ФС.2.1.0556. Фармакопейная статья. Ралтегравир калия. Ралтегравир

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ралтегравир калия	ФС.2.1.0556
Ралтегравир
Raltegravirum kalicum	Вводится впервые

C20H20FKN6O5 [871038-72-1]	М.м. 482,51

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1-Метил-2-[2-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-карбоксамидо)пропан-2-ил]-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-5-олат калия.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% ралтегравира калия C20H20FKN6O5 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в гептане.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объемах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ралтегравира на хроматограмме раствора стандартного образца ралтегравира калия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота разведенная 0,1%.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил — вода 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 100 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до температуры 15 — 25 °C и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца ралтегравира примеси E, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора испытуемым раствором.

Раствор для идентификации пика C. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 1 М, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков F и G. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца ралтегравира для идентификации пиков (содержит примесь F и примесь G), прибавляют 20 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь C: 2-{2-[2-(ацетогидразидо)-2-оксоацетамидо]пропан-2-ил}-5-гидрокси-1-метил-6-оксо-N-[(4-фторфенил)метил]-1,6-дигидропиримидин-4-карбоксамид [1391918-17-4].

Примесь E: 1-метил-2-[2-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-карбоксамидо)пропан-2-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин [1193687-87-4].

Примесь F: этил[(1E)-N-{[2-(5-Гидрокси-1-метил-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-2-ил)пропан-2-ил]оксамоил}этангидразонат].

Примесь G: этил[(1Z)-N-{[2-(5-гидрокси-1-метил-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-2-ил)пропан-2-ил]оксамоил}этангидразонат].

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм;
Температура колонки	15 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объем пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 2	75	25
2 — 5	75 \rightarrow 60	25 \rightarrow 40
5 — 10	60 \rightarrow 55	40 \rightarrow 45
10 — 19	55 \rightarrow 10	45 \rightarrow 90
19 — 22	10 \rightarrow 5	90 \rightarrow 95

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пика C, раствор для идентификации пиков F и G, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ралтегравир — 1 (около 10 мин), примесь C — около 0,7; примесь E — около 0,95; примесь G — около 1,1; примесь F — около 1,15.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси C используют хроматограмму раствора для идентификации пика C. Для идентификации пика примеси E используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примеси F и G используют хроматограмму раствора для идентификации пиков F и G и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ралтегравира для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси E и ралтегравира должно быть не менее 1,5;

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площадь пика примеси C умножают на 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси C не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
• площадь пика каждой из примесей E, F и G не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,6% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь метанол — формамид 1:1.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ралтегравира калия. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия, прибавляют 100 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до температуры 15 — 25 °C и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ралтегравира калия и испытуемый раствор.

Содержание ралтегравира калия C20H20FKN6O5 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 250 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 250 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика ралтегравира на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика ралтегравира на хроматограмме раствора стандартного образца ралтегравира калия;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание ралтегравира калия в фармакопейном стандартном образце ралтегравира калия, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

---