ГОСТ 30648.1-99. Межгосударственный стандарт. Продукты молочные для детского питания. Методы определения жира
(введен в действие Постановлением Госстандарта России от 23.09.1999 № 308-ст)
Примечание
Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия — национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза «О безопасности отдельных видов специализированной пищевой продукции, в том числе диетического лечебного и диетического профилактического питания» (ТР ТС 027/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 16.10.2018 № 168). Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза «О безопасности отдельных видов специализированной пищевой продукции, в том числе диетического лечебного и диетического профилактического питания» (ТР ТС 027/2012) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 18.10.2012 № 191). Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента «О безопасности пищевой продукции» (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 № 880). Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 № 02-03-48/563). Документ включен в Перечень национальных стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимых для применения и исполнения Федерального закона «Технический регламент на молоко и молочную продукцию» и осуществления оценки соответствия (Распоряжение Правительства РФ от 15.12.2008 № 1866-р). С 01.07.2003 до вступления в силу технических регламентов акты федеральных органов исполнительной власти в сфере технического регулирования носят рекомендательный характер и подлежат обязательному исполнению только в части, соответствующей целям, указанным в п. 1 ст. 46 Федерального закона от 27.12.2002 № 184-ФЗ. Документ введен в действие с 01.10.2000.
Введен в действие Постановлением Государственного комитета
Российской Федерации по стандартизации
и метрологии
от 23 сентября 1999 г. № 308-ст
Infant milk products. Methods for determination of fat
Предисловие
1. Разработан Всероссийским научно-исследовательским институтом молочной промышленности (ВНИМИ) и Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 186 «Молоко и молочные продукты».
2. Принят Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации (Протокол № 15-99 от 28 мая 1999 г.).
3. Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации и метрологии от 23 сентября 1999 г. № 308-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 30648.1-99 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 июля 2000 г.
1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на жидкие, пастообразные (творог) и сухие молочные продукты для детского питания и устанавливает кислотный и гравиметрический (контрольный) методы определения массовой доли жира.
2. НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 1341-97 Пергамент растительный. Технические условия
ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия
ГОСТ 2184-77 Кислота серная техническая. Технические условия
ГОСТ 3760-79 Аммиак водный. Технические условия
ГОСТ 4165-78 Медь (II) сернокислая 5-водная. Технические условия
ГОСТ 4204-77 Кислота серная. Технические условия
ГОСТ 4232-74 Калий йодистый. Технические условия
ГОСТ 4462-78 Кобальт (II) сернокислый 7-водный. Технические условия
ГОСТ 5632-72 Стали высоколегированные и сплавы коррозионно-стойкие, жаростойкие и жаропрочные. Марки
ГОСТ 5830-79 Спирт изоамиловый. Технические условия
ГОСТ 5962-67 Спирт этиловый ректификованный. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 6859-72 Приборы для отмеривания и отбора жидкостей. Технические условия
ГОСТ 10733-79 Часы наручные и карманные механические. Общие технические условия
ГОСТ 17498-72 Мел. Виды, марки и основные технические требования
ГОСТ 18481-81 Ареометры и цилиндры стеклянные. Технические условия
ГОСТ 23094-78 Жиромеры стеклянные. Общие технические условия
ГОСТ 24104-88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 26809-86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу
ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний
ГОСТ 29169-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
ГОСТ 29227-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
3. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ
Отбор проб и подготовка их к измерениям по ГОСТ 26809.
4. КИСЛОТНЫЙ МЕТОД
Сущность метода заключается в выделении жира из анализируемого продукта под действием концентрированной серной кислоты и изоамилового спирта с последующим центрифугированием смеси. Массовую долю выделившегося жира измеряют по шкале жиромера.
4.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Жиромеры (бутирометры) стеклянные по ГОСТ 23094 или действующему документу [1] исполнений 1-6, 1-7, 1-40.
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 4-го класса с наибольшим пределом взвешивания 200 г.
Термометры жидкостные по ГОСТ 28498 диапазоном измерения от 0 до 100 °C, ценой деления шкалы 0,5 или 1 °C.
Ареометр общего назначения по ГОСТ 18481 диапазоном измерения от 700 до 2000 кг/м3.
Цилиндр по ГОСТ 1770 1-50, 1-100.
Пипетки по ГОСТ 29227 типа 2, исполнения 1 или 2, 2-го класса вместимостью 5 и 10 см3.
Пипетка по ГОСТ 29169 вместимостью 10,77 см3.
Приборы (дозаторы) по ГОСТ 6859 для отмеривания изоамилового спирта и серной кислоты вместимостью соответственно 1 и 10 см3.
Часы песочные на 5 мин по НД или секундомер по действующему документу.
Центрифуга для измерения массовой доли жира молока и молочных продуктов с разделяющим фактором <*> K от 100 до 300 м/с2.
<*> Разделяющий фактор K = n^{2}D ,
где n — частота вращения, 1/с;
D — диаметр окружности вращения середин высот пробирок, м.
Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры (65 +/- 2) °C.
Прибор нагревательный для водяной бани.
Стаканы по ГОСТ 25336 Н-1-50 ТС.
Воронки по ГОСТ 25336 В-36-50 ХС.
Пробки резиновые для жиромеров [2].
Пергамент по ГОСТ 1341.
Кислота серная по ГОСТ 4204, ч. или кислота серная техническая по ГОСТ 2184 (купоросное масло контактных и концентрационных систем).
Спирт изоамиловый по ГОСТ 5830.
Мел по ГОСТ 17498.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
4.2 Проведение измерений
4.2.1 Измерения массовой доли жира в жидких продуктах
4.2.1.1. В два молочных жиромера (исполнений 1-6 или 1-7), стараясь не смочить горловину, отвешивают по 11 г жидкого продукта с отсчетом показаний до 0,005 г, наливают дозаторами по 10 см3 серной кислоты плотностью от 1750 до 1770 кг/м3 и по 1 см3 изоамилового спирта.
Допускается отмеривать пробу испытуемых жидких молочных продуктов пипеткой объемом 10,77 см3. В этом случае жиромер заполняют жидкостями в следующей последовательности: серная кислота, молочный продукт, изоамиловый спирт.
Уровень смеси в жиромере устанавливают на 1 — 2 мм ниже основания горловины жиромера, для чего разрешается добавлять несколько капель дистиллированной воды.
4.2.1.2. Жиромеры закрывают сухими пробками, вводя их немного более, чем наполовину в горловину жиромеров. Жиромеры встряхивают до полного растворения белковых веществ, переворачивая их не менее 5 раз так, чтобы жидкости в них полностью перемешались. Рекомендуется наносить мел на поверхность пробок для жиромеров.
4.2.1.3. Устанавливают жиромеры пробкой вниз в водяную баню температурой (65 +/- 2) °C и выдерживают в течение 5 мин. При этом уровень воды в бане должен быть несколько выше уровня смеси в жиромере.
4.2.1.4. Вынув жиромеры из бани, их вставляют в стаканы центрифуги градуированной частью к центру. Жиромеры располагают симметрично один против другого. При нечетном числе жиромеров в центрифугу помещают жиромер, наполненный водой вместо молока, серной кислотой и изоамиловым спиртом в том же соотношении, что и для анализа.
Жиромеры центрифугируют в течение 5 мин. Каждый жиромер вынимают из центрифуги и движением резиновой пробки регулируют столбик жира так, чтобы он находился в градуированной части жиромера.
4.2.1.5. Жиромеры погружают пробками вниз в водяную баню температурой (65 +/- 2) °C и выдерживают в течение 5 мин.
4.2.1.6. Жиромеры вынимают по одному из водяной бани и быстро проводят отсчет жира. При отсчете жиромер держат вертикально, граница жира должна находиться на уровне глаз. Движением пробки устанавливают нижнюю границу столбика жира на нулевом или целом делении шкалы жиромера. От него отсчитывают число делений до нижней точки мениска столбика жира с точностью до наименьшего деления шкалы жиромера.
Граница раздела жира и кислоты должна быть резкой, а столбик жира прозрачным. При наличии «кольца» (пробки) буроватого или темно-желтого цвета, различных примесей в столбике жира и размытой нижней границы измерение проводят повторно.
4.2.1.7. При анализе проводят четырехкратное центрифугирование. Между каждым центрифугированием жиромеры нагревают в водяной бане при (65 +/- 2) °C в течение 5 мин.
При использовании центрифуги с подогревом жиромеров допускается проведение одного центрифугирования в течение 15 мин и последующего центрифугирования (для проверки полноты выделения жира) в течение 5 мин. После каждого центрифугирования жиромеры выдерживают в водяной бане при (65 +/- 2) °C в течение 5 мин.
4.2.2 Измерения массовой доли жира в твороге
Измерения массовой доли жира в твороге проводят в соответствии с 4.2.1.1 - 4.2.1.7, а также требованиями, указанными в таблице 1, и следующими дополнительными условиями:
последовательность операций при заполнении жиромера: поместить продукт, взвешенный с точностью отсчета показаний до 0,005 г, добавить дистиллированную воду, серную кислоту, изоамиловый спирт.
Серную кислоту в жиромер с водой добавляют осторожно, слегка наклонив жиромер.
При подогревании жиромеров с исследуемой смесью в водяной бане их часто встряхивают до полного растворения белка.
4.2.3 Измерения массовой доли жира в сухих молочных продуктах
4.2.3.1. В два стакана вместимостью 50 см3 помещают по 5 г сухого продукта, взвешенного с отсчетом показаний до 0,005 г, прибором для дозирования приливают по 10 см3 серной кислоты плотностью от 1550 до 1570 кг/м3, тщательно перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения продукта. Пробу готовят непосредственно перед проведением анализа.
Полученные пробы переливают через воронки из стаканов в жиромеры исполнения 1-40, помещенные в штатив. Затем берут 6 — 8 см3 серной кислоты той же плотности, с помощью прибора для дозирования ополаскивают стаканы и палочку и через воронку выливают кислоту в жиромеры, тщательно омывая остатки пробы со стенок.
Добавляют в жиромеры по 1 см3 изоамилового спирта и несколько капель дистиллированной воды так, чтобы объем жидкости в жиромере был на 5 — 6 мм ниже горловины. Далее поступают, как указано в 4.2.1.2 - 4.2.1.7 и таблице 1.
4.3 Обработка результатов
4.3.1 Массовую долю жира в процентах измеряют по шкале жиромера.
4.3.2. За результат измерения принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений, округленное до второго десятичного знака.
4.3.3 Метрологические характеристики кислотного метода определения массовой доли жира:
сходимость результатов измерений (допустимое расхождение между результатами двух параллельных измерений);
воспроизводимость результатов измерений (допустимое расхождение между результатами измерений, выполненных в разных лабораториях);
абсолютная погрешность измерений при вероятности P = 0,95 приведена в таблице 1.
5. ГРАВИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД (КОНТРОЛЬНЫЙ)
Сущность метода заключается в экстракции жира из аммиачно-спиртового раствора молочного продукта диэтиловым и петролейным эфирами, отделении растворителей выпариванием, измерении массы экстрагируемых веществ, растворенных в петролейном эфире, и расчете массовой доли жира.
Метод предназначен для определения жира в спорных случаях, для разработки ускоренных методов определения жира, для проведения государственных испытаний приборов.
5.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Весы лабораторные по ГОСТ 24104 2-го класса с наибольшим пределом взвешивания 200 г. Часы наручные механические по ГОСТ 10733 2-го класса точности, 4-й группы.
Пипетки по ГОСТ 29227, 2-1-2-2 или 2-2-2-2.
Цилиндр по ГОСТ 1770, 2-25-2, 4-25-2.
Термометры жидкостные по ГОСТ 28498 диапазоном измерения от 0 до 100 °C, ценой деления 1 °C.
Центрифуга, обеспечивающая фактор разделения K от 100 до 300 м/с2.
Фактор разделения K рассчитывают по формуле:
где n — частота вращения ротора центрифуги, c^{- 1} ;
D — диаметр окружности вращения середин стаканов, м.
Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры в диапазоне от 30 до 100 °C с погрешностью +/- 2 °C.
Эксикатор 1-230 по ГОСТ 25336, снабженный эффективным высушивающим веществом (например, свежевысушенным силикагелем с индикатором влажности — сернокислым кобальтом).
Испаритель ротационный, обеспечивающий поддержание температуры водяной бани от 30 до 100 °C с погрешностью +/- 2 °C, частотой вращения ротора не более 1c^{- 1} .
Экстрактор стеклянный вместимостью 100 см3, наружным диаметром от 25 до 40 мм и толщиной стенки не менее 2 мм в соответствии с рисунком 1.
Шкаф сушильный, обеспечивающий температуру сушки (100 +/- 3) °C.
Колбы для перегонки по ГОСТ 25336, К-1-250-29/32 ТС.
Стакан по ГОСТ 25336, В-1-250 ТС.
Аммиак по ГОСТ 3760, х.ч.; водный раствор массовой долей аммиака 25% (массовой концентрацией 910 г/см3).
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962 высшей очистки.
Эфир диэтиловый для наркоза [3] без примесей.
Эфир петролейный по нормативной документации с температурой кипения от 30 до 40 °C.
Калий йодистый по ГОСТ 4232, ч.д.а.; раствор массовой долей 10%.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Кобальт сернокислый по ГОСТ 4462, ч.д.а.
Растворитель смешанный, приготовленный непосредственно перед использованием смешиванием равных объемов диэтилового и петролейного эфиров.
Медь сернокислая по ГОСТ 4165, х.ч. или ч.д.а.
Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч. или ч.д.а.; раствор массовой долей 96%.
Вспомогательные средства для кипячения: обезжиренный непористый фарфор, карбид кремния или стеклянные шарики.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
5.2 Подготовка к проведению измерений
5.2.1 Очистка диэтилового эфира от перекисей
Для проверки наличия примесей (перекисей) в диэтиловом эфире в цилиндр с притертой пробкой, предварительно ополоснутый диэтиловым эфиром, вносят 1 см3 свежеприготовленного 10%-ного раствора йодистого калия и 10 см3 диэтилового эфира. Содержимое цилиндра встряхивают и выдерживают 1 мин. При наличии перекисей слой эфира желтеет.
Для очистки диэтилового эфира от перекисей и предотвращения их образования эфир обрабатывают минимум за 3 дня до использования. Для этого нарезают цинковую фольгу на ленты, по длине равные половине высоты бутыли, в которой находится эфир. Расход фольги составляет приблизительно 80 см2 на один кубический дециметр эфира.
Ленты из фольги погружают на 1 мин в раствор, содержащий 10 г сернокислой меди и 2 см3 96%-ной серной кислоты в 1 дм3 раствора. Затем ленты осторожно промывают водой. Влажные, покрытые медью ленты помещают в бутыль с эфиром на 3 дня.
5.3 Проведение измерений
5.3.1. Колбы для перегонки вместе с материалом, облегчающим кипение (стеклянные шарики или кусочки карборунда), высушивают в сушильном шкафу температурой (102 +/- 3) °C в течение 1 ч, охлаждают в эксикаторе до комнатной температуры и взвешивают с отсчетом показаний до 0,0001 г.
5.3.2. Масса пробы для анализа для продуктов массовой долей жира до 5% должна составлять 10 — 11 г. Массу пробы X в граммах продукта, содержащего более 5% жира, рассчитывают по формуле
где 50 — коэффициент, учитывающий наиболее полное выделение жира при данных условиях измерений, %/г;
X_{1} — массовая доля жира, установленная по разделу 4, %.
В экстрактор помещают пробу продукта, взвешенную с отсчетом показаний до 0,0001 г. К пробе творога добавляют 6 — 7 см3 дистиллированной воды, к пробе сухого продукта — 9 см3 дистиллированной воды. Экстрактор с пробой творога или сухого продукта помещают в водяную баню температурой (38 +/- 2) °C. Содержимое экстрактора периодически перемешивают вращательными движениями до получения однородного раствора.
5.3.3. В экстрактор с пробой продукта добавляют 2 см3 водного раствора аммиака массовой долей 25% и тщательно перемешивают. Приливают 10 см3 этилового спирта и осторожно смешивают жидкости, не закрывая экстрактор. Затем приливают 25 см3 диэтилового эфира, свободного от перекиси, закрывают экстрактор, энергично перемешивают содержимое в течение 1 мин и охлаждают в проточной воде. Дают стечь жидкости со стенок, располагая экстрактор вертикально. Осторожно открывают пробку, приливают 25 см3 петролейного эфира, ополаскивая первыми порциями пробку и горловину колбы. Закрывают экстрактор пробкой и в течение 30 с осторожно встряхивают.
Для ускорения разделения фаз применяют центрифугирование в течение 5 мин.
5.3.4. Осторожно вынимают пробку, ополаскивают ее и горловину экстрактора смешанным растворителем, сливая его внутрь экстрактора, и аккуратно через сифон сливают эфирный раствор в колбу для перегонки.
Для облегчения декантации и повышения уровня поверхности раздела между двумя слоями жидкости в экстрактор добавляют дистиллированную воду.
5.3.5. Проводят вторую и третью экстракции, как указано в 5.3.3 без добавления водного раствора аммиака, используя 1 см3 этилового спирта, 15 см3 диэтилового эфира и 15 см3 петролейного эфира; сливают прозрачный эфирный раствор в ту же колбу для перегонки, что и при первом экстрагировании.
5.3.6. Из колбы для перегонки тщательно удаляют выпариванием и перегонкой как можно больше растворителей. Эфиры отгоняют через холодильник при помощи ротационного испарителя, поместив колбу в водяную баню температурой (48 +/- 2) °C. Когда бурное кипение эфира прекратится, температуру воды в бане постепенно повышают до кипения для отгонки спирта.
5.3.7. После образования в колбе неподвижного стекловидного слоя ее помещают в сушильный шкаф температурой (100 +/- 3) °C на 2 ч, затем выдерживают в эксикаторе для охлаждения до комнатной температуры. Взвешивают колбу с отсчетом показаний до 0,0001 г. Проводят повторные высушивания колбы при тех же режимах в течение 30 — 60 мин и взвешивания до тех пор, пока разница между последовательными взвешиваниями будет не более 0,0005 г. Если при одном из взвешиваний после высушивания произойдет увеличение массы, то для расчета принимают результаты предыдущего взвешивания.
Разность между массами колб с жиром по 5.3.7 и без жира по 5.3.1, доведенными до постоянной массы, представляет массу экстрагированного жира.
5.3.8. Чтобы установить, что все экстрагированное вещество является жиром, в колбу для перегонки добавляют 25 см3 петролейного эфира, осторожно нагревают и взбалтывают до полного растворения экстрагированного вещества.
5.3.9. При неполном растворении экстрагированного вещества промывают осадок петролейным эфиром три раза. Далее поступают, как указано в 5.3.5 и 5.3.6.
5.3.10. Одновременно с измерением массовой доли жира в пробе проводят контрольный опыт с 10 см3 дистиллированной воды, используя те же реактивы, что и в 5.3.3 - 5.3.6. Изменение массы колбы не должно превышать 0,0005 г. При большем изменении массы колбы реактивы перегоняют.
5.4 Обработка результатов
5.4.1 Массовую долю жира в пробе X_{2},\% , рассчитывают по формуле
X_{2} = \frac{(m_{1} - m_{2}) - (m_{3} - m_{4})}{m} \cdot 100,(3)
где m_{1} — масса колбы с жиром, высушенным до постоянной массы, г;
m_{2} — масса колбы без жира, высушенного до постоянной массы, г;
m_{3} — масса колбы в контрольном опыте после его проведения, г;
m_{4} — масса колбы в контрольном опыте до его проведения, г;
5.4.2. За результат измерения принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений, округленное до второго десятичного знака.
5.4.3 Метрологические характеристики гравиметрического метода определения массовой доли жира:
сходимость результатов измерений (допустимое расхождение между результатами двух параллельных измерений);
воспроизводимость результатов измерений (допустимое расхождение между результатами измерений, выполненных в разных лабораториях);
абсолютная погрешность измерений при вероятности P = 0,95 приведена в таблице 2.
(справочное)
2. ТУ 38-105-1058-88 Пробки резиновые для жиромеров
3. Государственная фармакопея, глава IX «Эфир диэтиловый»
------------------------------------------------------------------