Методические указания по определению фенмедифама и десмедифама в воде природных водоемов тонкослойной хроматографией
(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4036-85)
21 ноября 1985 г. № 4036-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНМЕДИФАМА И ДЕСМЕДИФАМА В ВОДЕ ПРИРОДНЫХ ВОДОЕМОВ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
| № п/п | Вещество, химическое название | Структурная формула | Брутто формула | Мол. масса | Т пл., °С | Растворимость, мг/л |
| 1. | Фенмедифам (бетанал) | ___ NHCO CH / 2 3 | C H № O 16 16 2 4 | 300,3 | 143 — 144 | Т комн. вода — 3 ацет. — 20000 метанол — 50000 хлф. — 20000 гекс. — 500 бенз. — 2500 вода — 7 ацет. — 400000 метан — 180000 бенз. — 1600 хлф. — 80000 |
| 3-Метоксикарбамидофенил-N-3- метилфенил карбамат Десмедифам 3-Этоксикарбамидофенил-Nфенилкарбамат | / \ \\ // \ | |||||
| 2. | OCONHC H CH 6 4 3 ___ NHCO C H / 2 2 5 | C H № O 16 16 2 4 | 300,3 | 120 | ||
| / \ \\ // \ | ||||||
| OCONHC H 6 5 |
Фенмедифам и десмедифам — гербициды, применяемые для борьбы с сорными растениями в посевах сахарной, столовой и кормовой свеклы.
Оба соединения малотоксичные. ЛД для крыс: фенмедифама — 8000 мг/кг, 50 десмедифама — 9600 мг/кг; СК для рыб соответственно — 0,5 — 10 мг/л и 3,8 50
- 16,4 мг/л.
ПДК в воде природных водоемов 0,1 мг/л для обоих гербицидов.
2. Методика определения фенмедифама и десмедифама в воде природных водоемов тонкослойной хроматографией
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении гербицидов из воды хлороформом с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Диапазон измеряемых концентраций 0,15 — 1,00 мкг.
Предел обнаружения в пробе 0,002 мг/л.
Среднее значение определения стандартных растворов фенмедифама и _ десмедифама С при n = 15 — 91,3% и 93,7% соответственно.
Стандартное отклонение S при n = 15 — +/- 6,9% и 6,7%.
Доверительный интервал среднего определения при р = 0,95 и n = 5 — 91,3 +/- 8,6% и 94,7 +/- 8,3% соответственно.
Размах варьирования R 80 — 100% для обоих гербицидов.
2.1.3 Избирательность метода
2.2. Реактивы и материалы
Хлороформ, х.ч., ГОСТ 20015-74, свежеперегнанный.
Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Этилацетат, х.ч., ГОСТ 22300-76.
Сульфат натрия, х.ч., ГОСТ 4166-76, безводный.
Этиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6265-74.
Аммиак, ч., ГОСТ 3760-79, концентрированный.
4-Аминоантипирин, ч.д.а., ТУ 6-09-3948-75, 1-процентный водный раствор. Готовят ежедневно.
Калий железосинеродистый, K [Fe(CN) ], ч.д.а., ГОСТ 4206-75, 3 6 4-процентный водный раствор.
Соляная кислота, HCl, ч.д.а., ГОСТ 3118-77, уд. м. 1,19.
Углекислый натрий, Na CO , ч.д.а., ГОСТ 83-79, 10-процентный водный 2 3 раствор.
Едкий калий, KOH, х.ч., ГОСТ 9285-78, 10-процентный водный раствор.
Нитрит натрия, NaNO , ГОСТ 4197-74, 10-процентный водный раствор. 2
Сульфаниловая кислота, ч.д.а., ГОСТ 5821-78.
Проявляющий реактив на основе соли диазония. Для приготовления n проявляющего реактива растворяют 25 г сульфаниловой кислоты в 125 г 10-процентного КОН. Раствор охлаждают и смешивают со 100 мл 10-процентного раствора нитрита натрия. Реакционную смесь приливают к 40 мл охлажденной льдом соляной кислоты (уд. м. 1,19), разбавленной 20 мл воды. (При разбавлении соляную кислоту добавляют в воду, а не наоборот!) Полученную соль диазония отфильтровывают, промывают водой, этиловым эфиром, затем сушат на воздухе. Соль помещают в склянку с притертой пробкой и хранят в холодильнике. Хроматограмму опрыскивают свежеприготовленным раствором 0,1 г соли диазония в 20 мл 10-процентного раствора углекислого натрия.
Пластинки силуфол, производство ЧССР.
Стандартные растворы фенмедифама и десмедифама в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл (раствор № 1) и 1 мкг/мл (раствор № 2). Растворы № 1 и № 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение трех месяцев.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Ротационный вакуумный испаритель с набором колб, ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.
Хроматографическая камера с пришлифованной крышкой, ГОСТ 10565-75.
Камера для аммиака с пришлифованной крышкой.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
Делительные воронки, ГОСТ 10054-75, на 250 мл.
Конические колбы, ГОСТ 9737-70, на 250 мл.
Пробирки градуированные конические с пробками на шлифах, ГОСТ 1770-74, на 10 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1 мл с делениями.
Микрошприц на 100 мкл, ГОСТ 10391-74.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
2.4. Подготовка к определению
Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей этилацетат:гексан (2:5) для насыщения камеры парами растворителей. Объем подвижного растворителя должен по высоте находиться не выше чем 0,7 — 1,0 см от уровня дна камеры.
2.5. Отбор проб
Отбор проб воды проводят в соответствии с утвержденными «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 г., № 2051-79.
2.6. Проведение определения
Пробу воды 100 мл помещают в делительную воронку на 250 мл и экстрагируют фенмедифам и десмедифам трижды хлороформом, порциями по 50 мл. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (10 г), а затем порциями фильтруют в грушевидную колбу на 30 мл. Каждую порцию хлороформного экстракта концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 — 2 мл. Последнюю порцию экстракта концентрируют досуха. К сухому экстракту пипеткой добавляют 2 мл ацетона, колбу закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. Из полученного раствора микрошприцем отбирают 100 мкл и переносят в коническую пробирку. В пробирку помещают заплавленный в верхней части стеклянный капилляр и концентрируют раствор на горячей водяной бане до объема 0,05 мл. Остаток с помощью того же капилляра, но с отломанным запаянным концом, переносят на хроматографическую пластинку. Параллельно на пластинку наносят серию стандартных растворов гербицидов с содержанием 0,2; 0,3; 0,4...1 мкг. Серию стандартов готовят следующим образом: из стандартных растворов № 2 в коническую пробирку пипеткой переносят 0,2; 0,3; 0,4...1 мл, в пробирки помещают заплавленные в верхней части капилляры и концентрируют растворы на горячей водяной бане до объема 0,05 мл. Хроматограмму развивают в системе этилацетат:гексан (2:5). После развития хроматограмму тщательно высушивают на воздухе, термостатируют в течение 5 мин. при 150 °С в сушильном шкафу, затем помещают в камеру с аммиаком, где выдерживают пластинку в течение 10 мин. Аммиак с пластинки отдувают на воздухе, а затем пластинку обрабатывают одним из двух способов.
Способ 1. Пластинку обрабатывают 1-процентным водным раствором 4-аминоантипирина, а затем 4-процентным водным раствором K [Fe(CN) ]. 3 6 Фенмедифам и десмедифам проявляются на пластинке в виде розовых пятен на желтоватом фоне с R 0,32 +/- 0,05 и 0,42 +/- 0,05 соответственно.
f
Пятна стабильны при хранении в темноте в течение двух недель.
Способ 2. С использованием проявляющего реагента на обнове соли диазония. Пластинку обрабатывают свежеприготовленным раствором соли диазония. В этом случае гербициды проявляются в виде устойчивых оранжевых пятен на белом фоне. Хроматограммы стабильны при хранении даже на свету в течение длительного периода времени (более одного месяца).
Линейность определения гербицидов с использованием обоих проявляющих реагентов 0,2 — 1,0 мкг в хроматографируемой пробе.
Для расширения диапазона определения гербицидов на пластинку можно наносить не аликвотные части растворов, а весь раствор полностью. При большом содержании гербицидов в грушевидную колбочку пипеткой добавляют дополнительное замеренное количество ацетона и после этого отбирают аликвотную часть для хроматографирования.
2.7. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности окраски пятен рабочей пробы и серии стандартов.
Содержание фенмедифама и десмедифама в анализируемой пробе воды Х в мг/л вычисляют по формуле:
С х V
где:
С — количество гербицида, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;
V — объем аликвоты, отобранной для хроматографирования, мл (при а нанесении всей пробы V = V );
а
Р — объем воды, отобранной для анализа, мл.
3. Требования безопасности
Соблюдать требования безопасности, установленные для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и работы с крепкими кислотами и щелочами.
4. Разработчики
Настоящие Методические указания разработаны во ВНИИХСЗР с опытным заводом, г. Москва, Т.В. Алдошиной, К.Ф. Новиковой.
5. Настоящие Методические указания являются дополнением к методу определения бетанала в сахарной свекле тонкослойной хроматографией, разработанному М.А. Клисенко, Н.И. Киселевой (N 1112-73).
6. Апробаторы
1. НПО «Эфирмасло», Ю.С. Баранов.