ГОСТ 29032-91. Государственный стандарт Союза ССР. Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения оксиметилфурфурола

(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 17.06.1991 № 882)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ГОСТ 29032-91"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-29032-91" "ГОСТ 29032-91. Государственный стандарт Союза ССР. Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения оксиметилфурфурола (утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта"
  n1["ГОСТ 29032-2022"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-29032-2022" "ГОСТ 29032-2022. Межгосударственный стандарт. Продукты переработки фруктов и овощей. Определение содержания 5-гидроксиметилфурфурола спектрофотометрическим методом (введен в действ"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 17 июня 1991 г. № 882

ГОСТ 29032-91

Группа Н59

ОКСТУ 9109

Дата введения 1 июля 1992 года

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. Разработан и внесен Всесоюзным научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности, Всесоюзным научно-исследовательским и конструкторско-технологическим институтом по переработке фруктов и винограда и ТК 93 «Продукты переработки плодов и овощей».

Разработчики: В.И. Рогачев, д-р техн. наук; С.Ю. Гельфанд, канд. техн. наук; Т.Н. Медведева, канд. техн. наук; А.И. Погосян, канд. техн. наук; Э.В. Дьяконова, канд. техн. наук; А.Э. Мельник; С.Р. Цимбалаев; Е.В. Йорга; канд. техн. наук; И.М. Соболева.

2. Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 17.06.91 № 882.

4. Раздел I настоящего стандарта «Фотометрический метод» подготовлен с учетом требований международного стандарта ИСО 7466-1986 «Продукты переработки плодов и овощей. Определение содержания 5-оксиметилфурфурола» с изменениями, отражающими потребности народного хозяйства.

5. Введен впервые.

6. Ссылочные нормативно-технические документы:

1.1 Сущность метода

Метод основан на измерении интенсивности окраски производного оксиметилфурфурола с n-толуидином и барбитуровой кислотой в водной вытяжке из пробы продукта. Нижний предел определения оксиметилфурфурола — 2 мг/кг.

Метод не распространяется на продукты переработки цитрусовых плодов.

1.2 Отбор и подготовка проб

Отбор проб — по ГОСТ 26313, подготовка их к испытаниям - ГОСТ 26671.

1.3 Аппаратура, материалы, реактивы

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания до 20 г не ниже 3-го класса точности.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания до 500 г 4-го класса точности.

Колориметр фотоэлектрический лабораторный по ГОСТ 12083 с пределами измерений оптической плотности от 0 до 2 и пределом допускаемой основной абсолютной погрешности при измерении коэффициента пропускания не более +/- 1%, со светофильтром с длиной волны (540 +/- 10) нм и кюветами рабочей длиной 30 мм.

Стаканы по ГОСТ 25336 исполнения 1 типа В вместимостью 50 и 150 см3.

Колба плоскодонная по ГОСТ 25336 исполнения 2 вместимостью 250 см3.

Воронка лабораторная по ГОСТ 25336 типа В диаметром 56 мм и высотой 80 мм.

Пипетка по ГОСТ 20292 исполнения 6 или 7 вместимостью 10 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292 исполнения 4 или 5 вместимостью 2 см3.

Колбы мерные по ГОСТ 1770 исполнения 2 вместимостью 50, 100 и 250 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770 вместимостью 25 или 50 см3.

Баня водяная.

Электроплитка по ГОСТ 14919.

Термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 27544 с пределом допускаемой погрешности +/- 1 °C в диапазоне измерений 0 — 100 °C.

Фильтры бумажные обеззоленные марки ФОМ по ГОСТ 12026-76.

Оксиметилфурфурол кристаллический, перекристаллизованный при температуре (115 +/- 3) °C и давлении 1,3 Па.

Калий железистосинеродистый 3-водный по ГОСТ 4207, х.ч., раствор концентрацией 150 г/дм3 (раствор Карреза I).

Цинк уксуснокислый 2-водный по ГОСТ 5823, ч.д.а., раствор концентрацией 300 г/дм3 (раствор Карреза II).

n-Толуидин по ТУ 6-09-66, ч.

Кислота барбитуровая по ТУ 6-09-512, ч.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.

Спирт изопропиловый (2-пропанол) по ГОСТ 9805, ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

1.4 Подготовка к испытанию

1.4.1 Приготовление основного раствора оксиметилфурфурола

0,1000 г кристаллического оксиметилфурфурола количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. 1 см3 полученного раствора переносят пипеткой в другую колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Получают раствор оксиметилфурфурола концентрацией 10 мкг/см3. Раствор хранят в холодильнике при температуре не выше 5 °C в сосуде с притертой пробкой, завернутой в алюминиевую фольгу, не более 2 мес.

1.4.2 Приготовление реактивов для проведения цветной реакции

Реактив 1. 10,00 г n-толуидина растворяют в 60 — 70 см3 изопропилового спирта при нагревании на водяной бане при температуре 45 — 50 °C, добавляют 10 см3 уксусной кислоты, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, охлаждают до 20 °C и доводят до метки изопропиловым спиртом.

Реактив 2. 0,50 г барбитуровой кислоты растворяют в 60 — 70 см3 дистиллированной воды при нагревании на водяной бане при температуре 45 — 50 °C, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, охлаждают до 20 °C и доводят до метки дистиллированной водой.

Реактивы 1 и 2 хранят в холодильнике при температуре не выше 5 °C в плотно закрытых сосудах, завернутых в алюминиевую фольгу. Срок годности реактивов 1 и 2 при этих условиях — 1 мес.

1.4.3 Построение градуировочного графика

1.4.3.1 Приготовление контрольного раствора

В стакан вместимостью 50 см3 вносят пипеткой 4,5 см3 дистиллированной воды и 7,5 см3 реактива 1, перемешивают.

1.4.3.2 Приготовление рабочих растворов

В 6 стаканов вместимостью 50 см3 вносят пипеткой 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 и 3,0 см3 основного раствора оксиметилфурфурола. Дистиллированной водой с помощью пипетки доводят объем содержимого до 3,0 см3. Масса оксиметилфурфурола в каждом растворе равна соответственно 5, 10, 15, 20, 25 и 30 мкг.

1.4.3.3 Проведение цветной реакции и фотометрирование

В стаканы с рабочими растворами добавляют по 7,5 см3 реактива 1, перемешивают. С содержимым каждого стакана поочередно проводят следующие операции. В стакан пипеткой вносят 1,5 см3 реактива 2, перемешивают, переносят в кювету фотоэлектроколориметра и наблюдают изменение оптической плотности в течение 3 — 4 мин от момента внесения реактива 2 при светофильтре с длиной волны, соответствующей максимуму пропускания, (540 +/- 10) нм против контрольного раствора. Отмечают максимальное значение оптической плотности.

1.4.3.4. По полученным данным строят график зависимости оптической плотности от количества оксиметилфурфурола в микрограммах.

1.5 Проведение испытания

1.5.1 Приготовление водной вытяжки из образца

Навеску продукта массой 40,0 — 60,0 г (в зависимости от предполагаемого содержания оксиметилфурфурола) помещают в стакан вместимостью 150 см3, смешивают с небольшим количеством дистиллированной воды и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3. Цилиндром добавляют 15 см3 раствора Карреза I и 15 см3 раствора Карреза III. Содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают и фильтруют в плоскодонную колбу через бумажный складчатый фильтр.

1.5.2 Проведение цветной реакции и фотометрирование

В два стакана вместимостью 50 см3 вносят пипеткой 3 см3 водной вытяжки из образца и 7,5 см3 реактива 1, перемешивают. В один из стаканов добавляют 1,5 см3 дистиллированной воды, перемешивают, переносят в кювету фотоэлектроколориметра (контрольный раствор). В другой стакан добавляют 1,5 см3 реактива 2, перемешивают, переносят в кювету фотоэлектроколориметра и наблюдают изменение оптической плотности в течение 3 — 4 мин от момента внесения реактива 2 при светофильтре с длиной волны, соответствующей максимуму пропускания, (540 +/- 10) нм против контрольного раствора. Отмечают максимальное значение оптической плотности.

1.6 Обработка результатов

Массовую долю оксиметилфурфурола (X), \text{мин}^{- 1} (мг/кг), вычисляют по формуле

X = \frac{m_{1} \cdot V_{0}}{V_{1} \cdot m_{0}} ,

где m_{1} — масса оксиметилфурфурола в испытуемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг;

V_{0} — объем водной вытяжки из пробы продукта, см3;

V_{1} — объем вытяжки, используемой для проведения цветной реакции, см3;

m_{0} — масса навески продукта, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемое относительное расхождение между которыми не должно превышать 5% (P = 0,95).

2. МЕТОД ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

2.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции оксиметилфурфурола из продукта органическим растворителем и определении оксиметилфурфурола с помощью метода тонкослойной хроматографии. Нижний предел определения оксиметилфурфурола — 8 мг/кг.

Метод распространяется на продукты переработки цитрусовых плодов.

2.2 Отбор и подготовка проб

Отбор проб и подготовка их к испытаниям — по п. 1.2.

2.3 Аппаратура, материалы, реактивы

При проведении испытания используют аппаратуру, материалы и реактивы, указанные в п. 1.3, за исключением фотоэлектроколориметра, n-толуидина, барбитуровой и уксусной кислот, со следующими дополнениями:

микрошприц МШ-10 вместимостью 0,01 см3;

камеру для тонкослойной хроматографии с притертой крышкой;

колбу круглодонную по ГОСТ 25336 исполнения 2 с взаимозаменяемым конусом 14/23 вместимостью 50 см3;

распылитель стеклянный с грушей;

вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;

пластинки для тонкослойной хроматографии «Силуфол» 15 x 15 см фирмы Кавалиер, ЧССР;

эфир этиловый технический по ГОСТ 6265, не содержащий перекисей;

эфир этиловый уксусной кислоты по ГОСТ 22300, ч.д.а. (этилацетат);

кислоту муравьиную по ГОСТ 5848;

бензидин, раствор в муравьиной кислоте концентрацией 5 г/дм3;

натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч., прокаленный.

2.4 Подготовка к испытанию

2.4.1 Приготовление основного раствора оксиметилфурфурола

0,1000 г кристаллического оксиметилфурфурола количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки этилацетатом и тщательно перемешивают. 1 см3 полученного раствора переносят пипеткой в другую мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки этилацетатом и тщательно перемешивают. Получают раствор оксиметилфурфурола концентрацией 10 мкг/см3. Раствор хранят в холодильнике при температуре не выше 5 °C в сосуде с притертой пробкой, плотно завернутой в алюминиевую фольгу, не более 6 мес.

2.5 Проведение испытания

2.5.1 Приготовление водной вытяжки из образца

Водную вытяжку из образца готовят по п. 1.5.1.

2.5.2 Экстрагирование оксиметилфурфурола из водной вытяжки

В стакан вместимостью 50 см3 пипетками вносят 1,0 см3 водной вытяжки из образца и 10,0 см3 этилового эфира. Содержимое перемешивают в течение 1 мин, затем в стакан добавляют около 5 г сернокислого натрия. Содержимое стакана перемешивают стеклянной палочкой, разрушая крупные комки соли. Смеси дают отстояться, после чего эфир декантируют через ватный тампон в круглодонную колбу. Остаток в стакане промывают еще два раза свежими порциями эфира, каждый раз тщательно перемешивая содержимое стакана. Эфирный экстракт упаривают досуха на водяной бане при температуре 35 — 40 °C. Остаток в круглодонной колбе перерастворяют в 0,5 см3 этилацетата.

2.5.3 Хроматографическое разделение

На пластинку «Силуфол» снизу и сверху наносят две тонкие карандашные линии на расстоянии 2 см от краев. На нижней линии отмечают 12 точек на расстоянии 8 — 10 мм друг от друга, при этом расстояние от крайних точек до краев пластины должно быть не менее 1 см. В шесть точек микрошприцем наносят различные объемы основного раствора оксиметилфурфурола, чередуя пятна со свободными точками. Количество оксиметилфурфурола в пятнах должно быть от 0,025 до 0,150 мкг. В оставшиеся точки микрошприцем наносят этилацетатные экстракты из исследуемых образцов (от одного до шести), объемом 0,001 — 0,020 см3 в зависимости от ожидаемого содержания оксиметилфурфурола. Пластинку стартовой линией вниз помещают в камеру для тонкослойной хроматографии, предварительно заполненную этилацетатом на высоту около 1 см. Развитие хроматограммы проводят до достижения фронтом растворителя верхней карандашной линии. Пластинку извлекают из камеры и сушат в вытяжном шкафу до исчезновения запаха растворителя.

2.5.4 Обнаружение оксиметилфурфурола

Пластинку опрыскивают из распылителя раствором бензидина, затем сушат в вытяжном шкафу в течение 5 — 10 мин. Оксиметилфурфурол обнаруживают в виде желтых пятен. Обнаружение на пластинке пятна, соответствующего по цвету и хроматографической подвижности пятнам основного раствора оксиметилфурфурола, свидетельствует о наличии оксиметилфурфурола в продукте. Количество оксиметилфурфурола определяют, сравнивая размер и интенсивность окраски пятен основного раствора оксиметилфурфурола и пятна оксиметилфурфурола в анализируемой пробе.

2.6 Обработка результатов

Массовую долю оксиметилфурфурола (X), \text{мин}^{- 1} (мг/кг), вычисляют по формуле

X = \frac{m_{1} \cdot V_{1} \cdot V_{3}}{m \cdot V_{2} \cdot V_{4}} ,