МУК 4.1.1246-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств этофумезата в корнеплодах и ботве сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии (дополнение к МУ № 2083-79). Методические указания

(утв. Минздравом России 16.03.2003)

16 марта 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЭТОФУМЕЗАТА В КОРНЕПЛОДАХ И БОТВЕ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

(ДОПОЛНЕНИЕ К МУ № 2083-79)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1 июля 2003 года

1. Подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана; Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева; при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России.

Разработчики методики указаны в конце.

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г.

4. Введены с 1 июля 2003 г.

5. Введены впервые.

1. Вводная часть

Фирма-производитель: АгрЭво (Германия).

Торговое название: Нортрон.

Действующее вещество: этофумезат, (+/-)-2-этокси-2,3-дигидро-3,3-диметил-бензофуран-5-ил метансульфонат (IUPAC).

Структурная формула: (не приводится).

Эмпирическая формула: C H O S. 13 18 5

Молекулярная масса: 286,3.

Бесцветное кристаллическое вещество.

Температура плавления: 71 °С.

Давление паров при 25 °С: 0,065 мПа.

Растворимость: в воде — 0,05 г/л, в ацетоне, бензоле, хлороформе, диоксане — 400 г/л; этаноле — 100 г/л; н-гексане — 4 г/л.

Стабилен в нейтральных водных растворах, в спиртовой щелочи происходит отщепление метансульфокислоты.

Гигиенические нормативы. МДУ в сахарной, кормовой и столовой свекле — 0,1 мг/кг.

Область применения препарата. Этофумезат — гербицид для борьбы с двудольными сорняками на посевах сахарной, столовой и кормовой свеклы.

2. Метод определения остаточных количеств этофумезата в корнеплодах и ботве сахарной свеклы с применением газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на определении этофумезата с помощью газожидкостной хроматографии с использованием пламенно-фотометрического детектора (ПФД) с серным фильтром (лямбда = 396 нм) после экстракции препарата из анализируемых объектов органическим растворителем и последующей очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями.

2.1.2 Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых для защиты сахарной свеклы от вредителей, болезней и сорняков.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода

Метрологические параметры метода определения этофумезата в корнеплодах и ботве сахарной свеклы:

Метрологические параметры, р = 0,95, n = 6
анализируемый объект	предел обнаружения, мг/кг	диапазон определяемых концентраций, мг/кг	среднее значение определения, %	стандартное отклонение, %	доверительный интервал среднего результата, %
Ботва	0,05	0,05 — 0,4	89,8	4,1	+/- 3,8
Корнеплоды	0,05	0,05 — 0,4	84,5	6,3	+/- 6,8

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Аналитический стандарт этофумезата Ацетон, хч ГОСТ 26-3-79 Дихлорметан, хч ТУ 6-09-2662-77 Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77 Натрий серно-кислый, безводный, хч ГОСТ 4166-76 Вода бидистиллированная ГОСТ 7602-72 Неподвижная фаза для хроматографической колонки: 5% SE-54 на хроматоне N/AW/HDMS (0,125 — 0,160)

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф Цвет-500, снабженный пламенно- фотометрическим детектором (ПФД) с серным фильтром (лямбда = 396 нм) Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 1,0 м и внутренним диаметром 3,0 мм Ротационный испаритель типа ИР-1М или аналогичный ТУ 25-11-917-76 Установка ультразвуковая «Серьга» УЗМ 002 или аналогичная Весы аналитические ТУ 64-1-1065 Весы технические ВЛР-200 ГОСТ 19401-74 Воронки делительные емкостью 500 мл ГОСТ 100054 Колбы плоскодонные емкостью 250 мл ГОСТ 25336-82Е

Колбы-концентраторы грушевидные НШ-19              ГОСТ 10394
Микрошприц МШ-10А                                  ТУ 64-1-2850

Фильтры обеззоленные, белая лента, диаметром 12,5 см ТУ 6-09-1678-95

2.4. Отбор проб

Отбор проб проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79).

С каждой делянки варианта опыта отбирают 3 — 4 растения и отделяют ботву от корнеплода. Корнеплоды моют, обсушивают фильтровальной бумагой и из каждого корнеплода по осевой линии вырезают 1/8 часть, затем эту среднюю пробу измельчают, перемешивают и выделяют аналитические пробы.

Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру с температурой -18 °С.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Подготовка и кондиционирование колонки для газожидкостной хроматографии

Готовую насадку (5% SE-54 на хроматоне N/AW/HDMS) засыпают в стеклянную колонку и уплотняют под вакуумом. Заполненную колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подключая к детектору, и кондиционируют в течение 8 ч при температуре 240 °С.

2.5.2 Приготовление стандартных растворов

Взвешивают 100 мг этофумезата, переносят в мерную колбу объемом 100 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор № 1 с концентрацией этофумезата 1,0 мг/мл). Стандартный раствор № 1 можно хранить в холодильнике в течение трех месяцев.

Методом последовательного разбавления из раствора № 1 готовят стандартные растворы этофумезата в гексане с концентрациями: 4,0; 2,0; 1,0; 0,5 мкг/мл (рабочие растворы) для построения калибровочного графика.

2.5.3 Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочих растворов этофумезата в гексане с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0 и 4,0 мкг/мл.

Осуществляют не менее трех параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации этофумезата в мкг/мл.

2.6. Определение этофумезата в корнеплодах и ботве сахарной свеклы

2.6.1 Экстракция

10 г измельченной массы корнеплодов или ботвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, добавляют 50 мл ацетона. Колбу с анализируемой массой помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. Содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр белая лента в делительную воронку емкостью 500 мл. Процедуру экстрагирования и фильтрования повторяют.

2.6.2 Очистка экстракта

В делительную воронку к объединенному фильтрату добавляют 250 мл дистиллированной воды и 20 мл насыщенного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают и добавляют 30 мл дихлорметана. Делительную воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. и после полного разделения слоев нижнюю дихлорметановую фракцию собирают в колбу-концентратор, пропуская через слой безводного сульфата натрия толщиной ~ 1,5 см. Экстракцию повторяют еще один раз. Дихлорметан объединенного экстракта упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 40 — 50 °С. Сухой остаток в колбе-концентраторе растворяют в 1,0 мл ацетона и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф: «Цвет-560» или другой с ПФД-сера

Колонка: насадочная с неподвижной фазой 5% SE-54

Длина, внутренний диаметр колонки: 1,0 м x 3,0 мм

9 Рабочая шкала электрометра: 8 x 10

Скорость движения ленты самописца: 0,25 см/мин.

Скорость потока газа-носителя (азота): 40 куб. см/мин.

Скорость потока воздуха: 150 куб. см/мин.

Скорость потока водорода: 60 куб. см/мин.

Режим хроматографирования: изотермический

Температура колонки: 210 °С

Температура испарителя: 250 °С

Температура детектора: 250 °С

Объем вводимой пробы: 2,0 мкл

Время удерживания этофумезата: 3,0 +/- 0,1 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,25 — 8,0 нг

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание этофумезата рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                              H  x A x V
                               1

X = ----------, H x m 0

где:
X - содержание этофумезата в пробе, мг/кг;
H  - высота (площадь) пика образца, мм (кв. мм);
 1
H  - высота (площадь) пика стандарта, мм (кв. мм);
 0

A — концентрация стандартного раствора этофумезата, мкг/мл;

V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

m — масса анализируемой части пробы, г.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые требования безопасности при работе в химических лабораториях с органическими растворителями, электронагревательными приборами, УФ-светом, сжатыми газами, а также выполнять требования, изложенные в документации, прилагаемой к приборам.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. «ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

5. Разработчики

М.Я. Николаев, Л.В. Григорьева, П.А. Тарарин (ВИЗР).

---