МУК 4.1.816-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации верапамила [5(3,4-диметоксифенилэтил)-метиламино-2(3,4-диметоксифенил)-2-изопропилвалеронитрил гидрохлорид] в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ВЕРАПАМИЛА [5(3,4-ДИМЕТОКСИФЕНИЛЭТИЛ)-МЕТИЛАМИНО-2(3,4- ДИМЕТОКСИФЕНИЛ)-2-ИЗОПРОПИЛВАЛЕРОНИТРИЛ ГИДРОХЛОРИД] В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

(Структурная формула не приводится)

С Н № О , НСl М.м. 491,07 27 38 2 4

Верапамил — кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Растворим в воде, этаноле, хлороформе, не растворим в эфире.

Температура плавления 142 — 143 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля.

Верапамил обладает чрезвычайно сильным раздражающим действием, оказывает влияние на зрение.

ОБУВ в воздухе — 0,2 мг/куб. м.

Характеристика метода

Определение основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения — 0,008 мкг в анализируемой пробе раствора (1 мкл).

Нижний предел измерения в воздухе — 0,1 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций — 0,1 — 1,25 мг/куб. м.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 23,5%.

Определению верапамила не мешают бензол, толуол, ксилолы, кумол, анилин.

Длительность анализа, включая отбор проб, 2 часа.

Реактивы, растворы и материалы

Верапамил, содержание основного вещества 99,5%.

Раствор верапамила в дистиллированной воде, 1 мг/мл.

Этанол 96°, ГОСТ 5962-67.

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ОП-3, ос.ч., ТУ 6-09-14-2167-84.

Аммония ацетат, х.ч., ГОСТ 3117-68.

0,1 М раствор аммония ацетата (в 1 л дистиллированной воды растворяется 7,7083 г аммония ацетата).

Элюент — ацетонитрил: 0,1 М аммония ацетат (85:15).

Фильтры АФА-ВП-40, ТУ 95.7181-76.

Приборы, аппаратура и посуда

Хроматограф жидкостный микроколоночный «Милихром» (ПО «Научприбор», г. Орел).

Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 61-1.24-51-78.

Аспирационное устройство.

Испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ-25-11-917-76.

Пробирки ПГКШ-5, ГОСТ 1770-74.

Пикнометр ПЖ 2-25-КШ 7/16, ГОСТ 22254-77Е.

Пипетки вместимостью 1; 2; 5 мл, ГОСТ 20292-74 КЛО.

Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм; 0,2 мкм; МО КНПО «Диагностикум»).

    Металлическая колонка 80 х 2 мм (заполнена сорбентом  Силасорб
SРН С  , 5 мкм).

 18

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирирует через фильтр АФА-ВП-40, помещенный в фильтродержателе (срок хранения отобранных проб в темном прохладном месте — до 5 дней). Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха.

Подготовка к измерению

Разбавлением исходного стандартного раствора (1 мг/мл) готовятся градуировочные растворы с концентрацией 8 — 100 мкг/мл.

Срок хранения растворов в темном прохладном месте — 2 недели.

По 1 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф.

Калибровочный график строится в координатах — по оси абсцисс — количество вещества в анализируемой пробе (мкг), по оси ординат — площадь пика (кв. мм). Значения площадей пиков определяются по 7 измерениям. Градуировочный график строят каждый раз после приготовления новой серии градуировочных растворов и проверяют его перед исследованием проб воздуха.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Адсорбент: Силасорб SPH С (5 мкм). 18

Элюент: смесь 0,1 М раствора аммония ацетата и ацетонитрила в соотношении 15:85.

Скорость подачи элюента — 100 мкл/мин.

Длина волны детекции — 278 нм.

Диапазон чувствительности детектора — 0,4 А.

Чувствительность шкалы электрометра — 50 мв.

Скорость движения диаграммной ленты — 180 мм/час.

Время удерживания верапамила — 3 мин. 32 сек.

Проведение измерения

Фильтр с пробой помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают 5 минут. Раствор декантируют, фильтр еще два раза встряхивают с 3 мл этанола. Объединенный спиртовой экстракт упаривают на вакуумном испарителе до 1 мл, фильтруют через фильтр диаметром пор 0,2 мкм и исследуют на жидкостном хроматографе. 1 мкл полученного раствора вводят в хроматограф аналогично градуировочным растворам.

Количественное определение верапамила в хроматографируемом растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию вещества в воздухе С, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

                            а х б

С = -----, в х V

где:

а — содержание вещества по калибровочному графику, мкг;

б — объем пробы, взятый для анализа, мл;

в — общий объем пробы, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (л) (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                        V  (273 + 20) х Р
                         t

                     V   = ------------------,
                      20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -   барометрическое   давление,   кПа  (101,33  кПа  =  760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.

                    t

Приложение 3

Рис. 1. Схема соединения колонок