ФС.3.4.0008.18. Фармакопейная статья. Родиолы розовой корневищ и корней экстракт жидкий
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 15.03.2019. Взамен ФС 42-2163-96.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Родиолы розовой корневищ и корней экстракт жидкий | ФС.3.4.0008.18 |
|---|---|
| Rhodiolae roseae rhizomatum et radicum extractum liquidum | Взамен ФС 42-2163-96 |
Родиолы экстракт жидкий, получаемый из корневищ и корней многолетнего дикорастущего или культивируемого травянистого растения родиолы розовой — Rhodiola rosea L., сем. толстянковых — Crassulaceae, применяемый в качестве лекарственного препарата.
Для получения препарата необходимо:
| родиолы розовой корневищ и корней | - 1000 г; |
|---|---|
| этанола (спирта этилового) 40% | - достаточное количество для получения 1000 мл. |
Описание. Жидкость от светло-коричневого до темно-коричневого цвета с красноватым оттенком с характерным запахом. В процессе хранения возможно образование осадка.
Раствор стандартного образца (СО) розавина. 4,0 мг СО розавина растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в хорошо укупоренной упаковке в прохладном, защищенном от света месте.
Раствор для детектирования. Смешивают последовательно: 0,5 мл анисового альдегида, 10 мл уксусной кислоты ледяной, 85 мл спирта 96% и 5 мл серной кислоты концентрированной. Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в хорошо укупоренной упаковке в прохладном, защищенном от света месте.
К 1 мл препарата прибавляют 9 мл спирта 40% и перемешивают (испытуемый раствор).
На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят в виде полосы длиной 10 мм и шириной не более 2 мм по 40 мкл (0,04 мл) испытуемого раствора и раствора СО розавина. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре в течение 15 мин, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 3 ч смесью растворителей хлороформ — метанол — вода (26:14:3), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ — свете (254 нм).
На хроматограмме раствора СО розавина должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции СО розавина; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.
Хроматограмму опрыскивают раствором для детектирования, выдерживают при температуре 100 — 105 °C в течение 2 — 3 мин и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора СО розавина должна обнаруживаться зона адсорбции коричневато-зеленого цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции коричневато-зеленого на уровне зоны адсорбции СО розавина; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Времена удерживания основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора, приготовленного для количественного определения, должны соответствовать временам удерживания основных пиков на хроматограммах раствора СО розавина и раствора СО салидрозида.
Спирт этиловый. Не менее 34,0%. В соответствии с требованиями ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».
<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола».
<*> Контролируется в течение технологического процесса.
Тяжелые металлы. Не более 0,01%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».
Сухой остаток. Не менее 5,0%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».
Объем содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Гликозиды коричного спирта. Салидрозид. Содержание суммы гликозидов коричного спирта в пересчете на розавин — не менее 0,1%, салидрозида — от 0,5% до 0,8%.
Раствор стандартного образца (СО) розавина. Около 0,010 г (точная навеска) СО розавина растворяют в метаноле в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают (раствор А СО розавина).
10,0 мл раствора А СО розавина переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают (раствор Б СО розавина). Срок годности не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.
Раствор стандартного образца (СО) салидрозида. Около 0,010 г (точная навеска) СО салидрозида растворяют в метаноле в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают (раствор А СО салидрозида).
10,0 мл раствора А СО салидрозида переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают (раствор Б СО салидрозида). Срок годности не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.
Испытуемый раствор: предварительно профильтрованный через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,2 мкм) препарат.
Приготовление фосфатного буфера (pH 7,0).
1. 8,0 г натрия гидроксида растворяют в около 500 мл воды в мерной колбе вместимостью 1000 мл, полученный раствор доводят водой до метки и перемешивают (раствор натрия гидроксида 0,2 М).
Срок годности раствора 6 мес при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте.
2. 6,8 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 500 мл воды в мерной колбе вместимостью 2000 мл, затем добавляют 130 мл раствора натрия гидроксида 0,2 М, добавляют еще 800 мл воды и перемешивают. Значение pH определяют потенциометрически. При необходимости добавляют раствор натрия гидроксида 0,2 М и доводят объем раствора водой до метки.
Приготовленный раствор фильтруют под вакуумом через нейлоновый мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм.
Срок годности раствора 1 сутки.
Проверка пригодности хроматографической системы.
Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:
- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пикам СО салидрозида и СО розавина должна быть не менее 2000 и не менее 5000 теоретических тарелок соответственно;
- фактор асимметрии (T) для пиков салидрозида и розавина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.
| Время | A, об. % | B, об. % |
|---|---|---|
| 0 | 89 | 11 |
| 10 | 89 | 11 |
| 30 | 70 | 30 |
| 35 | 20 | 80 |
| 45 | 20 | 80 |
| 50 | 89 | 11 |
| 70 | 89 | 11 |
На хроматограмме испытуемого раствора (длина волны УФ-детектора 250 нм) в области пика, соответствующего по времени удерживания СО розавина, выходят не менее 3 пиков других гликозидов коричного спирта, из которых 1 слева и 2 справа от пика розавина.
Хроматографируют последовательно не менее 5 раз растворы СО салидрозида (раствор Б СО салидрозида) и СО розавина (раствор Б СО розавина) и вычисляют среднее значение площади пика для каждого СО.
Испытуемый раствор хроматографируют не менее 3 раз.
Содержание гликозидов коричного спирта в пересчете на розавин в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 10 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot 25 \cdot 25 \cdot V} = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 1,6 \cdot P}{S_{0} \cdot V} ,
где S — площадь пиков гликозидов коричного спирта на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь основного пика на хроматограмме раствора Б СО розавина;
P — содержание основного вещества в СО розавина, %;
Содержание салидрозида в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 10 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot 50 \cdot 25 \cdot V} = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 0,8 \cdot P}{S_{0} \cdot V} ,
где S — площадь пика салидрозида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика на хроматограмме раствора Б СО салидрозида;
a0 — навеска СО салидрозида, г;
P — содержание основного вещества в СО салидрозида, %;
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».