ФС.2.1.0357. Фармакопейная статья. Алендронат натрия тригидрат. Алендроновая кислота
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)
Примечание
Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте https://minzdrav.gov.ru/ по состоянию на 16.08.2023. В соответствии с Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377 данный документ введен в действие с 01.09.2023.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Алендронат натрия тригидрат | ФС |
|---|---|
| Алендроновая кислота | |
| Natrii alendronas trihydricus | Вводится впервые |
 | |
| C4H12NNaO7P2·3H2O [121268-17-5] | М.м. 325,12 |
(4-Амино-1-гидроксибутан-1,1-диил)бис(фосфонат)триводорода натрия тригидрат.
Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% алендроната натрия C4H12NNaO7P2 в пересчете на сухое вещество.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в метиленхлориде.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата.
2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B7 или BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH раствора. От 4,0 до 5,0 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Раствор 9-флуоренилметилхлорформиата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г 9-флуоренилметилхлорформиата, растворяют в ацетонитриле и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки. Раствор используют сразу после приготовления.
Буферный раствор. Растворяют 5,88 г натрия цитрата, 2,84 г динатрия гидрофосфата безводного в 1900 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 2000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 29,4 г натрия цитрата, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил — буферный раствор 150:850.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор — ацетонитрил 300:700.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.
Дериватизация. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, 5,0 мл натрия тетрабората раствора 0,05 М, 5,0 мл ацетонитрила и 5,0 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата, встряхивают в течение 45 с, выдерживают в темном месте при комнатной температуре в течение 30 мин. К полученному раствору прибавляют 20 мл метиленхлорида, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин. Используют прозрачный верхний слой.
Стандартный раствор примеси A. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15,0 мг 4-аминобутановой кислоты (примесь A), растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примесь D), растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.
Контрольный раствор. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл растворителя и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.
Примесь A: 4-Аминобутановая кислота [56-12-2].
Примесь D: структура неизвестна.
| Колонка | 250 x 4,1 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 10 мкм; |
|---|---|
| Температура колонки | 45 °C; |
| Скорость потока | 1,8 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 266 нм; |
| Объем пробы | 20 мкл. |
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 3 | 100 | 0 |
| 3 — 18 | 100 \rightarrow 50 | 0 \rightarrow 50 |
| 18 — 28 | 50 \rightarrow 0 | 50 \rightarrow 100 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор примеси A, испытуемый раствор и контрольный раствор.
Относительное время удерживания соединений. Алендронат — 1 (около 7 мин); примесь D — около 1,4; примесь A — около 1,9.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют хроматограмму стандартного раствора; для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками алендроната и примеси D должно быть не менее 5,0.
Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площадь пика примеси A умножают на 0,4.
Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):
Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05%.
2. <*> Примеси B и C
<*> Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.
Подвижная фаза (ПФ). В химическом стакане смешивают 0,2 мл муравьиной кислоты безводной и 1000 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 2 М до 3,5.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 г фосфорной кислоты концентрированной (примесь B) и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г фосфористой кислоты (примесь C) и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора А, 2,0 мл раствора примеси C и доводят объем раствора водой до метки.
Хроматографируют раствор примеси B, раствор примеси C, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Алендронат — 1 (около 16 мин); примесь B — около 1,3; примесь C — 1,6.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика каждой из примесей B и C не должна превышать площадь пика алендроната на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).
Потеря в массе при высушивании. От 16,1 до 17,1% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 140 — 145 °C.
Тяжелые металлы. Не более 0,002% (ОФС «Тяжелые металлы», метод 3Б).
Испытуемый раствор. В колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае интенсивного пенообразования используют колбу вместимостью 300 мл) помещают 1,0 г субстанции, фиксируют колбу под углом 45°, прибавляют 5 мл смеси серная кислота концентрированная — азотная кислота концентрированная 8:10 до полного увлажнения порошка. Содержимое колбы осторожно нагревают до начала реакции, оставляют колбу. После замедления реакции прибавляют 5 мл той же смеси, нагревая после каждого прибавления. Повторяют процедуру до тех пор, пока общий объем прибавленной смеси не достигнет 18 мл, после чего усиливают нагревание и осторожно кипятят до потемнения раствора. Полученный раствор охлаждают. К охлажденному раствору прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Процедуру повторяют до тех пор, пока раствор не перестанет темнеть. Усиливают нагревание до получения плотных белых паров. Полученный раствор охлаждают. К охлажденному раствору прибавляют 5 мл воды, осторожно нагревают до появления плотных белых паров и продолжают нагревать до тех пор, пока объем раствора не уменьшится до 2 — 3 мл. Полученный раствор охлаждают. К охлажденному раствору прибавляют 5 мл воды. Если раствор имеет желтую окраску, то к нему осторожно прибавляют 1 мл водорода пероксида и нагревают до появления паров белого цвета и уменьшения объема до 2 — 3 мл. В случае желтого окрашивания раствора, прибавляют 5 мл воды и 1 мл водорода пероксида до обесцвечивания раствора. Полученный раствор охлаждают и доводят водой до 10 мл.
Определение тяжелых металлов проводят, сравнивая с эталоном, состоящим из 2 мл эталонного раствора 2,6 мл воды и такого же количества реактивов, какое добавлено к испытуемому раствору.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси B и C» со следующими изменениями.
Раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.
Хроматографируют раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата и испытуемый раствор.
Содержание алендроната натрия C4H12NNaO7P2 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика алендроната на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика алендроната на хроматограмме раствора стандартного образца алендроната натрия тригидрата;
a0 — навеска фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, мг;
P — содержание алендроната натрия в фармакопейном стандартном образце алендроната натрия тригидрата, %;
W — потеря в массе при высушивании, %.
В плотно укупоренной упаковке.