ФС.2.1.0311. Фармакопейная статья. Доксициклина моногидрат. Доксициклин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 25.08.2023 № 448)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Доксициклина моногидрат	ФС.2.1.0311
Доксициклин
Doxycyclinum monohydricum	Вводится впервые

C22H24N2O8·H2O [17086-28-1]	М.м. 462,45

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(4S,4аR,5S,5аR,6R,12аS)-3,5,10,12,12а-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-октагидротетрацен-2-карбоксамид, моногидрат.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации. Содержит не менее 95,0% и не более 102,0% доксициклина C22H24N2O8 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Желтый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в воде и спирте 96%.

<*> Растворим в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

---

<*> Приводится для информации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной. Должно появиться желтое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От -113 до -130 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1% раствор субстанции в смеси хлористоводородная кислота 25% — метанол 0,5:99,5; ОФС «Оптическое вращение»). Раствор используют в течение 1 ч после приготовления.

Оптическая плотность. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в смеси хлористоводородной кислоты концентрированной — метанол 0,5:99,5 и доводят объем тем же растворителем до метки. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,07 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Раствор используют в течение 1 ч после приготовления.

pH. От 5,0 до 6,5 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы субстанции и стандартных образцов готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор А. Растворяют 67,9 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25% до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Буферный раствор Б. Растворяют 111,6 г натрия эдетата в 900 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25% до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — вода — буферный раствор А — буферный раствор Б 130:170:350:350.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведенной 0,11% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем хлористоводородной кислотой разведенной 0,11% до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца доксициклина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C и F, растворяют в хлористоводородной кислоте разведенной 0,11% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (6-эпидоксициклин): (4S,4аR,5S,5аR,6S,12аS)-3,5,10,12,12а-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-октагидротетрацен-2-карбоксамид [3219-99-6].

Примесь B (метациклин): (4S,4аR,5S,5аR,12аS)-4-(диметиламино)-3,5,10,12,12а-пентагидрокси-6-метилиден-1,11-диоксо-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-октагидротетрацен-2-карбоксамид [914-00-1].

Примесь C (4-эпидоксициклин): (4R,4аR,5S,5аR,6R,12аS)-3,5,10,12,12а-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-октагидротетрацен-2-карбоксамид [6543-77-7].

Примесь F (2-ацетил-2-декарбамоилдоксициклин): (4S,4аR,5S,5аR,6R, 12аS)-2-ацетил-3,5,10,12,12а-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,4а,5а,6,11,12а-октагидротетрацен-1,11(4H,5H)-дион [122861-53-4].

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм;
Температура колонки	35 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 280 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания пика доксициклина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Доксициклин — 1 (около 21 мин); примесь C — около 0,4; примесь A — около 0,7; примесь B — около 0,8; примесь F — около 1,3.

Идентификация пиков. Для идентификации пиков A, B, C и F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

• разрешение (Rs) между пиками примесей A и B должно быть не менее 2,0;
• разрешение (Rs) между пиками примеси B и доксициклина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси A не должна более чем в 4 раза превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%);
• площадь пика примеси F не должна более чем в 2,4 раза превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2%);
• площадь пика примеси B не должна превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
• площадь пика примеси C не должна превышать 0,4 площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. От 3,6 до 4,6% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,4% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца доксициклина хиклата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доксициклина хиклата, растворяют в хлористоводородной кислоте разведенной 0,11% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата фактор асимметрии пика (As) доксициклина должен быть не более 1,5.

Содержание доксициклина C22H24N2O8 в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика доксициклина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца доксициклина хиклата, мг;

P — содержание доксициклина в фармакопейном стандартном образце доксициклина хиклата, %;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

---