МУК 4.1.3833-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений концентрации свинца, кадмия, хрома, ртути, мышьяка, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Методические указания
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "МУК 4.1.3833-22. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений концентрации свинца, кадмия, хрома, ртути, мышьяка, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Методические указания". МУК 4.1.3833-22. https://bukva.ai/docs/metodika-muk-4-1-3833-22
(утв. Роспотребнадзором 27.12.2022)
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 27 декабря 2022 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЙ КОНЦЕНТРАЦИИ СВИНЦА, КАДМИЯ, ХРОМА, РТУТИ, МЫШЬЯКА, СОДЕРЖАЩИХСЯ В РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ СЕРИНА, В ПЕРЧАТОЧНОМ СОКЕ МЕТОДОМ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ С ИНДУКТИВНО СВЯЗАННОЙ ПЛАЗМОЙ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3833-22
1. Разработаны ФБУН «Екатеринбургский медицинский научный центр профилактики и охраны здоровья рабочих промпредприятий» Роспотребнадзора (Т.Н. Штин, В.Б. Гурвич, Т.С. Бурмистрова, О.В. Симонова, Е.Э. Стихина, М.С. Петрова, Д.С. Денисов, Е.О. Терентьев, А.Ю. Трошин, С.Д. Богодухов, Т.В. Бушуева, Ю.В. Грибова, А.И. Никоненко, А.С. Якубовский).
2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 27 декабря 2022 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают алгоритм измерения концентрации свинца, кадмия, хрома, ртути и мышьяка в перчаточном соке <1> методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (далее — ИСП-МС). Рабочий диапазон определения указанных элементов зависит от матрицы пробы и возникающих мешающих влияний. В перчаточном соке предел количественного определения элементов находится в интервале от 0,01 до 100 мкг/г. Диапазоны измерений определяемых элементов указаны в табл. 1.
<1> Перчаточный сок — секрет потовых и сальных желез кожи кисти, скапливающийся в процессе выполнения операций в медицинских перчатках.
Диапазоны измерений концентрации определяемых элементов
1.2. МУК устанавливают методику диагностики энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, методом тонкослойной хроматографии (далее — ТСХ).
1.3. МУК предназначены для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы медицинскими, научно-исследовательскими и иными организациями, осуществляющими деятельность в области профпатологии и экологии человека.
1.4 МУК носят рекомендательный характер.
1.5. Благодаря успехам молекулярной биологии и широкому внедрению разнообразных современных методов исследований (например, спектральных, хроматографических), значительно возрос уровень биохимических исследований. Основное внимание уделено физико-химическим свойствам и методам анализа веществ биологического происхождения. Эффективная разработка и совершенствование методик не возможны без понимания биохимических процессов в организмах.
Аминокислоты, как составные части пептидов, пептидных гормонов и белков, являются важнейшими биорегуляторами, участвующими во всех жизненных процессах. По участию в синтезе белка in vivo аминокислоты делятся на протеиногенные и непротеиногенные. Протеиногенные аминокислоты входят в состав белков, последовательность которых кодируется генетическим кодом. Общее число протеиногенных аминокислот составляет 20 (табл. 1.1 приложения 1 к настоящим МУК). Некоторые из этих аминокислот подвергаются посттрансляционной модификации. В табл. 1.2 приложения 1 к настоящим МУК приведена схема образования биогенных аминов из серина. Биогенные амины образуются в результате реакции декарбоксилирования с последующей трансформацией (рис. 1):
Рис. 1. Реакция образования биогенных аминов
Особенностью белковых аминокислот является их оптическая активность. Все \alpha - \text{аминокислоты} , кроме глицина, имеют асимметрический (хиральный) \alpha - \text{углеродный} атом и существуют в виде трех форм: L-, D- и внутренне компенсированной оптически неактивной — мезо-форме (рис. 2).
Все протеиногенные аминокислоты относятся к L-ряду. Однако за последнее время появилось много данных о наличии D-аминокислот как в свободном состоянии, так и в составе пептидов.
Наличие цепей, составленных из аминокислотных остатков, связанных между собой \alpha - \text{амидными} связями, является основной структурной особенностью полипептидов (рис. 3):
Рис. 3. \alpha - \text{амидные} связи аминокислотных остатков в полипептидах
Все полипептиды по химическому строению делятся на следующие группы (рис. 4):
Рис. 4. Классификация полипептидов
Полипептиды, содержащие до 50 аминокислотных остатков и имеющие молекулярную массу не более 5000 Да, относятся к малым линейным пептидам.
Полипептиды на основе \alpha - \text{аминокислот} , связанных между собой пептидными связями, с молекулярной массой более 5000 Да называются белками.
В клетках головного мозга идет активный метаболизм серина. В головном мозге концентрация серина в несколько раз выше, чем в плазме крови. Углеродный скелет протеиногенной аминокислоты (серина) превращается в процессе метаболизма в пировиноградную кислоту (пируват).
Совместное присутствие L- и D-аминокислот, встречающихся в природных белках, относятся к нормальному ряду. L-аминокислоты, в основном, оказывают положительное действие на организм. D-аминокислоты, в отсутствие L-аминокислот, могут влиять негативно.
Химические свойства аминокислот определяются, в первую очередь, наличием в геминальном положении амино- и карбоксильной групп. Все \alpha - \text{аминокислоты} образуют прочные хелатные комплексы с ионами двухвалентных металлов (рис. 5).
Рис. 5. Образование хелатного комплекса \alpha - \text{аминокислоты} с ионами двухвалентных металлов
Белки, в состав которых входят металлы, связанные с белком координационными связями, называют металлопротеидами. К этой группе относятся гемосодержащие белки — гемоглобин и миоглобин, а также олигомеры, стабилизированные ионами переходных металлов, например, гексамер инсулина, стабилизированный двумя ионами Zn2+. Каждый ион Zn2+ образует октаэдрический комплекс с участием 3 остатков гистидина в положении 10 цепи B и 3 молекул воды (рис. 1.1 приложения 1 к настоящим МУК). Такой тип внутримолекулярных взаимодействий относится к факторам, стабилизирующим третичную структуру белка.
В качестве эффективного комплексообразующего реагента используется серин (3-гидрокси-2-аминопропановая кислота), так как он способен образовывать координационные соединения со многими катионами металлов и рассматривается в качестве маркера для диагностики заболеваний на ранних стадиях (табл. 1.3 приложения 1 к настоящим МУК).
Серин участвует в построении почти всех природных белков. Он относится к группе заменимых аминокислот, а в организме человека может синтезироваться из промежуточного продукта гликолиза — 3-фосфоглицерата. Серин участвует в образовании активных центров ряда ферментов (эстераз, пептидгидролаз), обеспечивая их функцию. Протеолитические ферменты, активные центры которых содержат серин, относят к отдельному классу сериновых пептидаз.
Серин содержится в поте, в более высоких концентрациях по сравнению с другими биологическими жидкостями. Концентрация серина не зависит от характера принимаемой пищи, а также от того, в какой части тела образован пот.
Серином образуются комплексные соединения с металлами, у которых малый заряд, большие размеры, высокая поляризуемость и небольшое число легко возбуждаемых катионов на внешней оболочке. Такие катионы металлов имеют повышенное сродство к атомам азота, проявляющееся в склонности к образованию донорно-акцепторных связей с аминогруппой молекулы серина, и образуют устойчивые комплексы с 3-гидрокси-2-аминопропановой кислотой, часто хелатной структуры.
Устойчивость комплексов двухзарядных ионов металлов с однотипными лигандами, содержащими донорные атомы, изменяется в ряду:
[MeSer]+: Mg2+ < Ca2+ < Mn2+ < Cd2+ < Fe2+ < Co2+ < < Zn2+ < Pb2+ < Ni2+ < Cu2+
lg\beta 1 : 3,37 3,59 3,91 4,15 4,30 4,41 4,66 5,05 5,39 7,93
С точки зрения токсического действия на организм человека наибольший интерес представляют следующие элементы: свинец, кадмий, ртуть (по некоторым данным — хром) и мышьяк (табл. 1.4 приложения 1 к настоящим МУК).
При попадании в живые организмы этих элементов образуются стабильные биотоксичные соединения с белками, нейтрализация и выведение которых из организма затруднены. Один из основных механизмов их токсичности — конкуренция с необходимыми для организма металлами за участки связывания в белках. Токсичность кадмия проявляется значительнее на фоне недостатка цинка, а свинца — при дефиците кальция. Взаимодействие белковых макромолекул с ионами токсичных элементов приводит к потере функции белка и развитию токсических эффектов.
Исследования по изучению зависимости между содержанием свинца, кадмия, хрома, ртути, мышьяка в поте и токсичном воздействии на организм человека реализуют принцип скрининговой методики и устанавливают факторы риска, способствующие возникновению заболеваний. Это позволит уменьшить риск избыточного поступления токсичных веществ в организм.
1.6. ИСП-МС основывается на введении исследуемого раствора с помощью перистальтического насоса в распылитель; превращении его в аэрозоль под воздействием потока аргона; перемещении аэрозоля в плазму через центральный канал плазменной горелки, где под воздействием высокой температуры плюс 7000 — 8000 °К вещества, содержащиеся в пробе, диссоциируют на атомы и ионизируются; образовании положительно заряженных ионов, которые проходят через систему ионной оптики в анализатор; фильтрации ионов по отношению массы к заряду (m/z); детектировании интенсивности ионного потока; регистрации сигнала с последующим определением массовой концентрации элементов по установленной градуировочной характеристике (рис. 1.2 приложения 1 к настоящим МУК). Определению элементов мешают неспектральные помехи и спектральные помехи от матричных компонентов пробы, которые устраняются в процессе анализа с применением октопольной реакционной системы 4-го поколения (далее — ORS4) (глава VIII).
1.7. ТСХ основан на распределении веществ между двумя фазами: неподвижной — твердой фазе и подвижной фазой — потоком жидкости, несущим анализируемую смесь веществ.
L- и D-изомеры серина определяются после кислотного гидролиза анализируемого образца методом ТСХ в водной подвижной фазе, модифицированной макроциклическим антибиотиком — ванкомицином. Структурная формула ванкомицина приведена на рис. 6.
Рис. 6. Структурная формула ванкомицина
Структурой антибиотика обеспечиваются многочисленные взаимодействия с хиральным аналитом посредством водородных связей, \pi - \pi - \text{взаимодействий} , множества дипольных, электростатических и гидрофобных взаимодействий (гидрофобных комплексов включения или просто ассоциатов с гидрофобным «карманом»), а также стерические затруднения, что приводит к высокой энантиоселективности.
Ванкомицин относится к группе хиральных селектров и разделяет оптические изомеры серина без предварительной дериватизации.
В качестве неподвижной фазы используются стандартные пластины для ТСХ Сорбфил с сорбционным слоем из фракционного силикагеля, закрепленного на инертной подложке из алюминиевой фольги за счет силиказоля.
Для визуализации разделенных L- и D-изомеров серина на хроматограмме применяется нингидрин.
Реакция \alpha - \text{аминокислот} с нингидрином — это основная групповая реакция на аминокислоты (рис. 7).
Рис. 7. Реакция \alpha - \text{аминокислот} с нингидрином
Образование красителя происходит в результате изомеризации основания Шиффа (1-я стадия); гидролиза продукта изомеризации с образованием кетокислоты и 2-аминоиндандиона-1,3 (2-я стадия) и его конденсации с нингидрином с образованием красителя — фиолетового Руэмана (3-я стадия). Развитие окраски осуществляют при нагревании, при этом образующиеся \alpha - \text{кетокислоты} легко отщепляют углекислый газ и образуют альдегиды.
В присутствии ионов металлов, способных к комплексообразованию с \alpha - \text{аминокислотами} , чувствительность реакции сильно уменьшается.
Чувствительность метода 0,1 мг/см3.
Мешающее влияние при диагностике энантиомерной чистоты серина могут оказать другие \alpha - \text{аминокислоты} (с массовой концентрацией более 0,1 мг/см3), которые маловероятны для перчаточного сока.
Реакция с нингидрином имеет большое значение для диагностики оптических изомеров аминокислот при анализе белковых гидролизатов.
Процесс проведения ТСХ-анализа приведен на рис. 1.3 приложения 1 к настоящим МУК.
II. Показатели точности измерений
2.1. Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих.
Метод ИСП-МС обеспечивает получение результатов измерений с погрешностями, не превышающими значений, приведенных в табл. 2.
Диапазоны измерений концентрации элементов в перчаточном соке, значения показателей повторяемости, внутрилабораторной прецизионности, правильности и точности измерений при доверительной вероятности P = 0,95
III. Средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы
3.1. При выполнении измерений массовых концентраций свинца, кадмия, хрома, ртути и мышьяка, содержащихся в различных формах серина в перчаточном соке методом ИСП-МС, применяются средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы (табл. 3).
Средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы
| Наименование средств измерений, стандартных образцов, реактивов, испытательного оборудования, вспомогательных устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают средства измерений, стандартные образцы, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы | Метрологические, технические характеристики | |
| 1 | 2 | 3 | |
| Средства измерений | |||
| Весы электронные лабораторные специального класса точности, зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | Наибольший предел взвешивания (НПВ1/2), г: 42/120. Наименьший предел взвешивания (НмПВ), г: 0,001. Дискретность отсчета (d1/2), мг: 0,01/0,1 | |
| Универсальный портативный прибор для измерения силы тока, напряжения и сопротивления любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Термометр технический стеклянный, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон измерения температуры воздуха: от минус 30 °C до плюс 30 °C. Класс точности первый | |
| Дозатор жидкости ручной в комплекте с одноразовыми наконечниками, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | ГОСТ 28311 | Диапазон дозирования: от 100 до 1000 мм3 | |
| Номинальный объем дозы, мм3 | Предел допускаемого относительного среднеквадратического отклонения фактического объема дозы при доверительной вероятности P = 0,95 для дозатора с воздушным промежутком, % | ||
| 100 | 2 | ||
| 1000 | 1 | ||
| Универсальный портативный прибор для измерения атмосферного давления, температуры, относительной влажности воздуха любого типа, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Квадрупольный ИСП-МС, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон массовых чисел: от 2 до 260 атомных единиц массы (далее — а.е.м.) с разрешением, обеспечивающим ширину пика не более 1,0 а.е.м. на высоте, составляющей 10% от высоты пика. Вакуумная система: трехстадийная дифференциальная с одним встроенным турбомолекулярным насосом и одним внешним роторным. Система ввода образца: концентрический распылитель с малым потоком образца (~ 0,2 см3/мин). Кварцевая двухпроходная распылительная камера малого объема с Пельтье охлаждением (от минус 5 °C до 20 °C). Трехканальный перистальтический насос с низкой пульсацией. Система аэрозольного разбавления. РЧ-генератор: 27 МГц быстродействующий РЧ-генератор с настройкой частоты. Мощность 500 — 1600 Вт. Реакционная система: октопольная 4-го поколения с режимом работы с He (стандартно). Детекторная система: ортогональная. Предел детектирования (режим без газа): 9Be > 0,0005; 115In > 0,0001; 209Bi > 0,0001 мкг/дм3. Кратковременная стабильность выходного сигнала, СКО: не более 2,0%. Долговременная стабильность выходного сигнала, СКО: не более 3,0% | |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-1 | ГОСТ 29169 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 1 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,015\text{см}^{3} | |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-2 | ГОСТ 29169 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 2 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,02\text{см}^{3} | |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-5 | ГОСТ 29169 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 5 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,03\text{см}^{3} | |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-10 | ГОСТ 29169 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,04\text{см}^{3} | |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-1 | ГОСТ 29227 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 1 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,01\text{см}^{3} | |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-5 | ГОСТ 29227 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 5 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,05\text{см}^{3} | |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-10 | ГОСТ 29227 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимостью 10 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,10\text{см}^{3} | |
| Колба мерная 2-10-2 | ГОСТ 1770 | Вместимость 10 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,05\text{см}^{3} | |
| Колба мерная 2-50-2 | ГОСТ 1770 | Вместимость 50 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,12\text{см}^{3} | |
| Колба мерная 2-100-2 | ГОСТ 1770 | Вместимость 100 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,20\text{см}^{3} | |
| Колба мерная 2-200-2 | ГОСТ 1770 | Вместимость 200 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,30\text{см}^{3} | |
| Цилиндр 1-250-2 | ГОСТ 1770 | Цилиндр исполнения 1, вместимостью 250 см3, 2-го класса точности. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 2,0\text{см}^{3} | |
| Цилиндр 1-25-2 | ГОСТ 1770 | Цилиндр исполнения 1, вместимостью 25 см3, 2-го класса точности. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,5\text{см}^{3} | |
| Стандартные образцы | |||
| Стандартные образцы (СО) состава растворов ионов элементов (для Cd, Co, Cr, Pb, Hg) | ГОСТ 8.315 | Аттестованное значение: 1,00 г/дм3. Границы относительной погрешности аттестованного значения СО при P = 0,95: не более +/- 1,0% | |
| Стандартный образец (СО) состава раствора ионов элемента (для As, Be) | ГОСТ 8.315 | Аттестованное значение: 0,10 г/дм3. Границы относительной погрешности аттестованного значения СО при P = 0,95: не более +/- 1,0% | |
| Стандартный образец (СО) температур и теплот фазовых переходов (In) | ГОСТ 8.315 | Стандартный образец в виде кусков произвольной формы чистых металлов: СО 2313-82 — индий марки ИН-00 по ГОСТ 10297-94. Фасовка — 1 г | |
| Стандартные образцы (СО) состава растворов ионов элементов (для Re, Rh) | ГОСТ 8.315 | Аттестованное значение: 1 г/кг. Границы абсолютной погрешности аттестованного значения СО при P = 0,95: не более +/- 0,05 г/кг | |
| Реактивы | |||
| Кислота соляная | ГОСТ 3118 | Чистота не ниже II группы, 2 подгруппы по ГОСТ 13867 | |
| Кислота азотная | ГОСТ 4461 | Чистота не ниже II группы, 2 подгруппы по ГОСТ 13867 | |
| Спирт этиловый | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Медицинский | |
| Вода для лабораторного анализа | ГОСТ Р 52501 | 1-й степени чистоты | |
| Оптимизационный раствор для ИСИ-МС | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя ИСП-МС | Массовая концентрация Ce, Co, Li, Mg, Tl, Y — 1 мкг/дм3 | |
| Испытательное оборудование | |||
| Сушильный шкаф лабораторный | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Рабочий диапазон температур от 50 °C до 200 °C | |
| Вспомогательные устройства, материалы | |||
| Система микроволновой подготовки проб с различными роторами и набором аксессуаров | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Подготовка проб в различных режимах: кислотное разложение/кислотный гидролиз; щелочной гидролиз; экстракция; синтез; сжигание в кислороде; выпаривание; сушка | |
| Система очистки кислот в комплекте со вспомогательными материалами | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Ультразвуковая ванна | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Перчатки медицинские диагностические одноразовые | ГОСТ Р 52239 | Гладкие, «неопудренные» | |
| Чашка ЧБН-2 | ГОСТ 25336 | Чашка биологическая (Петри) с крышкой низкая исполнения 2 | |
| Пробирка с коническим дном, с делениями и винтовой крышкой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Вместимость 15 см3. Материал изготовления: контейнер — полипропилен; крышка — полипропилен | |
| Пробирка с коническим дном, с делениями и винтовой крышкой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Вместимость 10 см3. Материал изготовления: контейнер — полипропилен; крышка — полипропилен | |
| Стакан В-1-1000 ТС | ГОСТ 25336 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 1000 см3, из термически стойкого стекла группы ТС | |
| Стакан В-1-200 ТС | ГОСТ 25336 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 200 см3, из термически стойкого стекла группы ТС | |
| Стакан В-1-50 ТС | ГОСТ 25336 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 50 см3, из термически стойкого стекла группы ТС | |
| Аргон | ГОСТ 10157 | Высший сорт | |
| Гелий | ТУ 0271-135-31323949 | Марки А | |
| Шкаф лабораторный вытяжной | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Плитка электрическая | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Холодильник бытовой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Эксикатор 2-190 ХС | ГОСТ 25336 | Эксикатор исполнения 2, диаметром корпуса 190 мм | |
| Вставка для эксикатора 2-175 | ГОСТ 9147 | Вставка для эксикатора исполнения 2, диаметром 175 мм | |
| Силикагель | ГОСТ 3956 | Гранулированный мелкопористый, марки КСМГ, высшего сорта | |
| Универсальная аэрозольная смазка | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Индикаторная бумага | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | pH = (0 — 12) | |
| Пинцет | ГОСТ 21241 | - | |
| Бумага фильтровальная лабораторная ФБ-II | ГОСТ 12026 | Фильтры обеззоленные «синяя лента» | |
| Стаканчик для взвешивания СВ-19/9 | ГОСТ 25336 | Стакан типа СВ — высокий, с взаимозаменяемым конусом 19/9 | |
| Ванна ВП-2,00 | ГОСТ 25336 | Ванна типа ВП номинальной вместимостью 2 дм3 | |
| Щипцы тигельные | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Настенная сплит-система | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Мыло жидкое | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Нейлоновые перчатки | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Безворсовые салфетки | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Карандаш графитовый | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Секундомер | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Примечание: - допускается использование других средств измерений (СИ) утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается использование стандартных образцов утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается использование другого испытательного оборудования (ИО) с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается применение вспомогательного оборудования, отличного от указанного, с аналогичными или лучшими техническими характеристиками; - допускается применение других реактивов с характеристиками не хуже указанных; - метрологическое обеспечение СИ и ИО (поверку СИ и аттестацию ИО) осуществляют организации, аккредитованные на данный вид деятельности. | |||
3.2. При диагностике энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, методом ТСХ применяются средства измерений, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы (табл. 4).
Средства измерений, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы
| Наименование средств измерений, реактивов, испытательного оборудования, вспомогательных устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают средства измерений, реактивы, испытательное оборудование, вспомогательные устройства и материалы | Метрологические, технические характеристики | |
| 1 | 2 | 3 | |
| Средства измерений | |||
| Весы электронные лабораторные специального класса точности, зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений | Выпускаются в соответствии с технической документацией производителя | Наибольший предел взвешивания (НПВ1/2), г: 210. Наименьший предел взвешивания (НмПВ), г: 0,02. Дискретность отсчета (d1/2), мг: 0,01/0,1 | |
| Весы электронные лабораторные высокого класса точности, зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Наибольший предел взвешивания (НПВ1/2), г: 210. Наименьший предел взвешивания (НмПВ), г: 0,02. Дискретность отсчета (d1/2), мг: 1 | |
| Дозатор жидкости ручной в комплекте с одноразовыми наконечниками, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | ГОСТ 28311 | Диапазон дозирования: от 100 до 1000 мм3 | |
| Номинальный объем дозы, мм3 | Предел допускаемого относительного среднеквадратического отклонения фактического объема дозы при P = 0,95 для дозатора, с воздушным промежутком, % | ||
| 100 | 2 | ||
| 1000 | 1 | ||
| Термометр технический стеклянный, зарегистрированный в Государственном реестре средств измерений | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Диапазон измерения температуры воздуха: от минус 30 °C до плюс 30 °C. Класс точности первый | |
| Пипетка с одной отметкой 2-2-5 | ГОСТ 29169 | Пипетка исполнения 2, 2-го класса точности, вместимостью 5 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,03\text{см}^{3} | |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-1 | ГОСТ 29227 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 1 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,01\text{см}^{3} | |
| Пипетка, градуированная 1-1-2-5 | ГОСТ 29227 | Пипетка типа 1, исполнения 1, 2-го класса точности, вместимость 5 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,05\text{см}^{3} | |
| Колба мерная 2-100-2 | ГОСТ 1770 | Вместимость 100 см3. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,20\text{см}^{3} | |
| Цилиндр 1-25-2 | ГОСТ 1770 | Цилиндр исполнения 1, вместимостью 25 см3, 2-го класса точности. Предел допускаемой погрешности: \Delta = \pm 0,5\text{см}^{3} | |
| Испытательное оборудование | |||
| Сушильный шкаф лабораторный | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Рабочий диапазон температур от плюс 50 °C до плюс 200 °C | |
| Водяная баня-термостат с перемешиванием | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Рабочий диапазон температур от плюс 25 °C до плюс 100 °C | |
| Реактивы | |||
| Кислота соляная | ГОСТ 3118 | Чистота не ниже I группы, 1 подгруппы по ГОСТ 13867 | |
| Спирт этиловый | - | Медицинский | |
| Спирт изобутиловый | ГОСТ 6016 | Чистота не ниже II группы, 3 подгруппы по ГОСТ 13867 | |
| Нингидрин | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| L-серин | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Содержание основного вещества не менее 99% | |
| D-серин | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Содержание основного вещества не менее 99% | |
| Ванкомицин | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Порошок для приготовления раствора для инфузий с содержанием основного вещества 1000 мг | |
| Вода для лабораторного анализа | ГОСТ Р 52501 | 1-й степени чистоты | |
| Вспомогательные устройства, материалы | |||
| Система микроволновой подготовки проб с различными роторами и набором аксессуаров | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Подготовка проб в различных режимах: кислотное разложение/кислотный гидролиз; щелочной гидролиз; экстракция; синтез; сжигание в кислороде; выпаривание; сушка | |
| Шкаф лабораторный вытяжной | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Пластина для ТСХ Сорбфил ПТСХ-АФ-А | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Пластина для ТСХ с сорбционным слоем из фракционного силикагеля, закрепленным на инертной подложке из алюминиевой фольги. Фракция сорбента 5 — 17 мкм. Толщина слоя сорбента 110 — 120 мкм | |
| Хроматографическая камера | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Капилляр стеклянный | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Одноразовый полимерный капилляр для ТСХ | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Вместимость 0,5 мм3 | |
| Пробирка с коническим дном, с делениями и винтовой крышкой | Выпускается в соответствии технической документацией производителя | Вместимость 10 см3. Материал изготовления: контейнер — полипропилен; крышка — полипропилен | |
| Микропробирка для ПЦР с крышкой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Вместимость 1 см3. Материал изготовления: полипропилен | |
| Перчатки медицинские диагностические одноразовые | ГОСТ Р 52239 | Гладкие, «неопудренные» | |
| Эксикатор 2-190 ХС | ГОСТ 25336 | Эксикатор исполнения 2, диаметром корпуса 190 мм | |
| Вставка для эксикатора 2-175 | ГОСТ 9147 | Вставка для эксикатора исполнения 2, диаметром 175 мм | |
| Силикагель | ГОСТ 3956 | Гранулированный мелкопористый, марки КСМГ, высшего сорта | |
| Пинцет | ГОСТ 21241 | - | |
| Стаканчик для взвешивания СВ-19/9 | ГОСТ 25336 | Стакан типа СВ — высокий, с взаимозаменяемым конусом 19/9 | |
| Стакан В-1-25 ТС | ГОСТ 25336 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 25 см3, из термически стойкого стекла группы ТС | |
| Стакан В-1-200 ТС | ГОСТ 25336 | Стакан типа В исполнения 1, номинальной вместимостью 200 см3, из термически стойкого стекла группы ТС | |
| Пульверизатор | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Холодильник бытовой | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Механический простой карандаш | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Грифели (стержни) сменные для механического карандаша | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | Твердость 2B | |
| Ножницы | Выпускается в соответствии с технической документацией производителя | - | |
| Примечания: - допускается использование других средств измерений (СИ) утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается использование другого испытательного оборудования (ИО) с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками; - допускается применение вспомогательного оборудования, отличного от указанного, с аналогичными или лучшими техническими характеристиками; - допускается применение других реактивов с характеристиками не хуже указанных; - метрологическое обеспечение СИ и ИО (поверку СИ и аттестацию ИО) осуществляют организации, аккредитованные на данный вид деятельности. | |||
IV. Требования безопасности
4.1. Помещения лаборатории должны соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и требованиям по электробезопасности по ГОСТ 12.1.019.
4.2. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны определены в ГОСТ 12.1.005.
4.3. К выполнению измерений и обработке результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или среднее специальное образование, прошедшие специальную подготовку по выполнению аналитических работ, имеющие опыт работы в химической лаборатории и навыки работы с аналитическим оборудованием и компьютерной техникой, освоившие метод в процессе стажировки и ознакомленные:
- с технической документацией на аналитическое оборудование;
- с нормативными документами и стандартами, обозначенными в Библиографических ссылках к настоящим методическим указаниям.
V. Условия выполнения измерений
5.1 При выполнении аналитических работ в лаборатории соблюдаются следующие условия:
- температура окружающего воздуха, °C (20 +/- 5);
- атмосферное давление, кПа (мм рт. ст.) 84,0 — 106,7 (630 — 800);
- относительная влажность воздуха, %, не более 80.
5.2 При выполнении аналитических работ в лаборатории системы электропитания соответствуют следующим параметрам:
VI. Измерения массовых концентраций свинца, кадмия, хрома, ртути и мышьяка, содержащихся в различных формах серина в перчаточном соке, методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой
6.1. Методом измерений концентраций элементов анализируется химический состав перчаточного сока.
VII. Подготовка к выполнению измерений
7.1 Чистота воды.
При выполнении измерений используют воду для лабораторного анализа 1 степени чистоты <2>.
<2> ГОСТ Р 52501 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
7.2 Чистота химических реактивов.
Для выполнения исследований используют азотную кислоту чистоты не ниже II группы, 2 подгруппы <3>.
<3> ГОСТ 13867 «Продукты химические. Обозначение чистоты».
Фоновые уровни аналитов в кислоте должны быть незначимы по отношению к результатам анализа. С этой целью анализируют фоновые растворы (п. 7.12) и убеждаются в том, что пики изотопов определяемых элементов либо отсутствуют, либо высота пиков не превышает 20% их высоты в градуировочном растворе минимальной концентрации (п. 7.10).
Если результат контрольной процедуры удовлетворяет вышеуказанному требованию, процедуру анализа признают удовлетворительной.
При несоблюдении данного условия азотную кислоту очищают методом изотермической перегонки в термостойкой полипропиленовой системе. Анализ фоновых растворов повторяют. При повторном несоблюдении контрольной процедуры анализируемую азотную кислоту подвергают выбраковке.
7.3 Подготовка посуды.
Стеклянную лабораторную посуду:
- посуду мерную лабораторную стеклянную: цилиндры, колбы;
- посуду и оборудование лабораторные стеклянные;
- посуду лабораторную стеклянную: пипетки градуированные;
- посуду лабораторную стеклянную: пипетки с одной отметкой используются для приготовления растворов веществ при определении массовой концентрации элементов в анализируемых пробах. Изделия из стекла не следует оставлять на длительное время в контакте с растворами.
Все растворы следует хранить в пластиковой посуде. Наиболее пригодна для аналитических целей посуда из инертных материалов (например, полиэтилена, полипропилена).
Пластиковую посуду, пробирки с коническим дном, с делениями и винтовой крышкой используют для процедуры сбора образцов перчаточного сока и проведения соответствующих исследований. Не допускается повторное использование пластиковой посуды. После проведения исследований всю пластиковую поезду утилизируют в соответствии с методическими документами <4>.
<4> ГОСТ Р 54533 «Обращение с отходами. Руководящие принципы и методы утилизации полимерных отходов» (далее - ГОСТ Р 54533).
7.3.1 Подготовка стеклянной посуды.
Всю используемую для анализа проб посуду из стекла промывают раствором азотной кислоты с объемной долей 1:1 (п. 7.4.1) в ультразвуковой ванне и трижды ополаскивают водой для лабораторного анализа.
7.3.2 Подготовка пластиковой посуды.
Каждую партию одноразовых емкостей проверяют на наличие загрязнений, анализируя фоновый раствор (п. 7.12).
7.4 Приготовление водных растворов минеральных кислот.
Процедуру приготовления водных растворов минеральных кислот следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
7.4.1 Приготовление раствора азотной кислоты с объемной долей 1:1.
Раствор азотной кислоты готовят разбавлением концентрированной кислоты в стакане В-1-1000 ТС. Для приготовления 500 см3 раствора берут 250,0 см3 концентрированной азотной кислоты, отмеренной цилиндром 1-250-2. Отмеренный объем кислоты приливают к 250 см3 воды для лабораторного анализа.
Приготовленный раствор азотной кислоты тщательно перемешивают.
Раствор хранят до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка).
7.4.2 Раствор соляной кислоты с объемной долей 1:1.
Раствор соляной кислоты готовят разбавлением концентрированной кислоты в стакане В-1-1000 ТС. Для приготовления 500 см3 раствора берут 250,0 см3 концентрированной соляной кислоты, отмеренной цилиндром 1-250-2. Отмеренный объем кислоты приливают к 250 см3 воды для лабораторного анализа.
Приготовленный раствор соляной кислоты тщательно перемешивают.
Раствор хранят до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка).
7.5. Приготовление водного раствора этилового спирта с объемной концентрацией 25%.
Водный раствор этилового спирта готовят разбавлением медицинского спирта в стакане В-1-200 ТС.
Для приготовления 100 см3 раствора берут 25,0 см3 медицинского спирта, отмеренного цилиндром 1-25-2. Отмеренный объем спирта приливают к 75 см3 воды для лабораторного анализа.
Приготовленный водный раствор этилового спирта тщательно перемешивают.
Раствор хранят до изменения внешнего вида (изменение цвета включая мутность, образование хлопьев, осадка).
7.6 Регенерация силикагеля.
Процедуру регенерации силикагеля следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
Силикагель марки КСМГ вносят в стакан В-1-1000 ТС, заливают разбавленной соляной кислотой (1:1) (п. 7.4.2) и оставляют на 18 — 20 часов при периодическом взбалтывании содержимого стакана. Затем водный раствор соляной кислоты (1:1) декантируют, силикагель промывают водой для лабораторного анализа, заливают разбавленной азотной кислотой (1:1) (п. 7.4.1) и кипятят в течение 2 — 3 часов. После охлаждения водный раствор азотной кислоты (1:1) сливают, силикагель несколько раз промывают водой для лабораторного анализа до нейтральной реакции (по индикаторной бумаге) промывных вод. Промытый водой для лабораторного анализа силикагель высушивают в сушильном шкафу при температуре (130 +/- 5) °C в течение (4 — 6) часов.
Регенерированный силикагель марки КСМГ хранят в склянках с притертой пробкой до изменения внешнего вида.
7.7 Подготовка эксикатора.
7.7.1 Мойка и сушка эксикатора.
Мойку и сушку эксикатора 2-190 ХС следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией.
Эксикатор 2-190 ХС промывают разбавленной азотной кислотой (1:1) (п. 7.4.1), затем большим количеством водопроводной воды и в заключении ополаскивают три-четыре раза водой для лабораторного анализа.
Окончательную сушку эксикатора 2-190 ХС проводят в сушильном шкафу, установленном в вытяжном шкафу, при температуре от (105 +/- 5) °C.
7.7.2 Заправка эксикатора.
На дно эксикатора 2-190 ХС помещают осушитель. В качестве осушителя используется предварительно регенерированный силикагель (п. 7.6).
На нижнюю часть эксикатора 2-190 ХС помещают вставку для эксикатора 2-175 со специальными отверстиями, через которые обеспечивается циркуляция воздуха.
Вставку для эксикатора 2-175 выстилают обеззоленными фильтрами «синяя лента».
С целью обеспечения герметичности шлиф эксикатора смазывают вязким смазочным материалом — универсальной аэрозольной смазкой.
7.8 Подготовка весов специального класса точности к работе.
Процедура установки, процедура технического обслуживания и подготовки весов специального класса точности регламентируются в Руководстве по эксплуатации.
7.9 Подготовка стаканчиков для взвешивания.
7.9.1 Мойка и сушка стаканчиков для взвешивания.
Мойку и сушку стаканчиков для взвешивания СН-19/9 проводят по процедуре, описанной в п. 7.3.1.
7.9.2 Проверка герметичности стаканчиков для взвешивания.
Все работы со стаканчиками для взвешивания проводят в нейлоновых перчатках.
Испытания на герметичность проводят на сухих шлифах.
Герметичность стаканчиков для взвешивания проверяют следующим образом: около 4,50 г аккуратно нарезанной бумаги фильтровальной лабораторной ФБ-II («синяя лента») помещают в стаканчик для взвешивания. Высушивают при (102 +/- 5) °C в сушильном шкафу лабораторном до постоянной массы, охлаждают в эксикаторе 2-190 ХС с регенерированным силикагелем (п. 7.6) и оставляют на воздухе с закрытой крышкой на 30 мин. Масса бумаги фильтровальной лабораторной ФБ-II («синяя лента») не должна увеличиться более чем на 0,0020 г.
При невыполнении условия в соответствии с методическими документами <5> подбирают другую крышку стаканчику для взвешивания и процедуру проверки герметичности стаканчиков с крышкой повторяют.
<5> ГОСТ 8682 «Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы конические взаимозаменяемые».
По факту подбора крышек для стаканчиков проводят их маркировку.
Для этого на шлифованной части стаканчика для взвешивания и крышке графитовым карандашом ставят порядковый номер.
7.9.3. Приведение стаканчиков для взвешивания с крышкой в равновесие и их взвешивание.
Стаканчики для взвешивания с открытой крышкой помещают в сушильный шкаф лабораторный на 30 — 40 мин при температуре (102 +/- 5) °C, при этом крышки кладут на стаканчики ребром.
По истечении времени эксикатор 2-190 ХС с регенерированным силикагелем (п. 7.6) подносят к сушильному шкафу и в него переносят тигельными шприцами стаканчики с открытой крышкой.
Через 40 мин охлажденные стаканчики для взвешивания закрывают крышкой, вынимают из эксикатора и взвешивают на весах специального класса точности.
При работе с эксикатором 2-190 ХС во избежание проблем с открытием крышки в результате охлаждения теплого воздуха внутри эксикатора и возникновения давления разряжения, крышку следует аккуратно сдвигать в сторону.
Взвешивание стаканчиков для взвешивания с крышкой проводят в следующем порядке:
- открывают одну из стеклянных дверок камеры для взвешивания у весов специального класса точности, помещают на платформу весов стаканчик с крышкой и снова закрывают стеклянную дверцу;
- дожидаются стабилизации показаний весов и фиксируют результат измерений.
Стаканчики для взвешивания с закрытой крышкой хранят в эксикаторе 2-190 ХС с регенерированным силикагелем (п. 7.6) до начала гравиметрических измерений, но не более 3 часов.
По истечении 3 часов процедуры установления равновесия и взвешивания стаканчиков с крышкой повторяют.
7.10 Приготовление основных одноэлементных градуировочных растворов.
7.10.1. Приготовление основных одноэлементных градуировочных растворов с массовой концентрацией 100 мг/дм3 (для Cd, Cr, Pb, Hg) (раствор А1).
Основные одноэлементные градуировочные растворы А1 готовят из СО состава растворов ионов элементов в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкциях по их применению.
В мерную колбу 2-50-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-5 5,00 см3 СО состава раствора элемента, добавляют 3,20 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Основной одноэлементный градуировочный раствор А1 стабилен в течение 1 месяца при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
7.10.2. Приготовление основного одноэлементного градуировочного раствора с массовой концентрацией 50 мг/дм3 (для As) (раствор А2).
Основной одноэлементный градуировочный раствор А2 готовят из СО состава раствора ионов элемента в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкциях по их применению.
В мерную колбу 2-10-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-5 5,00 см3 СО состава раствора элемента, добавляют 0,10 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Основной одноэлементный градуировочный раствор А2 стабилен в течение 1 месяца при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
7.11 Приготовление многоэлементных градуировочных растворов.
При приготовлении многоэлементных градуировочных растворов следует учитывать химическую совместимость и возможность гидролиза компонентов.
7.11.1. Приготовление основного многоэлементного градуировочного раствора элементов с массовой концентрацией 1 мг/дм3 (для As, Cd, Cr, Pb, Hg) (раствора Б1).
Основной градуировочный раствор Б1 готовят из основных одноэлементных градуировочных растворов.
В мерную колбу 2-100-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-1 1,00 см3 основного одноэлементного градуировочного раствора А1 (п. 7.10.1) и пипеткой 2-2-2 2,00 см3 основного одноэлементного градуировочного раствора А2 (п. 7.10.2), добавляют 1,00 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Многоэлементный градуировочный раствор используют в день приготовления.
7.11.2. Приготовление основного многоэлементного градуировочного раствора элементов с массовой концентрацией 0,1 мг/дм3 (для As, Cd, Cr, Pb, Hg) (раствора Б2).
Основной градуировочный раствор Б2 готовят из основного многоэлементного градуировочного раствора Б1 (п. 7.11.1).
В мерную колбу 2-100-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-10 10,00 см3 основного многоэлементного градуировочного раствора Б1 (п. 7.11.1), добавляют 1,00 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Многоэлементный градуировочный раствор используют в день приготовления.
7.11.3. Приготовление основного многоэлементного градуировочного раствора элементов с массовой концентрацией 0,01 мг/дм3 (для As, Cd, Cr, Pb, Hg) (раствор Б3).
Основной градуировочный раствор Б3 готовят из основного многоэлементного градуировочного раствора Б2 (п. 7.11.2).
В мерную колбу 2-100-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-10 10,00 см3 основного многоэлементного градуировочного раствора Б2 (п. 7.11.2), добавляют 1,00 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Многоэлементный градуировочный раствор используют в день приготовления.
7.12 Приготовление фонового раствора (раствор В1).
В емкость (п. 7.3), предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, добавляют концентрированную азотную кислоту из расчета 1,00 см3 азотной кислоты на 100 см3 раствора, доводят объем раствора в емкости до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
7.13 Приготовление шкалы градуировочных растворов элементов.
Шкалу градуировочных растворов элементов готовят из основных многоэлементных градуировочных растворов Б2 (п. 7.11.2) и Б3 (п. 7.11.3) в соответствии с табл. 5 в мерных колбах 2-100-2, предварительно заполненных на 1/4 водой для лабораторного анализа.
Приготовление шкалы градуировочных растворов элементов
| Номер градуировочного раствора | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 |
|---|---|---|---|---|---|
| Объем основного многоэлементного градуировочного раствора Б3 <6>, см3 | - | 1,00 | 10,00 | 100,00 | - |
| Объем основного многоэлементного градуировочного раствора Б2 <7>, см3 | - | - | - | - | 100,00 |
| Объем концентрированной азотной кислоты, см3 | 1,00 | 1,00 | 1,00 | - | - |
| Объем воды для лабораторного анализа, см3 | 99,00 | 98,00 | 89,00 | - | - |
| Массовая концентрация элементов в градуировочном растворе, мкг/дм3 | 0 | 0,1 | 1 | 10 | 100 |
<6> Основной многоэлементный градуировочный раствор элементов с массовой концентрацией 0,01 мг/дм3 (для As, Cd, Cr, Pb, Hg) (раствор Б3 (п. 10.11.3)).
<7> Основной многоэлементный градуировочный раствор элементов с массовой концентрацией 0,1 мг/дм3 (для As, Cd, Cr, Pb, Hg) (раствор Б2 (п. 10.11.2)).
Растворы для установления градуировочной характеристики используют в день приготовления.
7.14 Приготовление рабочего оптимизационного раствора.
Оптимизационный раствор применяют для градуировки шкалы масс и оптимизации условий функционирования спектрометра, например, для настройки максимальной чувствительности при минимальной степени образования оксидов и минимального образования двухзарядных ионов в центральном канале плазменной горелки масс-спектрометра.
Раствор должен содержать элементы, перекрывающие весь диапазон массовых концентраций определяемых элементов, а также элементов, особо склонных к образованию оксидов или двухзарядных ионов. Например, производителем масс-спектрометра рекомендуется оптимизационный раствор, содержащий Ce, Co, Li, Mg, Tl и Y.
Массовая концентрация элементов, используемых для приготовления рабочего оптимизационного раствора, должна быть выбрана таким способом, чтобы она позволяла достичь значения сигнала более чем 10000 импульсов/с.
Для приготовления рабочего оптимизационного раствора отбирают необходимые для выполнения приведенного условия объемы оптимизационного раствора состава соответствующих элементов, вносят пипетками в мерную колбу, например, в мерную колбу 2-100-2; затем добавляют 1,00 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Рабочий оптимизационный раствор стабилен в течение 3 месяцев при хранении в темном месте.
7.15 Приготовление растворов внутренних стандартов.
Применение раствора внутреннего стандарта в ИСП-МС позволяет компенсировать погрешность разбавления образцов и учесть многие матричные влияния на плазму и поток ионов.
7.15.1. Приготовление раствора внутреннего стандарта элемента сравнения с массовой концентрацией 100 мг/дм3 (для In) (раствора Г1).
Раствор внутреннего стандарта элемента сравнения Г1 готовят из стандартного образца СО 2313 с массой индия марки ИН-00 1 г.
СО индия небольшой порцией воды для лабораторного анализа (~ 10 см3) переносят в стакан В-1-50 ТС, добавляют 6,30 см3 концентрированной азотной кислоты и растворяют при нагревании на электрической плитке. Раствор охлаждают до комнатной температуры и количественно переносят в мерную колбу 2-100-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа. Доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Внутренний стандарт элемента сравнения представляет собой водный раствор индия в 1 М растворю азотной кислоты.
Раствор внутреннего стандарта элемента сравнения Г1 стабилен в течение 1 года при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
7.15.2. Приготовление растворов внутренних стандартов элементов сравнения с массовой концентрацией 100 мг/дм3 (для Co, Re, Rh) (раствора Г2).
Растворы внутренних стандартов элементов сравнения Г2 готовят из СО состава растворов ионов элементов в соответствии с инструкцией по их применению.
В мерную колбу 2-50-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-5 5,00 см3 СО состава раствора элемента, добавляют 0,50 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Раствор внутреннего стандарта элемента сравнения Г2 стабилен в течение 1 месяца при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
7.15.3. Приготовление раствора внутреннего стандарта элемента сравнения с массовой концентрацией 50 мг/дм3 (для Be) (раствора Г3).
Раствор внутреннего стандарта элемента сравнения Г3 готовят из СО состава раствора ионов элемента в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкции по его применению.
В мерную колбу 2-10-2, предварительно заполненную на 1/4 водой для лабораторного анализа, вносят пипеткой 2-2-5 5,00 см3 СО состава раствора элемента, добавляют 0,10 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки водой для лабораторного анализа и тщательно перемешивают.
Раствор внутреннего стандарта элемента сравнения Г3 стабилен в течение 1 месяца при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
7.16 Подготовка оборудования к работе.
Подготовку масс-спектрометра к работе проводят в соответствии с Руководством по эксплуатации. Необходимые режимы работы устанавливают в соответствии с рекомендациями производителя. После запуска прибора производят проверку рабочих характеристик прибора, включая проверку чувствительности во всем диапазоне масс, проверку уровня фона, уровня вторичных оксидных и двухзарядных ионов.
VIII. Устранение мешающего влияния матричных компонентов пробы
8.1. Сопутствующие элементы, присутствующие в пробе, могут оказывать влияние на определение аналитов, например, приводить к систематическим погрешностям при измерении значения сигнала на приборе.
Мешающие влияния в методе ИСП-МС подразделяют на спектральные и неспектральные.
Спектральные мешающие влияния действуют на значение сигнала аддитивно (вызывая параллельный сдвиг аналитической функции), если они не отделены от пика массы аналита. Они вызываются моно- и многоатомными ионами, имеющими то же отношение массы иона к заряду (m/z), что и аналит. Спектральные влияния, вызванные моно- и многоатомными ионами, называются также изобарическими мешающими влияниями.
8.1.1 Изобарические элементные мешающие влияния.
Изобарические элементные мешающие влияния вызываются изотопами разных элементов с одним и тем же номинальным значением отношения массы к заряду (например, 114Cd мешает 114Sn).
Мешающие изобарические влияния могут быть скорректированы путем учета влияния мешающего элемента. Возможные варианты коррекции включены в программное обеспечение к квадрупольному масс-спектрометру.
8.1.2 Изобарические мешающие влияния за счет многоатомных ионов.
Многоатомные ионы могут образоваться в плазме из составляющих ее компонентов или за счет неполной диссоциации молекул в области интерфейса.
Основные изобарические мешающие влияния представлены на рис. 2.1 приложения 2 к настоящим МУК.
Для устранения спектральных наложений от полиатомных ионов при определении элементного состава в индуцированной мокроте методом ИСП-МС применяется несколько способов:
- минимизация концентрации хлоридов в распыляемых растворах путем исключения использования соляной кислоты, которая вызывает образование хлорсодержащих полиатомных ионов (Cr, As, испытывающих наложения от полиатомных ионов ClO4, ArCl4);
- определение элементного состава в анализируемых пробах с массовой концентрацией растворенных веществ не более 3 г/дм3;
- использование ORS4 с режимом работы «с гелием» (рис. 2.2 приложения 2 к настоящим МУК).
Особенности квадрупольного масс-спектрометра с ORS4 позволяют достигать лучших пределов обнаружения, уверенно определять традиционно трудные элементы для ИСП-МС в органических матрицах (Cr, As, Hg), а также проводить более точный изотопный анализ вещества (рис. 2.3 и рис. 2.4 приложения 2 к настоящим МУК).
На рисунке 2.5 приложения 2 к настоящим МУК приводится информация по выбору режима «с гелием» при работе с квадрупольным масс-спектрометром с ORS4.
8.1.3 Неспектральные мешающие влияния.
Неспектральные мешающие влияния, обычно называемые матричными эффектами, возникают из-за различия в вязкости и поверхностном натяжении между градуировочными растворами и образцами. Вязкость растворов влияет на эффективность распыления и, как следствие, воздействует на сигнал каждого анализируемого изотопа в растворе, в идеале пропорционального его концентрации. Вязкость водных растворов зависит от концентрации кислоты и от концентрации матричных компонентов.
Нормализуя кислотный фон в стандартах, холостых пробах и образцах, влияние транспортных помех было уменьшено до незначимого уровня.
Применение внутренней стандартизации позволяет компенсировать погрешность разбавления образцов, учесть многие матричные влияния на плазму и поток ионов, скорректировать изменения в эффективности распылителя, которое может возникнуть во время анализа. Внутренние стандарты могут быть использованы для коррекции мешающего влияния, которое является результатом несовпадения матриц градуировочного и анализируемого растворов.
В качестве внутреннего стандарта при коррекции используются растворы элементов:
- 59Co, 9Be — для нижнего диапазона масс аналитов (п. 7.15.2, п. 7.15.3);
- 103Rh, 115In — для среднего диапазона масс аналитов (п. 7.15.1, п. 7.15.2);
- 185Re — для больших значений масс аналитов (п. 7.15.2).
Элемент(ы) выбранного внутреннего стандарта не должны присутствовать в анализируемой пробе на уровне, при котором они оказывают негативное влияние на результат анализа.
Внутренний стандарт добавляют во все подлежащие количественному анализу растворы так, чтобы его концентрация была в них одинаковой (например, в градуировочные растворы, холостые пробы, анализируемые растворы проб).
Внутренние стандарты могут быть добавлены к анализируемым пробам до измерений или непосредственно в процессе измерений при помощи двухканального перистальтического насоса, тройника и смесителя в форме змеевика. При добавлении внутренних стандартов к анализируемым растворам необходимо учитывать фактор разбавления.
Примечание: при добавлении одинаковых объемов внутреннего стандарта с заданной концентрацией во все подлежащие количественному анализу растворы коэффициент разбавления равен 1.
Программа обработки данных масс-спектрометра с ORS4 позволяет автоматически проводить обработку данных.
IX. Установление градуировочной характеристики
9.1. Градуировочные растворы элементов, используемые для установления градуировочной характеристики, готовят в соответствии с п. 7.13.
Градуировочные растворы измеряют в порядке возрастания массовой концентрации элементов в соответствии с главой VIII.
При помощи программного обеспечения к прибору устанавливают градуировочную зависимость I = f(C) для каждого определяемого элемента.
Проверяют приемлемость градуировочной характеристики, используя коэффициент корреляции R, он должен быть не менее 0,950 <8>.
<8> Коэффициент корреляции указан в соответствии с РМГ 61 (таблица И.4) для числа степеней свободы f = 4 — 2, где 4 — количество концентраций, выбранных для построения ГХ. При использовании программного обеспечения масс-спектрометра для установления коэффициента корреляции и выборе его приемлемого значения следует руководствоваться рекомендациями производителя.
Градуировочные характеристики устанавливают перед каждым измерением массовой концентрации элементов в анализируемых пробах.
X. Контроль стабильности градуировочной характеристики
10.1. Стабильность градуировочной характеристики проверяют периодически, например, через каждые 20 анализируемых подряд проб, с использованием не менее одного градуировочного раствора (п. 7.13).
При помощи программного обеспечения к прибору с использованием градуировочных зависимостей I = f(C) определяют массовые концентрации элементов в контрольных растворах.
Градуировочная характеристика признается стабильной, если выполняется условие (1):
|\text{С } - \text{С}_{\text{элемента}}| \leq \delta_{\text{ГХ}} \cdot \text{С } \cdot 0,01, (1)
где C — действительное значение массовой концентрации элемента в контрольном растворе, мкг/дм3;
Cэлемента — результат контрольного измерения массовой концентрации элемента в этом же контрольном растворе, мкг/дм3;
\delta_{\text{ГХ}} — погрешность установления градуировочной характеристики (относительное значение, приведенное в табл. 6), %;
0,01 — коэффициент пересчета разности концентраций элемента на мкг/дм3.
Погрешность установления градуировочной характеристики
В случае невыполнения условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению. Если условие стабильности не выполняется при повторном измерении контрольного раствора, то строят новый градуировочный график.
При помощи программного обеспечения к масс-спектрометру проводят проверку линейности градуировочных характеристик по коэффициенту корреляции R (глава IX).
XI. Отбор проб перчаточного сока
11.1. Секрецию пота стимулируют в результате выполнения операций в медицинских перчатках.
Ладонная область обоих предплечий выбрана на основании высокой плотности эккринных потовых желез вместе с очень низкой плотностью апокриновых/апоэкриновых потовых желез и легко доступна.
Пробы пота отбирают в гладкие, «неопудренные», медицинские перчатки.
Отбор проб перчаточного сока проводят после осмотра кожного покрова кистей рук на наличие микротравм и воспалений. При обнаружении повреждений и клинических признаков обезвоживания отбор не проводят. Водный баланс необходимо поддерживать в течение как минимум 8 часов до начала сбора анализируемого образца.
Перед процедурой взятия материала пациента предварительно просят снять кольца, часы или другие украшения (при необходимости) и тщательно вымыть кисти рук под проточной водой, соблюдая процедуры, установленные на рис. 3.1 приложения 3 к настоящим МУК.
После обработки кистей рук под проточной водой их ополаскивают в воде для лабораторного анализа. Для этого используют стеклянную ванну ВП-2.00, подготовленную по п. 7.3.1 (рис. 3.2 приложения 3 к настоящим МУК).
На хорошо просушенные безворсовой салфеткой кисти рук надевают медицинские перчатки.
Размер перчаток подбирают таким образом, чтобы они плотно прилегали к рукам.
Длину перчатки измеряют по кратчайшему расстоянию от кончика среднего пальца до края манжеты. Ширину перчатки измеряют на плоской поверхности через среднюю точку между основаниями указательного и большого пальцев (рис. 3.3 приложения 3 к настоящим МУК).
Размеры медицинских перчаток и допустимые отклонения приведены в методических документах <9> и в табл. 3.1 приложения 3 к настоящим МУК.
<9> ГОСТ Р 52239 «Перчатки медицинские диагностические одноразовые. Часть 1. Спецификация на перчатки из каучукового латекса или раствора».
Процедура надевания перчаток приведена на рис. 3.4 приложения 3 к настоящим МУК.
Время экспозиции при температуре окружающего воздуха в помещении плюс 22 °C и более <10> составляет 60 мин. При температуре окружающего воздуха в помещении менее плюс 22 °C время экспозиции необходимо увеличить.
<10> Относительная влажность воздуха не более 80%.
При отборе проб перчаточного сока необходимо придерживаться следующего алгоритма во время снятия перчаток с кистей рук пациента:
Перчаточный сок смывают с поверхности перчаток, контактирующих с кожей кистей рук, водным раствором этанола (п. 7.5).
Для этого вывернутую наизнанку перчатку помещают в чашку ЧБН-2, предварительно заполненную 10,00 см3 спиртового раствора (п. 7.5). Полностью окунать перчатку в чашку ЧБН-2 с содержимым не нужно. Левой рукой перчатку придерживают за отворот и пинцетом, находящимся в правой руке, прополаскивают в водном растворе спирта.
Перчаточный сок смывают с поверхности обеих перчаток, используя две чашки ЧБН-2 (одну чашку для перчатки с правой руки, а вторую — для перчатки с левой руки).
Обработку перчаток следует проводить как можно скорее после отбора проб.
После смыва пота с перчаток их утилизируют в соответствии с методическими документами <11>.
<11> ГОСТ Р 54533.
Смывы с перчаток (точечные пробы) объединяют, сливая их в одноразовую пластиковую пробирку с делениями вместимостью 15 см3. Объем пробы фиксируют в сопроводительном документе к анализируемому образцу.
Примечание: при смешивании точечных проб не следует стремиться выгонять остатки жидкости из «приемников».
Для определения количества выделенного перчаточного сока у пациента измеряют его массу глава XII.
XII. Определение массы перчаточного сока
12.1. Массу перчаточного сока у пациента определяют гравиметрическим методом. Принцип метода основан на увеличении массы водного раствора этилового спирта (п. 7.5), используемого для смыва перчаточного сока, скопившегося в медицинской перчатке у пациента во время экспозиции, по сравнению с первоначальной массой.
Для этого в стаканчик для взвешивания СВ-19/9, подготовленный по п. 7.9, с использованием пипетки с одной меткой 2-2-5 вносят 5,00 см3 смыва с перчаток (глава XI).
Плотно закрытый крышкой стаканчик для взвешивания СВ-19/9 с содержимым взвешивают на весах высокого класса точности при параметрах микроклимата, указанных в п. 5.1.
Одновременно аналогичным образом подготавливают холостую пробу, заменяя пробу смыва с перчаток на такой же объем водного раствора этилового спирта (п. 7.5).
Выполнение измерений массы холостой пробы проводят в трех параллелях.
Массу выделенного перчаточного сока у пациента (m, г) рассчитывают по формуле (1):
m = (m_{8} - m_{7}) - (\frac{(m_{2} - m_{1}) + (m_{4} - m_{3}) + (m_{6} - m_{5})}{3}), (1)
где m1, m3, m5, m7 — массы пустых стаканчиков для взвешивания СВ 19/9, г;
m2, m4, m6 — массы стаканчиков для взвешивания СВ 19/9 с водным раствором этилового спирта, г;
m8 — масса стаканчика для взвешивания СВ 19/9 со смывом с перчаток, г;
3 — коэффициент пересчета количества холостых проб на отдельную анализируемую пробу.
Массу перчаточного сока фиксируют в сопроводительном документе к анализируемому образцу.
Объем пробы, взятый для определения массы перчаточного сока, используют в дальнейшем при проведении исследований.
Для проведения исследований в единичной пробе достаточно 5,00 см3 смыва с перчаток для элементного анализа методом ИСП-МС и 2,75 см3 смыва с перчаток для диагностики энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, методом ТСХ.
XIII. Выполнение измерений
13.1. Для определения массовой концентрации элементов, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке 5,00 см3 смыва с перчаток переносят в реакционный сосуд микроволновой системы подготовки проб, добавляют 0,05 см3 концентрированной азотной кислоты, закрывают реакционный сосуд, загружают ротор и проводят кислотную минерализацию в соответствии с инструкцией по эксплуатации микроволновой системы подготовки проб.
Одновременно аналогичным образом подготавливают холостую пробу, заменяя пробу анализируемого перчаточного сока на такой же объем воды для лабораторного анализа. Минерализат переносят в пластиковую пробирку вместимостью 10 см3.
13.2. Настраивают параметры ИСП-МС в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора. Прибор выдерживают во включенном состоянии и зажженной плазмой примерно 30 мин до начала измерений с учетом требований Руководства по эксплуатации масс-спектрометра.
Перед началом каждой серии измерений контролируют параметры работы прибора в соответствии с Руководством по эксплуатации, проверяют чувствительность и стабильность работы с использованием оптимизационного раствора (п. 7.14). Проверку разрешения и градуировку шкалы масс проводят с периодичностью, установленной в Руководстве по эксплуатации масс-спектрометра.
Устанавливают оптимальный режим регистрации масс-спектров и измерений в соответствии с рекомендациями производителя масс-спектрометра. Примеры выбора оптимальных масс и достигаемые при этом пределы обнаружения приведены на рис. 2.5 приложения 2 к настоящим МУК.
Для определения массовой концентрации элементов, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке проводят количественный анализ.
Аналитические сигналы обрабатывают с помощью программного обеспечения квадрупольного масс-спектрометра с использованием градуировочных зависимостей I = f(C), рассчитанных методом наименьших квадратов, с учетом изобарных и полиатомных спектральных наложений (глава VIII).
13.3. При необходимости определения более высоких концентраций элементов (п. 7.13, табл. 5) анализируемый образец разбавляют не более чем в 2 раза.
Выполнение измерений массовой концентрации элементов в анализируемых пробах пота проводят в двух параллелях.
XIV. Обработка результатов измерений
14.1 Концентрацию элементов (X, мкг/г) в единичной пробе рассчитывают по формуле (2):
X = \frac{(C_{\text{элемента}} - C_{\text{хол}.}) \cdot V_{\text{пробы}}}{m_{\text{пота}} \cdot 1000} \cdot \eta, (2)
где Cэлемента — массовая концентрация элемента в анализируемой пробе перчаточного сока (в 5,00 см3 по п. 13.1), установленная по градуировочному графику, мкг/дм3;
Cхол. — массовая концентрация элемента в холостой пробе, установленная по градуировочному графику, мкг/дм3;
Vпробы — объем смыва с поверхности перчаток — 5,00 см3, см3;
mпота — масса выделенного перчаточного сока, г;
1000 — коэффициент пересчета объема смыва в отдельной анализируемой пробе на дм3;
\eta — кратность разбавления раствора обработанной пробы — коэффициент разбавления по п. 13.3.
XV. Оформление результатов измерений
15.1 Результат измерений по настоящей методике в документах, предусматривающих ее использование, представляют в виде:
(X_{\text{ср}.} \pm \Delta_{\text{л}}) , мкг/г (при P = 0,95), (3)
где Xср. — среднее арифметическое значение двух параллельных результатов измерений, разность между которыми не превышает предела повторяемости rn, при превышении предела повторяемости следует поступать в соответствии с п. 16.2;
\Delta_{\text{л}} — значение абсолютной погрешности, мкг/г, рассчитанное по формуле (4):
\Delta_{\text{л}} = \delta_{\text{л}} \cdot X_{\text{ср}.} \cdot 0,01, (4)
где \delta_{\text{л}} — показатель точности (п. 2.1), %;
0,01 — коэффициент пересчета погрешности на мкг/г.
Численные значения результатов измерений должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики абсолютной погрешности, которые не должны содержать более двух значащих цифр.
XVI. Контроль точности результатов измерений
16.1. Контроль точности результатов измерений, проводимых по настоящей методике, осуществляют путем поверки применяемых средств измерений, калибровки применяемого испытательного оборудования, а также путем проведения оперативного контроля процедуры измерений для контроля точности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры.
Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля точности результатов выполняемых измерений регламентируют в руководстве по качеству аккредитованной лаборатории (центра).
16.2. Алгоритм оперативного контроля повторяемости при проведении контрольной процедуры.
Алгоритм оперативного контроля повторяемости при проведении контрольной процедуры осуществляют для каждого из результатов измерений, полученных в соответствии с методикой. Для этого от смыва перчаточного сока, скопившегося в медицинской перчатке у пациента во время экспозиции (глава XI), отбирают две аликвоты и выполняют измерения в соответствии с главами XII - XIII настоящих методических указаний.
Результат контрольной процедуры rк, мкг/г, рассчитывают по формуле (5):
где X1, X2 — результаты единичных измерений (параллельных определений) массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока, мкг/г.
Предел повторяемости rп, мкг/г, рассчитывают по формуле (6):
r_{\text{п}} = 2,77 \cdot \sigma_{r} \cdot X_{\text{ср}.}, (6)
где 2,77 — коэффициент, зависящий от числа контрольных определений (n = 2) и доверительной вероятности P = 0,95;
\sigma_{r} — показатель повторяемости, % (п. 2.1);
Xср. — результат измерений — среднеарифметическое значение двух результатов параллельных измерений массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока, мкг/г;
0,01 — коэффициент пересчета предела повторяемости на мкг/г.
Результат контрольной процедуры должен удовлетворять условию (7):
При несоблюдении условия (7) выполняют еще одно определение и сравнивают разницу между максимальным и минимальным из трех результатов с нормативом контроля — критическим диапазоном (8):
CR_{0,95}(3) = 3,31 \cdot \sigma_{r} \cdot X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.} \cdot 0,01, (8)
где 3,0 — коэффициент, зависящий от числа контрольных определений (n = 3) и доверительной вероятности P = 0,95;
\sigma_{r} — показатель повторяемости, % (п. 2.1);
X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.} — результат измерений — среднеарифметическое значение трех результатов измерений массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока, мкг/г;
0,01 — коэффициент пересчета CR0,95(3) на мкг/г.
Результат контрольной процедуры в этом случае должен удовлетворять условию (9):
В случае несоблюдения условия (9) поступают в соответствии с методическими документами <12>.
<12> Раздел 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
16.3. Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления проб.
Оперативный контроль процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок совместно с методом разбавления пробы проводят, если массовая концентрация элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока превышает величину концентрации, соответствующую нижнему пределу диапазона измерений массовой концентрации не менее чем в два раза (чтобы при разбавлении пробы не получить значение массовой концентрации меньше, чем нижняя граница диапазона измерений определяемого компонента). В противном случае оперативный контроль проводят с использованием метода добавок согласно п. 16.4.
Для введения добавок используют СО состава растворов ионов элементов в соответствии с рекомендациями, установленными в инструкциях по их применению (п. 3.1, табл. 3 и п. 7.10 - 7.11).
Оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля Кn.
Результат контрольной процедуры Кк, мкг/г, рассчитывают по формуле (10):
\text{К}_{\text{к}} = X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}.} + (\eta - 1) \cdot X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.} - X_{\text{ср}.} - C_{\text{д}}, (10)
где X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}.} — результат контрольного измерения — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока, разбавленной в \eta раз, с известной добавкой, мкг/г;
X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.} — результат контрольного измерения — среднеарифметическое значение результатов параллельных определений массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока, разбавленной в \eta раз, мкг/г;
Xср. — результат измерений — среднеарифметическое значение результатов параллельных контрольных измерений массовой концентрации элемента(ов) в исходной анализируемой пробе перчаточного сока, мкг/г;
Cд — массовая концентрация добавки, мкг/г.
Норматив контроля Кn рассчитывают по формуле (11):
\text{К}_{n} = \sqrt{\Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}.}}^{2} + (\eta - 1)^{2} \cdot \Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.}}^{2} + \Delta_{\text{л},X_{\text{ср}.}}^{2}} , (11)
где \Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}.}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации элемента(ов) в разбавленной пробе с добавкой, мкг/г;
\Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime_{\text{р}.}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации элемента(ов) в разбавленной пробе, мкг/г;
\Delta_{\text{л},X_{\text{ср}.}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации элемента(ов) в исходной пробе, мкг/г.
Значения характеристик абсолютной погрешности результатов измерений рассчитывают по формуле (4).
Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию (12):
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (12) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (12) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
16.4. Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок.
Оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля Кn.
Результат контрольной процедуры Кк, мкг/г, рассчитывают по формуле (13):
\text{К}_{\text{к}} = X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}}\prime_{.} - X_{\text{ср}.} - C_{\text{д}}, (13)
где X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}}\prime_{.} — среднее арифметическое результатов контрольных параллельных измерений массовой концентрации элемента(ов) в анализируемой пробе перчаточного сока с известной добавкой, мкг/г;
Xср. — результат измерений — среднеарифметическое значение результатов параллельных контрольных измерений массовой концентрации элемента(ов) в исходной анализируемой пробе перчаточного сока, мкг/г;
Cд — массовая концентрация добавки, мкг/г.
Норматив контроля погрешности Кn рассчитывают по формуле (14):
\text{К}_{n} = \sqrt{\Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}}\prime_{.}}^{2} + \Delta_{\text{л},X_{\text{ср}.}}^{2}} , (14)
где \Delta_{\text{л},X_{\text{с}}\prime\prime_{\text{р}}\prime_{.}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации элемента(ов) в пробе с известной добавкой, мкг/г;
\Delta_{\text{л},X_{\text{ср}.}} — значение абсолютной погрешности, соответствующее массовой концентрации элемента(ов) в исходной пробе, мкг/г.
Значения характеристик абсолютной погрешности результатов измерений рассчитывают по формуле (4).
Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию (12), процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (12) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (12) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
16.5. Алгоритм оперативного контроля внутрилабораторной прецизионности при проведении контрольной процедуры.
Контроль внутрилабораторной прецизионности осуществляют для результатов измерений, полученных в соответствии с методикой в условиях внутрилабораторной прецизионности (например, разные исполнители, и (или) разное время, и (или) разные наборы средств измерений). В качестве образцов для контроля используют анализируемые пробы перчаточного сока: от смыва перчаточного сока, скопившегося в медицинской перчатке у пациента во время экспозиции (глава XI), отбирают две аликвоты и выполняют измерения в условиях внутрилабораторной прецизионности в соответствии с главами XII - XIII.
Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении следующего условия (15):
где Xср.1 и Xср.2 — результаты измерений массовой концентрации элемента(ов) в образцах для контроля, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/г;
Rл — абсолютное значение допускаемого расхождения между двумя результатами, полученными в одной лаборатории в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/г.
Абсолютное значение допускаемого расхождения между двумя результатами, полученными в одной лаборатории в условиях внутрилабораторной прецизионности (Rл, мкг/г), рассчитывают по формуле (16):
R_{\text{л}} = 2,77 \cdot \sigma_{R\text{л}} \cdot X_{\text{ср}.} \cdot 0,01, (16)
где 2,77 — коэффициент, зависящий от числа контрольных определений (n = 2) и доверительной вероятности P = 0,95;
Xср. — среднее арифметическое значение контрольных результатов измерений массовой концентрации элемента(ов) в образцах для контроля (Xср.1 и Xср.2), мкг/г;
\sigma_{R\text{л}} — показатель внутрилабораторной прецизионности (п. 2.1), %;
0,01 — коэффициент пересчета Rл на мкг/г.
При выполнении условия (15) говорят об удовлетворительной внутрилабораторной прецизионности результатов измерений.
При превышении предела внутрилабораторной прецизионности анализ повторяют. При повторном превышении указанного предела выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.
XVII. Методика диагностики энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, методом тонкослойной хроматографии
17.1. Метод позволяет диагностировать энантиомерную чистоту серина, содержащегося в перчаточном соке.
XVIII. Подготовка к выполнению измерений
18.1 Чистота воды.
Чистота воды соответствует требованиям, установленным в п. 7.1.
18.2 Чистота химических реактивов.
Чистота химических реактивов соответствует требованиям, установленным в п. 7.2.
18.3 Подготовка посуды.
18.3.1 Подготовка стеклянной посуды.
Подготовку стеклянной посуды проводят по п. 7.3.1.
18.3.2 Подготовка пластиковой посуды.
Подготовка пластиковой посуды не проводится. Для проведения измерений используются одноразовые пробирки с коническим дном (п. 3.2. табл. 4). После проведения исследований вся пластиковая посуда утилизируется в соответствии с методическими документами <13>.
<13> ГОСТ Р 54533.
18.4. Приготовление водного раствора этилового спирта с объемной концентрацией 25%.
Приготовление водного раствора этилового спирта проводят по п. 7.5.
18.5. Приготовление водного раствора соляной кислоты с молярной концентрацией 6 моль/дм3.
Раствор соляной кислоты готовят разбавлением концентрированной кислоты в стакане В-1-200 ТС. Для приготовления 100 см3 раствора берут 20,0 см3 концентрированной соляной кислоты, отмеренной цилиндром 1-25-2. Отмеренный объем кислоты приливают к 80 см3 воды для лабораторного анализа.
Приготовленный раствор соляной кислоты тщательно перемешивают.
Раствор хранят до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка).
18.6. Приготовление раствора нингидрина в изобутиловом спирте с массовой концентрацией 0,5%.
На весах высокого класса точности в стакане В-1-25 ТС берут навеску 0,50 г нингидрина.
Процедуру приготовления раствора нингидрина в изобутиловом спирте следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в вытяжном шкафу.
Навеску нингидрина количественно переносят в мерную колбу 2-100-2 изопропиловым спиртом. Растворяют нингидрин при нагревании на водяной бане (Tраств. = (60 +/- 5) °C). Раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора в колбе до метки изобутиловым спиртом и тщательно перемешивают.
Раствор нингидрина в изобутиловом спирте используют в день приготовления.
18.7. Приготовление водного раствора ванкомицина с молярной концентрацией 0,006 моль/дм3.
Порошок ванкомицина для приготовления раствора для инфузий растворяют в 115 см3 воды для лабораторного анализа.
Водный раствор ванкомицина стабилен в течение 3 суток при хранении в темном месте при температуре плюс 3 — 5 °C.
18.8 Приготовление растворов оптических изомеров серина.
18.8.1. Приготовление основных однокомпонентных растворов оптических изомеров серина с массовой концентрацией 1 мг/см3 (для L-изомера серина и D-изомера серина) (раствор Д1).
Основные растворы оптических изомеров серина готовят из чистых веществ.
На весах специального класса точности в стаканчике для взвешивания СВ-19/9, подготовленном по п. 7.9, берут навеску 0,0050 г оптического изомера серина. В стаканчик для взвешивания СВ-19/9 с содержимым вносят пипеткой 2-2-5 5,00 см3 водного раствора этилового спирта (п. 18.4). Стаканчики для взвешивания закрывают крышкой. Содержимое стаканчика перемешивают плавными круговыми движениями.
Основные однокомпонентные растворы оптических изомеров серина используют в день приготовления.
18.8.2. Приготовление основных однокомпонентных растворов оптических изомеров серина с массовой концентрацией 0,5 мг/см3 (для L-изомера серина и D-изомера серина) (раствор Д2).
Основные однокомпонентные растворы оптических изомеров серина Д2 готовят из основных однокомпонентных растворов оптических изомеров серина Д1.
В пластиковую микропробирку вместимостью 1 см3 ручным дозатором жидкости вносят 500 мм3 основного однокомпонентного раствора оптического изомера серина Д1 (п. 18.8.1), добавляют 500 мм3 водного раствора этилового спирта (п. 18.4). Пробирку закрывают крышкой и тщательно перемешивают.
Основные однокомпонентные растворы оптических изомеров серина используют в день приготовления.
18.8.3. Приготовление основного двухкомпонентного раствора оптических изомеров серина с массовой концентрацией 0,5 мг/см3 (для L-изомера серина и D-изомера серина) (раствор Д3).
Основной двухкомпонентный раствор оптических изомеров серина Д3 готовят из основных однокомпонентных растворов оптических изомеров серина Д1.
В пластиковую микропробирку вместимостью 1 см3 ручным дозатором жидкости вносят 500 мм3 основного однокомпонентного раствора L-серина (п. 18.8.1), добавляют 500 мм3 основного однокомпонентного раствора D-серина (п. 18.8.1). Пробирку закрывают крышкой и тщательно перемешивают.
Основной двухкомпонентный раствор оптических изомеров серина используют в день приготовления.
18.9 Подготовка пластин ПТСХ-АФ-А к работе.
Перед нанесением пробы пластины ПТСХ-АФ-А необходимо активировать в сушильном шкафу при температуре 100 — 110 °C в течение 60 мин.
Активированные пластины ПТСХ-АФ-А следует хранить в эксикаторе 2-190 ХС с регенерированным силикагелем (п. 7.6).
Срок хранения активированных пластин ПТСХ-АФ-А в эксикаторе 2-190 ХС с регенерированным силикагелем — не более 1 года.
В случае появления сильных сколов сорбционного слоя поврежденные края пластины ПТСХ-АФ-А необходимо обрезать острыми ножницами.
Для обеспечения равномерного подъема фронта элюента перед элюированием следует срезать углы в нижней части пластины ПТСХ-АФ-А на 6 — 8 мм под углом 45°.
XIX. Отбор проб перчаточного сока
19.1. Отбор проб перчаточного сока проводят в соответствии с главой XI.
XX. Выполнение измерений
20.1. Все работы по выполнению измерений проводят в медицинских одноразовых перчатках.
Для диагностики энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, 2,75 см3 смыва с перчаток переносят в реакционный сосуд микроволновой системы подготовки проб, добавляют 0,25 см3 соляной кислоты (п. 18.5), закрывают реакционный сосуд, загружают ротор и проводят кислотный гидролиз в соответствии с инструкцией по эксплуатации микроволновой системы подготовки проб.
1,00 см3 гидролизата переносят в пластиковую микропробирку вместимостью 1 см3.
20.2. На пластине ПТСХ-АФ-А механическим карандашом рисуют в горизонтальном направлении линию старта на расстоянии 10 мм от края пластины. В вертикальном направлении от линии старта механическим карандашом рисуют линию движения фронта растворителя.
Толщина линий должна быть тонкой, чтобы не разрушить сорбционный слой из фракционного силикагеля, закрепленного на инертной подложке из алюминиевой фольги за счет силиказоля.
Разрушение сорбционного слоя на пластине ПТСХ-АФ-А приведет к нарушению подвижности оптических изомеров серина (рис. 4.1 приложения 4 к настоящим МУК).
Анализируемую пробу раствора наносят с помощью микрокапилляра на пластину ПТСХ-АФ-А в точке пересечения линии старта и линии движения фронта растворителя.
Для получения качественной хроматограммы с выраженными пятнами размер пятна в диаметре не должен превышать 3 — 4 мм.
При несоблюдении этого правила получатся слишком большие вытянутые в длину пятна (пятна с «хвостами»), а L- и D-изомеры серина сольются в одно пятно.
20.3. Элюирование проводят в хроматографической камере, изготовленной прессованием из химически стойкого стекла (рис. 4.2 приложения 4 к настоящим МУК). Наличие разделительного выступа на дне камеры позволяет фиксировать пластины и экономить элюент, водный раствор ванкомицина (п. 18.7).
Высушенную в сушильном шкафу при температуре (40 +/- 5) °C в течение 10 мин пластину ПТСХ-АФ-А с нанесенными образцами аккуратно пинцетом помещают в хроматографическую камеру. При помещении пластины ПТСХ-АФ-А в камеру нанесенные пробы не должны оказаться ниже уровня элюента.
Наблюдают за поднятием фронта растворителя. Рекомендуемая высота подъема фронта растворителя для аналитических пластин ПТСХ-АФ-А 70 — 80 мм.
После проведения элюирования максимально полно удаляют с пластины растворитель, чтобы не допустить размывание пятен. Просушку пластины ПТСХ-АФ-А осуществляют в сушильном шкафу при температуре (40 +/- 5) °C в течение 40 мин.
20.4. Визуализацию разделения L- и D-изомеров серина проводят после проявления хроматограмм нингидрином. Для этого с использованием пульверизатора пластину ПТСХ-АФ-А опрыскивают в вытяжном шкафу раствором нингидрина (п. 18.6). Затем пластину ПТСХ-АФ-А нагревают в сушильном шкафу при температуре (100 +/- 5) °C в течение 5 мин.
Одновременно аналогичным образом подготавливают пластины ПТСХ-АФ-А с нанесенными образцами L- и D-изомеров серина (п. 18.8.2 и п. 18.8.3).
Оптические изомеры серина на пластине ПТСХ-АФ-А образуют пурпурные пятна.
Интенсивность окраски пятна зависит от количества вещества в анализируемой пробе.
XXI. Обработка результатов измерений
21.1. На рис. 5.1 приложения 5 к настоящим МУК показан пример идентификации энантиомеров \alpha - \text{аминокислоты} из основных растворов, содержащих L- и D-серина (п. 18.8.2 и п. 18.8.3).
Из приведенных данных видно, что L-серин смещается влево относительно линии движения фронта растворителя, а D-серин — вправо относительно линии движения фронта растворителя. При этом, подвижность оптических изомеров L- и D-серина совпадает.
Выборочные данные по обследованным пациентам приведены на рис. 5.2 приложения 5 к настоящим МУК.
Особое внимание следует уделить пластине ПТСХ-АФ-А, с анализируемой пробой перчаточного сока, на которой отсутствуют пурпурные пятна (рис. 5.2 а) приложения 5 к настоящим МУК).
Причиной отсутствия пурпурных пятен может быть усиление связывания энантиомеров серина с ионами двухзарядных металлов, которое увеличивается вправо вследствие концентрационного сдвига равновесия, формула (16):
Ser + Me^{2 +} \leftrightarrow [MeSer]^{+}, (16)
Me2+ — ион двухзарядного металла;
[MeSer|+ — комплексное (координационное) соединение серина с металлом (п. 1).
Концентрационный сдвиг может быть обусловлен попаданием в организм токсичного элемента и образованием стабильного биотоксичного соединения с \alpha - \text{аминокислотой} , входящей в состав белков.
Наличие пурпурных пятен на пластине ПТСХ-АФ-А (рис. 5.2 б) приложения 5 к настоящим МУК) говорит о том, что в организме присутствуют токсичные элементы, но они не связаны с энантиомерами серина.
Разработанный подход может быть использован в аналитической практике для диагностики заболевания на ранних стадиях, когда традиционные методы не применимы.
XXII. Оформление результатов измерений
22.2. Результат измерений по настоящей методике в документах, предусматривающих ее использование, представляют в виде таблицы (табл. 6.1 и 6.2 приложения 6 к настоящим МУК).
Приложение 1 к МУК 4.1.3833-22
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АМИНОКИСЛОТ И МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ, СОДЕРЖАЩИХСЯ В РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ СЕРИНА В ПЕРЧАТОЧНОМ СОКЕ
| № п/п | R | Название | Сокращенные обозначения |
| 1 | H | Глицин | Gly, (G) |
| 2 | CH3 | Аланин | Ala, (A) |
| 3 | HOCH2 | Серин | Ser, (S) |
| 4 | HSCH2 | Цистеин | Cys, (C) |
| 5 | HOOCCH2 | Аспарагиновая кислота | Asp, (D) |
| 6 | H2NOCCH2 | Аспарагин | Asn, (N) |
| 7 | C9H11NO2 | Фенилаланин <**> | Phe, (F) |
| 8 | C9H11NO3 | Тирозин | Tyr, (Y) |
| 9 | C11H12N2O2 | Триптофан <**> | Trp, (W) |
| 10 | C6H9N3O2 | Гистидин | His, (II) |
| 11 | (CH3)2CH | Валин <**> | Val, (V) |
| 12 | CH3HOCH | Треонин <**> | Thr, (T) |
| 13 | CH3SCH2CH2 | Метионин <**> | Met, (M) |
| 14 | HOOCCH2CH2 | Глутаминовая кислота | Glu, (E) |
| 15 | H2NOCCH2CH2 | Глутамин | Gln, (Q) |
| 16 | (CH3)2CHCH2 | Лейцин <**> | Leu, (L) |
| 17 | CH3CH2(CH3)CH | Изолейцин <**> | Ile, (I) |
| 18 | (H2N)HN=CNH(CH2)2CH2 | Аргинин | Arg, (R) |
| 19 | H2N(CH2)3CH2 | Лизин <**> | Lys, (K) |
| 20 | C5H9NO2 | Пролин | Pro, (P) |
| Примечание: <**> Незаменимые аминокислоты. | |||
Образование биогенных аминов из серина
| Аминокислота и образующиеся из нее биогенные амины | Формула биогенного амина | Функции биогенных аминов в организме |
Серин Коламин  Холин  Ацетилхолин | HOCH2CH2NH2 | Входит в состав кефалина <*> |
| HOCH2CH2N(CH3)3OH | Входит в состав лецитина <**> | |
| H3COOCH2CH2N(CH3)3OH | Медиатор, нейромедиатор <***> | |
| Примечание: <*> Кефалины (с др.-греч. — «голова») — природные соединения группы сложных липидов. Широко распространены в растительных и животных организмах в составе биологических мембран. Особенно богата кефалинами нервная ткань (кефалины впервые выделены из головного мозга). <**> Лецитины — сложные эфиры аминоспирта холина и диглицеридфосфорных кислот. Лецитин является действующим веществом так называемых гепатопротекторов, призванных предупреждать заболевания печени. <***> Медиатор — вещество, передающее нервное возбуждение через синаптическую щель от одной клетки периферической нервной системы к соседней. Нейромедиаторы — это вещества, воздействующие на постсинаптическую мембрану синапса центральной нервной системы и вызывающие деполяризацию (передача нервного импульса) или, напротив, гиперполяризацию (торможение передачи нервного импульса). | ||
Пептидные гормоны, содержащие серин
Рис. 1.1. Четвертичная структура инсулина. Вид сверху
Токсическое действие тяжелых металлов и мышьяка на организм человека
Рис. 1.2. Одноквадрупольный масс-спектрометр с индуктивно связанной плазмой
Рис. 1.3. Блок-схема диагностики энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке, методом тонкослойной хроматографии
Приложение 2 к МУК 4.1.3833-22
УСТАНОВЛЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ РАБОТЫ РЕАКЦИОННОГО РЕЖИМА ПРИБОРА ПРИ ИНТЕРФЕРЕНЦИОННОМ НАЛОЖЕНИИ
Рис. 2.1. Полиатомные интерференции в сложных матрицах
Рис. 2.2. Октопольная реакционная система (ORS4) с режимом работы с гелием
Цвет указывает дополнительные пики, обусловленные матричными эффектами
Рис. 2.3. Полиатомные интерференции в режиме «без газа»
Цвет указывает дополнительные пики, обусловленные матричными эффектами
Рис. 2.4. Полиатомные интерференции в режиме «с гелием»
Рис. 2.5. Определение элементов методом ИСП-МС в режиме «с гелием»
Приложение 3 к МУК 4.1.3833-22
ПОДГОТОВКА К ОТБОРУ ПРОБ ПЕРЧАТОЧНОГО СОКА, ОТБОР ПРОБ
Рис. 3.1. Правила обработки рук под проточной водой
Рис. 3.2. Фотография с процедурой обработки рук водой для лабораторного анализа
Рис. 3.3. Точки для измерения ширины и длины перчатки:
Размеры и допустимые отклонения перчаток
Рис. 3.4. Процедура надевания медицинских перчаток
Приложение 4 к МУК 4.1.3833-22
ДИАГНОСТИКА ЭНАНТИОМЕРНОЙ ЧИСТОТЫ СЕРИНА, СОДЕРЖАЩЕГОСЯ В ПЕРЧАТОЧНОМ СОКЕ, МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Рис. 4.1. Нарушение подвижности оптических изомеров серина за счет разрушения сорбционного слоя на пластине ПТСХ-АФ-А
Рис. 4.2. Фотография с изображением хроматографической камеры
Приложение 5
к МУК 4.1.3833-22
а) L-серин (однокомпонентный раствор, CL-серин = 1 мг/см3);
б) D-серин (однокомпонентный раствор, CD-серин = 1 мг/см3);
в) L- и D-серин при совместном присутствии (двухкомпонентный раствор, CL-,D-серин = 1 мг/см3)
Рис. 5.2. Диагностика энантиомерной чистоты серина, содержащегося в перчаточном соке
Приложение 6 к МУК 4.1.3833-22
ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
Результаты анализа токсичных элементов, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке
Результаты анализа токсичных элементов, содержащихся в различных формах серина, в перчаточном соке
| Пациент | Массовая концентрация токсичных элементов, мкг/г | Энантиомер серина | ||||||
| \cdot мужчина; \cdot возраст — 22 года; \cdot без патологий | Pb | Cd | Cr | Hg | As | L-изомер | D-изомер | Сумма L- и D-изомеров |
| 0,036 | - | - | - | 0,029 | - | - | + | |
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. ГОСТ 8.315 «Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения».
3. ГОСТ 12.1.004 «Пожарная безопасность. Общие требования».
4. ГОСТ 12.1.005 «Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
5. ГОСТ 12.1.019 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
6. ГОСТ 1770 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
7. ГОСТ 3118 «Кислота соляная. Технические условия».
8. ГОСТ 3956 «Силикагель технический. Технические условия».
9. ГОСТ 4461 «Реактивы. Кислота азотная. Технические условия».
10. ГОСТ 6016 «Реактивы. Спирт изобутиловый. Технические условия».
11. ГОСТ 8682 «Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы конические взаимозаменяемые».
12. ГОСТ 9147 «Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия».
13. ГОСТ 10157 «Аргон газообразный и жидкий. Технические условия».
14. ГОСТ 12026 «Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия».
15. ГОСТ 13867 «Продукты химические. Обозначение чистоты».
16. ГОСТ 21241 «Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний».
17. ГОСТ 25336 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
18. ГОСТ 28311 «Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний».
19. ГОСТ 29169 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой».
20. ГОСТ 29227 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
21. ГОСТ Р 52501 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
22. ГОСТ Р 52239 «Перчатки медицинские диагностические одноразовые. Часть 1. Спецификация на перчатки из каучукового латекса или раствора».
23. ГОСТ Р 54533 «Обращение с отходами. Руководящие принципы и методы утилизации полимерных отходов».
24. ГОСТ Р ИСО 5725-6 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
25. ТУ 0271-135-31323949 «Гелий газообразный (сжатый). Технические условия».