ФС.3.4.0009.18. Фармакопейная статья. Элеутерококка колючего корневищ и корней экстракт жидкий

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Элеутерококка колючего корневищ и корней экстракт жидкий	ФС.3.4.0009.18
Eleutherococci senticosi rhizomatiim et radicum extractum liquidum	Взамен ФС 42-2833-92

Элеутерококка корневищ и корней экстракт жидкий, получаемый из корневищ и корней дикорастущего кустарника элеутерококка колючего — Eleutherococcus senticosus (Rupr. et Maxim.) Maxim., сем. аралиевых — Araliaceae, применяемый в качестве лекарственного препарата.

Для получения препарата необходимо:

Элеутерококка колючего корневищ и корней	- 1000 г;
Этанола (спирта этилового) 40%	- достаточное количество для получения 1000 мл.

Описание. Жидкость от светло-коричневого до темно-коричневого цвета в тонком слое прозрачная, с характерным запахом. В процессе хранения возможно образование легкой опалесценции и осадка.

Подлинность. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученного при количественном определении (см. раздел «Количественное определение. Элеутерозид B»), должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора СО элеутерозида B.

Ультрафиолетовый спектр раствора Б, полученного при количественном определении (см. раздел «Количественное определение. Сумма элеутерозидов в пересчете на элеутерозид B»), в области от 250 нм до 350 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны (278 +/- 3) нм.

10 мл препарата выпаривают в фарфоровой чашке на водяной бане до консистенции сиропа. Остаток растворяют в 5 мл спирта 96% и фильтруют. К 2 каплям фильтрата прибавляют 2 капли железа (III) хлорида раствора 3%; должно наблюдаться окрашивание зеленого цвета (полифенольные соединения).

Спирт этиловый. Не менее 33,0%. В соответствии с требованиями ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола».

---

<> Контролируется в течение технологического процесса.*

Тяжелые металлы. Не более 0,01%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

Сухой остаток. Не менее 1%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

Объем содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Элеутерозид B. Содержание элеутерозида B в препарате должно быть не менее 0,015%.

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) элеутерозида B. Около 0,005 г (точная навеска) СО элеутерозида B помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 20 мл этанола 30%, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А).

Срок годности раствора А 1 мес при хранении в плотно укупоренной таре в прохладном, защищенном от света месте.

4 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 30% до метки и перемешивают (раствор Б).

Раствор Б используют свежеприготовленным.

Проверка пригодности хроматографической системы.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- фактор асимметрии пика элеутерозида B должен находиться в пределах от 0,8 до 1,5;

- эффективность хроматографической колонки должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.

5,0 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 40% до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм (испытуемый раствор).

Условия хроматографирования

Колонка	нержавеющая сталь, 150 x 4,6 мм, октадецилсилилсиликагель (C18) для хроматографии (5 мкм)
Подвижная фаза	ацетонитрил:уксусной кислоты раствор 0,5% (1:9)
Способ элюирования:	изократический
Температура колонки, °C	комнатная
Скорость потока, мл/мин	1
Детектор	УФ-спектрофотометрический или диодная матрица
Длина волны, нм	266
Объем вводимой пробы, мкл	20
Время хроматографирования, мин	15

Хроматографируют попеременно раствор СО элеутерозида B (не менее 5 повторностей) и испытуемый раствор (не менее 3 повторностей). Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Расчет содержания элеутерозида B проводят методом внешнего стандарта.

Содержание элеутерозида B в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S \cdot 25 \cdot a_{0} \cdot 4 \cdot P}{S_{0} \cdot 5 \cdot 25 \cdot 25} = \frac{S \cdot 0,032 \cdot a_{0} \cdot P}{S_{0}} ,

где S — площадь пика элеутерозида B на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика элеутерозида B на хроматограмме раствора СО элеутерозида B;

a — объем препарата, мл;

a0 — навеска СО элеутерозида B, г;

P — содержание основного вещества в СО элеутерозида B, %.

Сумма элеутерозидов в пересчете на элеутерозид B. Содержание суммы элеутерозидов в пересчете на элеутерозид B в препарате должно быть не менее 0,12%.

5,0 мл препарата помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляют 5 мл воды и 20 мл смеси хлороформ — спирт 96% (5:1). Извлечение проводят в течение 5 мин, после разделения слоев нижний слой фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного. Извлечение элеутерозидов повторяют еще 4 раза последовательно используя 15, 15, 10 и 10 мл смеси хлороформ — спирт 96% (5:1). Каждое извлечение фильтруют через бумажный фильтр, содержащий натрия сульфат безводный, присоединяя к предыдущим извлечениям.

Объединенное извлечение пропускают по 5 мл со скоростью 2 мл/мин через хроматографическую стеклянную колонку длиной около 25 см и диаметром 10 — 12 мм. В нижнюю часть колонки помещают небольшой ватный тампон, далее загружают 1 г сорбента (высота слоя около 2 см) алюминия оксид нейтральный II степени активности (L 40/250 мкм). Сверху на слой сорбента также помещают небольшой ватный тампон.

Элюат с колонки собирают в мерную колбу вместимостью 100 мл и колонку промывают дополнительным количеством смеси хлороформ — спирт 96% (5:1) до доведения объема раствора в колбе до метки (раствора А).

10,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора смесью хлороформ — спирт 96% (5:1) до метки и перемешивают (испытуемый раствор Б).

Оптическую плотность испытуемого раствора Б измеряют на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 278 нм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют смесь хлороформ — спирт 96% (5:1).

Содержание суммы элеутерозидов в пересчете на элеутерозид B в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot 100 \cdot 50 \cdot 1,42}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot 5 \cdot 10} = \frac{\text{А} \cdot 142}{A_{1\text{см}}^{1\%}} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора Б;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения элеутерозида B при 278 нм, равный 302;

1,42 — коэффициент пересчета на сумму элеутерозидов;

10, 50, 100 — разведения, мл;

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

---