатов анализа

где - среднее арифметическое значение результатов n определений, признанных приемлемыми, мг/м3;

\pm \delta — границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1).

Если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: «массовая концентрация фенилэфрина гидрохлорида менее 0,25 мг/м3 (более 3,0 мг/м3)».

11. Контроль результатов измерений

11.1 Проверка приемлемости результатов измерений,

полученных в условиях воспроизводимости

б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CD_{0,95} по формуле:

где C_{\text{ср}1} , C_{\text{ср}2} — средние значения массовой концентрации фенилэфрина гидрохлорида, полученные в первой и второй лабораториях, мг/м3;

CD_{0,95} — значение критической разности, % (табл. 1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.4).

11.2 Контроль качества результатов измерений

при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям при температуре 293 К (20 °C) и атмосферном давлении 101,33 кПа (760 мм рт. ст.):

Приложение 3

УКАЗАТЕЛЬ ОСНОВНЫХ СИНОНИМОВ НАЗВАНИЙ ВЕЩЕСТВ

Пиритион цинк.

Фенилэфрина гидрохлорид.

Метформина гидрохлорид.