ФС.3.3.1.0053.18. Фармакопейная статья. Вакцина БЦЖ для иммунотерапии рака мочевого пузыря живая

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Вакцина БЦЖ для иммунотерапии рака мочевого пузыря живая	ФС.3.3.1.0053.18
	Взамен ВФС 42-3001-97

Настоящая фармакопейная статья распространяется на вакцину БЦЖ для иммунотерапии рака мочевого пузыря, живую. Препарат представляет собой микобактерии вакцинного штамма Mycobacterium bovis, субштамм BCG-1 (Russia), лиофилизированные в 1,5% растворе стабилизатора — натрия глутамата моногидрат.

Вакцина являясь неспецифическим иммуномодулятором БЦЖ, местно повышает активность макрофагов, продукцию цитокинов, включая интерлейкин-1 (ИЛ-1), интерлейкин-2 (ИЛ-2), интерлейкин-6 (ИЛ-6), интерферон-гамма и фактор некроза опухоли — альфа. Повышение продукции цитокинов стимулирует активность естественных киллеров. Вызванный БЦЖ иммунный ответ с активацией T-лимфоцитов оказывает противоопухолевое действие.

Препарат предназначен для иммунотерапии поверхностного (Ta, T1, Tis) рака мочевого пузыря или профилактики его рецидивов после трансуретрального удаления опухолей.

ПРОИЗВОДСТВО

Технологический процесс производства должен обеспечивать стабильное получение вакцины. Все этапы производства препарата должны осуществляться с соблюдением установленных требований организации производства и контроля качества лекарственного препарата, гарантирующих качество и безопасность для человека. Работа должна проводиться в помещениях, оборудованных автономной приточно-вытяжной вентиляцией. Питательные среды перед посевом микобактерий должны быть проверены на стерильность в соответствии с ОФС «Стерильность».

На всех стадиях производства и хранения вакцины следует обеспечивать защиту от прямого воздействия света и ультрафиолетового излучения.

Производство вакцины основано на системе посевного материала. Посевной материал (серия) — лиофилизат субштамма M. bovis BCG-1 (Russia) из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов. Очередная посевная серия вакцинного штамма БЦЖ-1 должна быть изготовлена из наиболее ранней серии (первичной или вторичной посевной серии). Информация о происхождении и последующих действиях со штаммом содержится в архивных данных, которые используют для идентификации штамма посевного материала. Посевной материал (серия) должен быть идентифицирован как M. bovis, субштамм BCG-1 (Russia) микробиологическими методами и подходящим молекулярно-биологическим методом, указанным в нормативной документации.

Посевную серию готовят в объеме, обеспечивающем производство вакцины в течение не менее 10 лет, и хранят при температуре не выше минус 18 °C. Общее число пассажей для приготовления посевной и коммерческой серии не должно превышать 12.

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Порошкообразная пористая масса или в виде таблетки светло-желтого цвета, гигроскопична.

Восстановленная вакцина должна иметь вид густой грубодисперсной суспензии белого с сероватым или желтым оттенком цвета без посторонних включений. Определение проводят визуально.

Подлинность. При микроскопии мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену, должны определяться окрашенные в красный цвет (кислотоустойчивые) тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки длиной 1 — 4 мкм и шириной 0,3 — 0,5 мкм, часто с небольшими вздутиями на концах, не образующие спор и капсул.

При посеве вакцины на плотную среду Левенштейна-Йенсена через 28 — 30 сут инкубации при температуре (37 +/- 1) °C на поверхности среды должны вырастать характерные шероховатые плотные колонии от 0,5 до 8,0 мм в диаметре желтоватого цвета с тонкими неровными краями.

Время восстановления препарата. Не более 5 мин. При добавлении в ампулу (флакон) 0,9% раствора натрия хлорида для инъекций и экспозиции в течение 3 — 5 мин с последующим 2 — 4-кратным перемешиванием должна образоваться грубодисперсная гомогенная суспензии светло желтого цвета. Допускается наличие хлопьев, которые должны разбиваться с помощью шприца или пипетки. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты».

Проходимость через иглу. Суспензия должна свободно проходить в шприц через иглу 0,8·40, если не указано иначе в фармакопейной статье или нормативной документации. Определение проводят в соответствии с ОФС «Суспензии».

Общее содержание бактерий. Показатель оптической плотности, восстановленной вакцины до содержания 1 мг/мл микробных клеток БЦЖ должен быть в пределах от 0,30 до 0,40. Испытания проводят фотометрическим методом при длине волны (490 +/- 3,0) нм в кювете с толщиной слоя 5 мм. В качестве контрольной пробы используют 0,9% раствор натрия хлорида. Проводят испытания не менее 5 образцов параллельно со стандартным образцом (СО) вакцины БЦЖ по методике, изложенной в нормативной документации.

Дисперсность. Показатель дисперсности должен быть не ниже 1,2. Определение проводят фотометрическим методом (одновременно с определением общего содержания бактерий) по методике, изложенной в нормативной документации. Если по результатам анализа не более чем в 1 образце показатель дисперсности ниже 1,2, испытание проводят на 5 дополнительных образцах. При повторном испытании не допускается наличие образцов с показателем дисперсности ниже 1,2.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Не более 5,0%. Испытание проводят гравиметрическим методом в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или методом титрования с реактивом К. Фишера в соответствии с ОФС «Определение воды».

Отсутствие посторонней микрофлоры. Посторонняя микрофлора (бактерии, грибы) должна отсутствовать за исключением микобактерий БЦЖ. Определение проводят методом прямого посева в соответствии с ОФС «Стерильность».

Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность».

Специфическая безопасность. Вирулентные микобактерии должны отсутствовать. Испытание проводят на морских свинках одного пола массой от 250 до 350 г, не получающих какое-либо лечение или диету с антибиотиками, способную повлиять на результаты теста (вводимая тест-доза 5 мг вакцины в 1 мл растворителя. Тест проводят на 2 морских свинках в течение 12 недель или на 6 морских свинках в течение 6 недель:

• двум морским свинкам вводят вакцину под кожу внутренней поверхности правого бедра (животные должны оставаться здоровыми);
• шести морским свинкам вводят вакцину подкожно или внутримышечно (при гибели до окончания срока наблюдения одной морской свинки, если у нее нет признаков туберкулезной инфекции, испытания повторяют).

По истечении срока наблюдения животных умерщвляют. При макроскопическом и, при необходимости, микроскопическом исследовании внутренних органов животных не должно быть признаков туберкулезной инфекции. При обнаружении признаков туберкулеза серию бракуют, выпуск последующих серий вакцины прекращают, а все имеющиеся запасы вакцины хранят до выявления причин случившегося.

Животных, павших до окончания срока наблюдения вскрывают и исследуют, как описано выше. При гибели одной морской свинки без признаков туберкулезной инфекции тест считается завершенным, а препарат — специфически безопасным. При гибели двух животных испытания повторяют.

Специфическая безопасность может быть дополнительно подтверждена путем анализа вакцины БЦЖ молекулярно-биологическим методом, например, с помощью зарегистрированного в РФ набора полимеразной цепной реакции, дифференцирующей M. bovis BCG от других представителей M. tuberculosis complex. ДНК других микобактерий кроме M. bovis BCG должны отсутствовать. При удовлетворительном результате дополнительного исследования длительность теста «Специфическая безопасность», проводимого на 2 морских свинках, может быть сокращена до 6 недель.

Специфическая активность. Должно быть от 8 до 15 млн жизнеспособных единиц в 1 мг бактериальной массы. Оценивают по показателю жизнеспособности — числу жизнеспособных клеток БЦЖ в 1 мг вакцины. Применяют метод посева вакцины на плотную питательную среду Левенштейн-Йенсена. Посев проводят параллельно с СО или референс-препаратом вакцины туберкулезной БЦЖ.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств» и ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты».

Транспортирование и хранение. В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств», «Хранение лекарственных средств», «Иммунобиологические лекарственные препараты», при температуре от 2 до 8 °C в защищенном от света месте.

---