ФС.3.4.0028.22. Фармакопейная статья. Золототысячника трава + Любистока лекарственного корневища и корни + Розмарина обыкновенного листья экстракт жидкий, раствор для приема внутрь
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Настоящая фармакопейная статья распространяется на Золототысячника травы + Любистока лекарственного корневища и корни + Розмарина обыкновенного листья экстракт жидкий, раствор для приема внутрь. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Растворы» и нижеприведенным требованиям.
Содержит не менее 50% и не более 150% суммы полифенолов в пересчете на пирогаллол от заявленного количества.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Растворы».
При хранении допускается выпадение осадка.
1. Определение фенольных соединений
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.
Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат — уксусная кислота — вода (69:16:16).
Раствор стандартного образца рутина. 0,01 г стандартного образца (СО) рутина растворяют в 10 мл метанола и перемешивают.
Срок годности раствора не более 5 сут, в защищенном от света месте.
Испытуемый раствор. 5,0 мл препарата помещают в круглодонную колбу вместимостью 10 мл, упаривают на роторном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл спирта 60% и фильтруют во флакон из темного стекла через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в этаноле.
На линию старта ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254 в виде полос длиной 15 мм и шириной 2 мм наносят 5 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение не менее 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 110 — 115 °C в течение 7 мин и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета над линией старта, выше нее зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета, над ней зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО рутина, чуть выше зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.
Раствор стандартного образца розмаринового лекарственного листья масла эфирного. 0,1 г стандартного образца (СО) розмарина лекарственного листьев масла эфирного помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл метанола, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. 1,0 мл полученного раствора фильтруют во флакон темного стекла.
Срок годности раствора не более 5 сут, в защищенном от света месте, при температуре 5 °C.
Испытуемый раствор. 100,0 мл препарата смешивают с 5 мл натрия хлорида насыщенного раствора в делительной воронке вместимостью 250 мл и встряхивают с 50 мл n-пентана. После разделения слоев пентановую фазу фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 3 г натрия сульфата безводного, в круглодонную колбу и упаривают на роторном испарителе на водяной бане при температуре около 25 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл n-гептана и фильтруют во флакон из темного стекла через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
На линию старта ТСХ пластинки со слоем силикагеля F254 в виде полос длиной 15 мм и шириной 2 мм наносят 15 мкл испытуемого раствора и раствора СО розмарина лекарственного листьев масла эфирного. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную смесью растворителей толуол-этилацетат (95:5) в течение не менее 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме испытуемого раствора в средней части пластинки должны обнаруживаться две зоны адсорбции с флуоресценцией светло-синего или голубого цвета, верхняя из которых более интенсивная.
Затем пластинку обрабатывают анисового альдегида раствором уксуснокислым в этаноле, выдерживают при температуре 110 — 115 °C в течение 7 мин и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора СО розмарина лекарственного листья масла эфирного должны обнаруживаться: две зоны адсорбции красновато-коричневого цвета в нижней трети пластинки; зона адсорбции красновато-коричневого цвета в средней трети пластинки, и над ней зона адсорбции коричневого или желто-коричневого цвета; зона адсорбции красновато-коричневого цвета в верхней трети пластинки.
На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции красновато-коричневого цвета в нижней трети пластинки, над ней две зоны адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зон адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного; зона адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного в средней трети пластинки; над ней зона адсорбции коричневого или желто-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного; зона адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного в верхней трети пластинки; допускается обнаружение других зон адсорбции.
pH. От 4,8 до 5,8. В соответствии с требованиями ОФС «Ионометрия», метод 3.
Показатель преломления. От 1,343 до 1,345. В соответствии с требованиями ОФС «Рефрактометрия».
Спирт этиловый. От 16,0 до 19,5%. В соответствии с требованиями ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» (метод газовой хроматографии).
Сухой остаток. Не менее 0,5% и не более 0,7%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».
Извлекаемый объем. Не менее номинального. Препарат должен выдерживать требования ОФС «Извлекаемый объем».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Натрия карбоната раствор 29%. 29,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100,0 мл.
Раствор стандартного образца пирогаллола. 0,05 г (точная навеска) стандартного образца (СО) пирогаллола помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 100 мл, прибавляют 70 мл воды, помещают на ультразвуковую баню на 2 мин, охлаждают, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 25 мл, прибавляют 1,0 мл реактива Фолина-Чокальтеу, 10,0 мл воды, доводят объем раствора натрия карбоната раствором 29% до метки и перемешивают.
Испытуемый раствор. Около 6,0 г (точная навеска) препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, перемешивают с 30 мл воды, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1,0 мл реактива Фолина-Чокальтеу, 10,0 мл воды, доводят объем раствора натрия карбоната раствором 29% до метки и перемешивают.
Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО пирогаллола в аналогичных условиях.
Содержание суммы полифенолов в пересчете на пирогаллол в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot 2 \cdot 50 \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 100 \cdot 100 \cdot 2 \cdot 25 \cdot 100 \cdot L} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot P}{A_{0} \cdot a \cdot 40 \cdot L} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора СО пирогаллола;
A0 — навеска СО пирогаллола, мг;
P — содержание основного вещества в СО пирогаллола, %;
L — заявленное количество суммы полифенолов в пересчете на пирогаллол в препарате, мг.
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».