Методические указания по фотометрическому определению БВК в воздухе
(утв. Минздравом СССР 21.04.1983 № 2721-83)
Утверждаю Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР А. И. Заиченко 21 апреля 1983 г. № 2721-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ БВК В ВОЗДУХЕ
Сборник методических указаний составлен методической секцией по промышленно-санитарной химии при проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии».
Настоящие методические указания распространяются на определение содержания вредных веществ в воздухе промышленных помещений при санитарном контроле.
Редакционная коллегия: Мельникова Л.В., Беляков А.А., Бабина М.Д., Овечкин В.Г.
Белково-витаминный концентрат (БВК) представляет собой порошок желтого цвета с запахом, свойственным дрожжам. Средний размер частиц до 1 мкм — 30%, 1 — 5 мкм — 50%, 5 мкм — 13%. Растворимая часть пыли БВК составляет 42 — 50% навески. Химический состав: влага — 6 - 10%, сухой остаток — 92,6%. В сухом остатке содержится: азота — 6,9%, белковых веществ — 52%, жира — 18,2%, углеводов — 18,4%, золы — 4,7%, остаточных углеводородов — не более 0,4%. Состав золы: кальция — 0,32%, фосфора — 1,31%, калия — 0,43%, натрия — 0,07%.
Агрегатное состояние — аэрозоль.
I. Общая часть
1. Определение БВК основано на количественном определении входящего в его состав белка. В основу определения белка положен метод Лоури, состоящий в фотометрическом анализе окрашенных в синий цвет растворов. Цветная реакция развивается за счет образования комплекса пептидных связей с медью в щелочной среде и усиливается восстановлением реактива Фолина в присутствии циклических аминокислот.
2. Предел обнаружения — 10 мкг белка в анализируемом объеме пробы.
3. Предел обнаружения в воздухе 0,05 мг/м3 (при отборе 600 л воздуха).
4. Погрешность определения +/- 25%.
5. Диапазон измерения концентраций — 0,05 — 100 мг/м3.
6. Определению не мешают: трихлоруксусная кислота, витамины B1, B2, B12 и др.; определению мешают — фенол, тимол, сульфосалициловая кислота.
7. Предельно допустимая концентрация БВК в воздухе — 0,1 мг/м3.
8. Применяемые реактивы и растворы
Альбумин кристаллический бычий, ТУ 6-09-362-75, х.ч.
Стандартный раствор № 1. Готовят растворением альбумина в 2 н. растворе едкого натра.
Стандартный раствор № 2 с содержанием 0,1 мг/мл. Готовят соответствующим разбавлением раствора № 1 2 н. раствором едкого натра. Растворы устойчивы в течение 6 ч.
Трихлоруксусная кислота, ГОСТ 6-09-1926-72, х.ч.
Натр едкий, ГОСТ 4328-77, х.ч.
Натрий углекислый, ГОСТ 84-76.
Калия, натрия тартрат, 5845-70, х.ч.
Медь сернокислая, ГОСТ 4165-78, х.ч.
Натрий вольфрамовокислый, ГОСТ 18289-78, х.ч.
Натрий молибденовокислый, ГОСТ 10931-74, х.ч.
Литий сернокислый, ГОСТ 10563-76, х.ч.
Кислота фосфорная (мета), ГОСТ 841-76, х.ч.
Кислота соляная, ГОСТ 3118-77, х.ч.
Раствор «А», содержащий 100 мг/мл углекислого натрия, 20 мг/мл калия-натрия тартрата, 0,500 мг/мл сернокислой меди, готовят растворением 10 г углекислого натрия, 0,2 г калия-натрия тартрата, 0,05 г сернокислой меди в 100 мл воды.
Реактив Фолина готовят следующим образом: в круглодонную колбу объемом 1 — 2 литра наливают 360 мл дистиллированной воды, добавляют 50 г натрия вольфрамовокислого, 12,5 г натрия молибденовокислого, перемешивают до полного растворения. К полученному раствору добавляют 25 мл 85% раствора ортофосфорной кислоты, 50 мл концентрированной соляной кислоты и смесь кипятят 10 ч с обратным холодильником. Затем добавляют 76 г лития сернокислого, 25 мл дистиллированной воды и 3 капли бромной воды. Кипятят без холодильника 15 мин под тягой для удаления остатков брома. Охлаждают до комнатной температуры и доводят дистиллированной водой до 500 мл, перемешивают и фильтруют. Из фильтрата отбирают 1 мл, разводят в 10 раз и титруют 0,1 н. раствором едкого натра по фенолфталеину. Реактив Фолина с установленным титром доводят до 1 н. концентрации. Хранят в холодильнике в темной склянке.
Рабочий раствор реактива Фолина готовят перед употреблением путем разведения 1 мл 1 н. реактива Фолина 8 мл воды (расчет на одну пробу).
9. Применяемые посуда и материалы
Баня водяная многогнездная с термостатирующим устройством.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50 — 100 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 4, 10 мл.
Пробирки с притертыми пробками, ГОСТ 1770-74, вместимостью 20 мл.
III. Отбор пробы воздуха
10. Воздух со скоростью 20 л/мин аспирируют через фильтры.
Для определения концентраций на уровне 1/2 ПДК необходимо аспирировать 600 л воздуха. Срок хранения отобранных проб трое суток.
IV. Описание определения
11. Фильтры помещают в широкогорлую колбу вместимостью 50 мл, заливают 1,5 мл 0,5 М раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ), содержимое колбы кипятят на водяной бане 5 мин, закрыв крышкой. В охлажденную колбу добавляют 1,5 мл 2 н. раствора едкого натра и отмывают белок с фильтров встряхиванием на шуттель-аппарате в течение 20 мин.
Из колбы отбирают 1 мл щелочного раствора белка, переносят в пробирку, добавляют 2 мл реактива «А», перемешивают и выдерживают 10 мин. Затем добавляют 8 мл рабочего раствора реактива Фолина, перемешивают и выдерживают 5 мин на водяной бане при температуре 50 °C.
После быстрого охлаждения пробы фотометрируют в кюветах с толщиной слоя 20 мм при длине волны 650 нм по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробам. Содержания белка в анализируемом объеме определяют по предварительно построенному градуировочному графику.
Для построения градуировочного графика готовят шкалу стандартов согласно табл. 23.
| Номер стандарта | Стандартный раствор № 2, мл | 2 н. раствор едкого натра, мл | Содержание белка (мкг) |
|---|---|---|---|
| 1 | 0,0 | 1,0 | 0,0 |
| 2 | 0,1 | 0,9 | 10 |
| 3 | 0,2 | 0,8 | 20 |
| 4 | 0,4 | 0,6 | 40 |
| 5 | 0,6 | 0,4 | 60 |
| 6 | 0,8 | 0,2 | 80 |
| 7 | 1,0 | 0,0 | 100 |
Затем во все пробирки шкалы добавляют 2 мл раствора «А», выдерживают 10 мин и завершают анализ вышеописанным образом. Шкала устойчива в течение 60 мин.
Концентрацию БВК в воздухе в мг/м3 (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{G \cdot V_{1} \cdot K}{V \cdot V_{20}} ,
где G — количество вещества, найденное по графику, мкг;
V — объем пробы, взятый для анализа, мл;
K — коэффициент пересчета с белка на БВК (K = 1,6);
V20 - объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям по формуле (см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле:
V_{20} = \frac{V_{t}(273 + 20) \cdot P}{(273 + t) \cdot 101,33} ,
где Vt — объем воздуха, отобранный для анализа, л;
P — барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t — температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства расчета V20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ: ТЕМПЕРАТУРА +20 °C И АТМОСФЕРНОЕ ДАВЛЕНИЕ 101,33 кПа
РИСУНКИ К СБОРНИКУ № 18 «МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВРЕДНЫХ ВЕЩЕСТВ В ВОЗДУХЕ»
Рис. 1. Стеклянная трубка с пористой пластинкой.
Рис. 2. Схема динамического диффузионного дозатора:
Рис. 3. Концентрационная трубка:
1 — стеклянная сетка, впаянная в трубку;
Рис. 4. Патрон плексигласовый для отбора проб воздуха:
Рис. 5. Схема установки для отбора пробы воздуха:
2 — перфорированная перегородка с отверстиями d — 0,8 мм;
3 — Г-образная стеклянная переходная трубка;
4 — поглотительные сосуды Рихтера;
Рис. 1. Стеклянная трубка с пористой пластинкой для отбора проб воздуха
Рис. 2. Схема динамического диффузионного дозатора
Рис. 3. Концентрационная трубка
Рис. 4. Патрон плексигласовый для отбора проб воздуха
Рис. 5. Схема установки для отбора пробы воздуха
ПЕРЕЧЕНЬ УЧРЕЖДЕНИЙ, ПРЕДСТАВИВШИХ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ В ДАННЫЙ СБОРНИК
| N п/п |
Методические указания | Учреждение, представившее методическое указание |
|---|---|---|
| 1 | Методические указания по газохроматографическому определению бальзама лесного «А» в воздухе | Белорусский санитарно-гигиенический институт |
| 2 | Методические указания по методам определения вернама в воздухе | Киевский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 3 | Методические указания по газохроматографическому определению гексахлорбензола в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 4 | Методические указания по газохроматографическому определению гексафторида в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 5 | Методические указания по хроматографическому определению 4,4-дитиодифенил-бис-малеимида в воздухе | ГорСЭС г. Москвы |
| 6 | Методические указания по газохроматографическому определению 2,3-дихлорпропена в воздухе | Новосибирский НИИ гигиены |
| 7 | Методические указания по газохроматографическому определению дихлорэтана, псевдокумола, моно- и дихлорметилпсевдокумола в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 8 | Методические указания по газохроматографическому определению изобутилового спирта в воздухе | Институт биофизики Минздрава СССР, г. Москва |
| 9 | Методические указания по газохроматографическому определению изомеров хлортолуола в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 10 | Методические указания по газохроматографическому определению метил-трет-бутилового эфира в воздухе | Ярославский НИИ мономеров для СК |
| 11 | Методические указания по газохроматографическому определению метилтолуилата, динила и диметилтерефталата в воздухе | Белорусский санитарно-гигиенический институт |
| 12 | Методические указания по газохроматографическому определению метилфенилдиметоксисилана в воздухе | СЭС, г. Данков |
| 13 | Методические указания по газохроматографическому определению мононитронафталина и изомеров 1,5 и 1,8-динитронафталина в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 14 | Методические указания по хроматографическому определению пиридона и нитропиридона в воздухе | «» |
| 15 | Методические указания по газохроматографическому определению пропионового альдегида в воздухе | ВНИИ нефтехим, г. Ленинград |
| 16 | Методические указания по методам определения ФДН в воздухе | Киевский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 17 | Методические указания по газохроматографическому определению фосфорорганических пестицидов (карбофос, метафос, метилнитрофос, бромфос, трихлорметафос-3, цидиал, цианокс) в воздухе | ВНИИГИНТОКС |
| 18 | Методические указания по газохроматографическому определению фурана, тетрагидрофурана и сильвана в воздухе | Узбекский НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний |
| 19 | Методические указания по газохроматографическому определению хлоризопрена, хлорметилбутена и дихлорметилбутена в воздухе | Научно-производственное объединение «НАИРИТ» |
| 20 | Методические указания по хроматографическому определению холинхлорида в воздухе | Киевский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 21 | Методические указания по газохроматографическому определению циодрина в воздухе | ВНИИГИНТОКС |
| 22 | Методические указания по газохроматографическому определению эпихлоргидрина (ЭХГ) в воздухе | Ростовский медицинский институт |
| 23 | Методические указания по спектрографическому определению алюминия, ванадия, кремния, лития, меди, никеля, олова, сурьмы, титана, хрома, цинка и их неорганических соединений в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 24 | Методические указания по спектрографическому определению хрома, никеля, кобальта, железа, марганца, алюминия, молибдена, меди, титана и вольфрама в воздухе | Институт охраны труда ВЦСПС (г. Москва) |
| 25 | Методические указания по фотометрическому определению алюмосиликата бария в воздухе | Первый Московский мединститут |
| 26 | Методические указания по фотометрическому определению акролеина в воздухе | Штаб военизированных горноспасательных частей Урала, г. Свердловск |
| 27 | Методические указания по фотометрическому определению арсенида галлия в воздухе | Первый Московский мединститут |
| 28 | Методические указания по фотометрическому определению БВК в воздухе | Ленинградский санитарно-гигиенический мединститут |
| 29 | Методические указания по фотометрическому определению бромбензантрона и дибромбензатрона в воздухе | Харьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 30 | Методические указания по фотометрическому определению ванилина в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 31 | Методические указания по фотометрическому определению гваякола в воздухе | «» |
| 32 | Методические указания по фотометрическому определению диалкилфталата в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 33 | Методические указания по спектрографическому определению дилуцина в воздухе | Рижский мединститут |
| 34 | Методические указания по фотометрическому определению димера метилциклопентадиена в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 35 | Методические указания по фотометрическому определению 3,5-динитро-4-хлорбензойной кислоты в воздухе | Подсекция «Промышленно-санитарная химия» |
| 36 | Методические указания по фотометрическому определению метилового эфира метоксиуксусной кислоты в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 37 | Методические указания по фотометрическому определению монометакрилата пропиленгликоля в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 38 | Методические указания по фотометрическому определению монохлорметилпсевдокумола в воздухе | Горьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 39 | Методические указания по фотометрическому определению озона в воздухе | Ленинградский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 40 | Методические указания по фотометрическому определению о-оксибензилового спирта в воздухе | Харьковский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 41 | Методические указания по фотометрическому определению 1-оксиэтилидендифосфоновой кислоты, тринатриевой соли оксиэтилидендифосфоновой кислоты и нитрилотриметиленфосфоновой кислоты в воздухе | ВНИИ «ИРКА», г. Москва |
| 42 | Методические указания по спектрофотометрическому определению пирена в воздухе | Свердловский НИИ гигиены труда и профзаболеваний |
| 43 | Методические указания по фотометрическому определению рифампицина в воздухе | ВНИИ антибиотиков |
| 44 | Методические указания по фотометрическому определению фосфиноксида разнорадикального C5 - C9 и триизоамилфосфиноксида в воздухе | Саратовский мединститут |
| 45 | Методические указания по фотометрическому определению фуразолидона в воздухе | Рижский мединститут |
| 46 | Методические указания по фотометрическому определению этилового эфира циануксусной кислоты в воздухе | НИИ гигиены труда и профзаболеваний Академии медицинских наук СССР |
| 47 | Методические указания по титриметрическому определению ксантогенатов в воздухе | Армянский НИИ общей гигиены и профзаболеваний |