Методические указания по определению нортрона в воде, черноземной почве и сахарной свекле

(утв. Минздравом СССР 19.10.1979 № 2083-79)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НОРТРОНА В ВОДЕ, ЧЕРНОЗЕМНОЙ ПОЧВЕ И САХАРНОЙ СВЕКЛЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Активное вещество нортрона/синонимы: трамат, НЦ 8438/-2-этокси-2,8-дигидро-3,3-диметил-5-бензофуранил-метан-сульфонат.

                CH

CH SO O /\ 3 2 \// \			3
			3

            \\ / \ / OC H                                        C  H  O S.
             \/   O    2 5                                        13 18 5

Молекулярная масса: 286,4. Точка плавления: 71 °С.

В воде растворяется слабо 0,01% при 25 °С и хорошо в органических растворителях — ацетоне, бензоле, хлороформе, этаноле, н-гексане. Гербицид,

форма   препарата   -   20-процентный   или  50-процентный  эмульгирующийся
концентрат. Малотоксичен  для  теплокровных,  ЛД    для  крыс  2000  мг/кг.

                                            50

Применяется против двудольных сорняков на посевах сахарной свеклы.

2.1 Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении пестицида из исследуемой пробы органическим растворителем, очистке экстракта и хроматографировании препарата в тонком слое силикагеля на пластинках «Силуфол UV-254». Подвижными растворителями служат смеси: I — ацетон — изооктан в соотношении 1:1, II — диэтиловый эфир — изооктан в соотношении 4:1.

Проявление препарата производится реагентами после его фоторазложения в течение 20 минут облучением УФ-светом. Метод специфичен и позволяет избирательно определять нортрон в присутствии гербицидов, таких как бетанал, дуал и карбодимедон. Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 1.

НОРТРОНА С ПОМОЩЬЮ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Диапазон определяемых количеств (мкг) — 3 - 10. Предел обнаружения в пробе — 3 - 5 мкг

Анализируемая проба	Предел обнаружения, мг/л, мг/кг	Число параллельных определений, n	Размах варьирования, %	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Относительное стандартное отклонение, %	Доверительный интервал среднего при P = 0,95
Вода Почва Свекла Ботва	0,02 0,1 0,2 0,3	5 5 5 5	20 20 20 20	88 85 86 90	5,6 7,8 8,0 8,7	6,8 9,2 9,3 9,7	+/- 7,5 +/- 9,7 +/- 10,0 +/- 10,8

2.2 Реактивы и растворы

Ацетон, х.ч.

Бензидин, х.ч.

Изооктан эталонный, х.ч.

н-Гексан, х.ч.

Хлороформ, х.ч.

Пластинки «Силуфол UV-254»

Натрий сернокислый безводный, х.ч.

Дифениламин, х.ч.

Кислота соляная, х.ч.

Калий марганцевокислый, х.ч.

Метиловый желтый, х.ч.

Натрий едкий, 0,1-процентный раствор.

Алюминий сернокислый, 0,1 н раствор.

Стандартный раствор нортрона (100 мкг/мл) готовят растворением 0,005 г препарата (х.ч.) в 50 мл н-гексана.

Проявляющие реактивы

1. Метиловый желтый: 0,1 г в смеси 75 мл этанола и 25 мл дистиллированной воды.

2. Свежеприготовленный насыщенный раствор дифениламина в ацетоне.

3. 2-процентный раствор бензидина в этаноле.

2.3 Посуда и приборы

Водоструйный или масляный насосы.

Воронки делительные (250, 500 мл).

Воронки химические.

Камера для хроматографирования.

Камера для опрыскивания.

Колбы конические на 150 — 250 мл.

Прибор для отгонки растворителя.

Пульверизатор стеклянный.

Пипетки.

Микропипетки на 10 и 20 мкг.

Мерные цилиндры.

Лампа кварцевая ПРК-4.

Шкаф сушильный.

Эксикаторы.

2.4 Подготовка к определению

2.4.1 Приготовление пластинок

Пластинки «Силуфол» активируют в сушильном шкафу 20 минут при температуре 130 — 140 °С.

2.5 Проведение определения

2.5.1 Экстракция

Вода. 200 мл анализируемой воды помещают в делительную воронку и трижды по 50 мл экстрагируют н-гексаном (каждый раз по 5 минут). Экстракты объединяют. Фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, упаривают почти досуха и хроматографируют.

Черноземная почва. 100 г перемешанной и растертой в ступке почвы помещают в плоскодонную колбу, заливают 125 мл н-гексана или диэтилового эфира. Содержимое колбы взбалтывают 10 — 15 минут и оставляют на 17 — 18 часов. Растворитель отфильтровывают через фильтр со слоем безводного сернокислого натрия. Колбу и фильтр трижды промывают по 25 мл растворителя. Экстракты объединяют и растворитель выпаривают досуха.

Свекла, ботва. Измельченную навеску 50 г свеклы или 25 г ботвы заливают на ночь н-гексаном или диэтиловым эфиром. Экстракт отфильтровывают, пробу промывают растворителем (три раза по 25 мл) и присоединяют его к экстракту. Объединенный экстракт высушивают безводным сернокислым натрием и растворитель испаряют досуха.

Сухой остаток переносят в колбу, используя 75 мл 0,1-процентного раствора едкого натра. Затем прибавляют 25 мл 0,1 н раствора сульфата алюминия, тщательно перемешивают и через 5 — 10 минут раствор отфильтровывают через плотный бумажный фильтр в делительную воронку. В воронку приливают 50 мл гексана и встряхивают в течение 5 минут. Операцию повторяют три раза. Гексановые экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, отгоняют до объема 0,2 — 0,3 мл и наносят на пластинку.

2.5.2 Хроматографирование

    Сухой  остаток растворяют в небольшом количестве н-гексана и наносят на
пластинку.   Рядом   с  пробами  наносят  стандартные  растворы  препарата.
Пластинку  помещают  в  хроматографическую  камеру с системой растворителей

ацетон — изооктан (1:1) или диэтиловый эфир — изооктан (4:1). После подъема

растворителя  на высоту 10 - 12 см пластинку вынимают из камеры и оставляют
на  воздухе  для  испарения  растворителя.  После  пластинку  выдерживают в
УФ-свете  в  течение  20  минут  (лампа  ПРК-4).  При  наличии  нортрона на

хроматограмме проявляются коричневые пятна, аналогичные пятнам стандартного раствора с R = 0,48 +/- 0,05 в системе растворителей ацетон — изооктан, а f в системе диэтиловый эфир — изооктан с величиной R = 0,53 +/- 0,02. Затем f

пластинку   помещают  в  камеру  для  опрыскивания  и  орошают  проявляющим
реактивом  1.  Нортрон обнаруживается в виде красных пятен на светло-желтом
фоне.  Возможно  проявление  хроматограмм  также  следующим  образом: после
хроматографирования  и высушивания пластинку облучают УФ-светом 20 минут, а
затем  опрыскивают насыщенным раствором дифениламина в ацетоне и подвергают
опять  УФ-облучению  на  10  -  15  минут. Нортрон проявляется в виде синих

пятен.

Высокая чувствительность наблюдается при таком определении, когда после облучения УФ-светом пластинку на 5 минут помещают в камеру, насыщенную парами хлора. Для получения хлора на дно эксикатора насыпают 7 — 10 г перманганата калия и добавляют 15 — 20 мл концентрированной соляной кислоты. После улетучивания паров хлора пластинку опрыскивают раствором бензидина. Препарат проявляется в виде сине-зеленых пятен на светлом фоне, быстро буреющих на воздухе.

2.6 Обработка результатов анализа

Количественное определение производится путем сравнения площади пятен проб и стандартных растворов. Измерение площади осуществляется с помощью миллиметровой бумаги. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается до 10 мкг. При большом содержании препарата на пластинку наносят часть экстракта.

Содержание препарата в исследуемой пробе, мг/кг, мг/л, находят по формуле:

                                A х S
                                     2

X = ------, P х S 1

где:

A — количество мкг стандартного раствора препарата;

S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1

S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2

P — вес или объем пробы, взятой на анализ в г или мл.

2.7 Требования безопасности

Соблюдать все требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами, органическими растворителями и УФ-светом.

---