ФС.2.4.0004.18. Фармакопейная статья. Красавки листьев экстракт густой

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Красавки листьев экстракт густой	ФС.2.4.0004.18
Belladonnae folii extractum spissum	Взамен ГФ X, ст. 255

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Красавки экстракт густой, получаемый из листьев или травы красавки белладонны — Atropa belladonna L. сем. пасленовых — Solanaceae экстракцией спиртом 20% при соотношении сырье:экстракт густой (4:1), применяемый для производства лекарственных препаратов.

Описание. Густая масса темно-коричневого цвета характерного запаха.

Подлинность.

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. 0,01 г СО атропина сульфата растворяют в 10 мл спирта 70% и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.

Тонкослойная хроматография

В колбу с притертой пробкой вместимостью 25 мл помещают 0,2 г экстракта и растворяют в 0,5 мл воды при перемешивании. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл аммиака раствора концентрированного 25%, 5 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин, затем добавляют 2 г натрия сульфата безводного и снова взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через вату (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полосы длиной 20 мм и шириной не более 2 мм 100 мкл (0,1 мл) испытуемого раствора, рядом наносят 50 мкл (0,05 мл) раствора СО атропина сульфата. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей метанол — хлороформ — аммиака раствор концентрированный 25% (20:10:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом Драгендорфа, просматривают при дневном свете и фиксируют результаты разделения в течение не более 10 мин.

На хроматограмме раствора СО атропина сульфата должна обнаруживаться зона адсорбции красновато-оранжевого цвета на желтом фоне.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться доминирующая зона адсорбции красновато-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции СО атропина сульфата, допускается обнаружение других зон адсорбции красно-оранжевого цвета.

Качественные реакции

1. К 0,02 г экстракта прибавляют 5 мл хлороформа, 2 капли воды, 1 каплю аммиака раствора концентрированного 25% и взбалтывают; в УФ-свете (365 нм) должна наблюдаться флуоресценция голубого цвета (отличие от белены экстракта).

2. 0,1 г экстракта помещают в делительную воронку, приливают 5 мл воды, добавляют 0,5 мл аммиака раствора 25%, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного в фарфоровую чашку. Хлороформ выпаривают на водяной бане досуха. К сухому остатку прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. После охлаждения к сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона и 4 каплями 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового; должно наблюдаться быстро исчезающее фиолетовое окрашивание (алкалоиды группы тропана).

Потеря в массе при высушивании. Не менее 25%. В соответствии с требованиями ОФС «Потеря в массе при высушивании».

Тяжелые металлы. Не более 0,01%. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин должно быть от 1,4 до 1,6%.

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. Около 0,1160 г (точная навеска) СО атропина сульфата, предварительно высушенного при температуре 135 °C до постоянной массы, количественно переносят 10 мл воды в делительную воронку, прибавляют 0,5 мл аммиака концентрированного раствора и извлекают последовательно 20 мл; 15 мл; 15 мл хлороформа при взбалтывании в течение 3 мин. Хлороформные извлечения фильтруют через фильтр с 2 г натрия сульфата безводного, смоченного 5 мл хлороформа, в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор А).

Срок годности раствора 6 месяцев.

10 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор Б). 1 мл раствора содержит 0,0001 г атропина основания.

Срок годности раствора 1 месяц.

3 мл раствора Б стандартного образца атропина помещают в делительную воронку, прибавляют 7 мл хлороформа, 0,5 мл раствора бромтимолового синего, 10 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5 и далее проводят определение аналогично определению испытуемого раствора.

Раствор бромтимолового синего. 0,15 г бромтимолового синего и 0,15 г натрия карбоната безводного растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки и перемешивают.

Срок годности раствора 1 месяц.

Раствор борной кислоты. 0,5 г борной кислоты растворяют в смеси 25 мл спирта 95% и 20 мл воды при нагревании в мерной колбе вместимостью 250 мл, охлаждают, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают.

Срок годности раствора 6 месяцев.

Около 0,5 г (точная навеска) экстракта помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 10 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и дают отстояться.

2,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку, прибавляют 8 мл 0,2 М фосфатного буферного раствора с pH 7,5, добавляют 0,5 мл раствора бромтимолового синего, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 10 г натрия сульфата безводного, смоченного хлороформом, в мерную колбу вместимостью 50 мл. Фильтр промывают 3 мл хлороформа. Извлечение повторяют еще 2 раза по 10 мл хлороформа. Полученные извлечения фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу. В ту же мерную колбу прибавляют 10 мл борной кислоты раствора, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают (испытуемый раствор).

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют хлороформ.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца атропина сульфата.

Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин в экстракте

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 50 \cdot a_{\text{о}} \cdot 10 \cdot (289,38 \cdot 2) \cdot 3 \cdot 100}{\text{А}_{o} \cdot a \cdot 2 \cdot (694,8 - 18,02) \cdot 100 \cdot 100 \cdot 50} = \frac{\text{А } \cdot a_{\text{о}} \cdot 6,41}{\text{А}_{\text{о}} \cdot a} ,

где

A — оптическая плотность испытуемого раствора;

Aо — оптическая плотность раствора СО атропина сульфата;

a — навеска экстракта, г;

aо — навеска СО атропина сульфата, г;

289,38 — молекулярная масса атропина основания, г;

694,8 — молекулярная масса атропина сульфата, г;

18,02 — молекулярная масса воды, г.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».

---