Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6244-91)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЭТАЛФЛУРАЛИНА В СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА И ХЛОПКОВОМ МАСЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Настоящие Методические указания являются дополнением к Временным методическим указаниям по определению соналана в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами (N 3200 от 03.01.85).

1. Краткая характеристика препарата

Торговое наименование: соналан.

Фирма-производитель: ДауЭланко (США).

Действующее вещество: эталфлуралин.

2,6-Динитро-4-трифторметил-N-этил(2-метил-3-пропенил)анилин.

               NO      CH

        //   \\    CH -C=CH

<pre class="legal-pre">    F C-\ ___ /──N/  2     2
     3    ─── \   \</pre>

               NO  C H
                 2  2 5

Мол. масса — 333,26.

Брутто-формула: C H F № O . 13 14 3 3 4

Химически чистый эталфлуралин представляет собой кристаллическое вещество желто-оранжевого цвета с температурой плавления 55 — 56 °C и давлением паров 0,11 мПа (при 25 °C).

Растворимость в воде — 0,3 мг/л при 25 °C. Хорошо растворяется в жирах, органических растворителях, в том числе в ацетоне (500 г/л), ацетонитриле, хлороформе, метаноле (82 г/л), метиленхлориде, ксилоле (500 г/л), бензоле.

Период полураспада в почве составляет 25 — 46 дней. Стабилен в воде при значениях pH 3 — 9 свыше 33 дней. Быстро разрушается под действием ультрафиолетового излучения.

Малотоксичен для теплокровных. ЛД более 2000 мг/кг. 50

МДУ в плодах арбуза — 0,05 мг/кг, в хлопковом масле, сое, подсолнечнике не допускается.

Применяется для борьбы с сорняками на посевах сои, хлопчатника, подсолнечника, рапса, клещевины в виде 33% концентрата эмульсии при норме расхода 2,0 — 4,0 л/га.

2. Методика определения эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении эталфлуралина ацетонитрилом, очистке экстракта путем перераспределения в концентрированную серную кислоту с последующей перегонкой с водяным паром и экстракции из дистиллята в гексан с последующим газохроматографическим определением с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов. Минимально детектируемое количество — 0,1 мкг в пробе. Нижний предел обнаружения — 0,01 мг/кг масла и 0,02 мг/кг семян.

2.1.2 Избирательность метода

Определению не мешает присутствие в пробах трефлана, имеющего близкое время удерживания.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода

Таблица 1

Анализируемый объект	n	Метрологические параметры, p = 0,95
		предел обнаруж., мг/кг (л)	диапазон определяемых конц., мг/кг (л)	среднее значение определ., %	стандартн. отклонение S, %	доверит. интервал среднего результ., %
Семена хлопчатника	15	0,02	0,02 — 0,5	83,4	2,53	+/- 4,5
Хлопковое масло	15	0,01	0,01 — 0,5	78,8	2,00	+/- 3,4

Таблица 2

(5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)

Среда	Добавлено соналена, мг/кг	Обнаружено, мг/кг	Полнота определения, %
Семена хлопчатника	0,2 0,1 0,02	0,157 0,0828 0,01778	78,5 82,8 88,9
Хлопковое масло	0,1 0,05 0,01	0,0785 0,04015 0,00776	78,5 80,3 77,6

2.2. Реактивы и материалы

Эталфлуралин с содержанием д.в. 99,8%.

н-Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетонитрил ч, ТУ 6-09-3534-74.

Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-76.

Кислота серная концентрированная ч, ГОСТ 4204-77.

Насадки для колонки: 3% OV-17 на Инертоне-супер, размер частиц 0,16 — 0,20, Хемапол, ЧСФР.

5% XE-60 на Инертоне-супер, размер частиц 0,12 — 0,16, Хемапол, ЧСФР.

2.3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф «Цвет-550» с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74, или аналог.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2.833.106.

Колбы грушевидные на шлифах КШ50 29-32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Колбы конические на шлифах КШ500 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Воронки конические, диаметр 5 см.

Прибор для перегонки с водяным паром.

Встряхиватель механический, ТУ 64-1-1081-73.

Водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Перед анализом семена измельчают на мельнице.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% XE-60 или 3% OV-17 на Инертоне-супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 240 °C или 280 °C в течение 8 — 10 часов.

2.5.2 Приготовление стандартных растворов

Взвешивают 50 мг эталфлуралина в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в гексане и доводят объем до метки гексаном (стандартный раствор № 1, концентрация 1 мг/мл). Стандартный раствор № 1 можно хранить в холодильнике в течение 1 месяца. Методом последовательного разбавления готовят стандартный раствор № 2 с концентрацией 10 мкг/мл.

Для построения калибровочного графика из раствора с концентрацией 10 мкг/мл готовят последовательным разбавлением стандартные растворы с концентрациями: 0,1; 0,05; 0,025 и 0,01 мкг/мл соответственно.

2.6. Описание определения

2.6.1 Экстракция и очистка экстракта

2.6.1.1 Семена хлопчатника

Навеску 5 г семян заливают 50 мл ацетонитрила, встряхивают 2 часа и оставляют на ночь. После выстаивания встряхивают еще 1 час, затем фильтруют методом декантации, не перенося массу на фильтр. Навеску семян заливают еще раз 50 мл ацетонитрила, встряхивают 1 час и фильтруют, тщательно отжимая массу стеклянной палочкой. Объединенные фильтраты упаривают при температуре не свыше 35 °C (!).

К сухому остатку в концентраторе добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты. В перегонную колбу прибора для перегонки с паром помещают 50 мл дистиллированной воды, добавляют сернокислотный раствор, ополаскивают концентратор два раза водой общим объемом 50 мл и водные объемы собирают вместе в перегонной колбе. Далее отгоняют с паром 200 мл дистиллята. Дистиллят переносят в делительную воронку, экстрагируют гексаном 3 раза (50:50:30 мл), встряхивая воронку не менее одной минуты. Гексановые фракции объединяют и промывают дистиллированной водой 3 раза по 100 мл. Отмытую гексановую фазу пропускают через безводный сульфат натрия в концентратор и упаривают при температуре не свыше 35 °C. К остатку в концентраторе добавляют 10 мл гексана и вводят в хроматограф 5 мкл пробы.

2.6.1.2 Хлопковое масло

Навеску 10 г масла помещают в делительную воронку и экстрагируют четыре раза ацетонитрилом (порциями 50, 25, 25 и 25 мл соответственно). Объединенный ацетонитрильный экстракт упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани не выше 35 °C.

Далее сухой остаток обрабатывают, как указано в разделе 2.6.1.1.

2.6.2 Условия хроматографирования

Газовый хроматограф «Цвет-550» с детектором постоянной скорости 10 рекомбинации ионов. Рабочая шкала электрометра — 16 x 10 . Скорость движения ленты самописца — 240 мм/час.

Колонка стеклянная длиной 3 м и внутренним диаметром 3 мм с 3% OV-17 на Инертоне-супер.

Температура: термостата колонок — 160 °C, термостата детекторов — 300 °C, термостата испарителя — 200 °C.

Расход газа-носителя (азот марки ОСЧ) — 30 мл/мин.

Абсолютное время удерживания — 5 мин. 10 сек.

Альтернативная фаза: 5% XE-60 на Инертоне-супер. Длина колонки — 2 м, внутренний диаметр — 3 мм.

Температура: термостата колонок — 190 °C, термостата детекторов — 300 °C, термостата испарителя — 230 °C.

Абсолютное время удерживания — 3 мин. 52 сек.

Объем пробы, вводимой в испаритель, — 5 мкл. Линейная зависимость сигнала детектора от количества вводимого вещества сохраняется в диапазоне 0,05 — 0,10 нг.

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание эталфлуралина в пробе рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                            H  x A x V x P
                             1

X = --------------, H x m x 100 0

где:

X — содержание гербицида в пробе, мг/кг;

H — высота пика стандарта, мм; 0

H — высота пика образца, мм; 1

A — концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

m — масса анализируемого образца, г;

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

---