Временные методические указания по определению соналена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами
(утв. Минздравом СССР 03.01.1985 № 3200-85)
3 января 1985 г. № 3200-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОНАЛЕНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ СОИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
1.1 Сонален.
1.1.1. 2,6-динитро-4-трифторметил-N-этил-N-(2-метил-2-пропенил)-анилин.
1.2 Структурная формула:
CF
│ 3
/ \
| O | Мол. масса 333,26. |
|---|
/ \ / \
| O № 2 | № O 2 |
|---|
CH =C-CH -N-C H
| 2 | 2 2 5 |
|---|
CH
3
1.3. Кристаллическое вещество желтого цвета. Растворимость в воде — 0,2 мг/л при 25 °С. Хорошо растворимо в жирах, органических растворителях, в том числе в ацетоне, ацетонитриле, хлороформе, метаноле, метиленхлориде, ксилоле, бензоле.
Малотоксичен для теплокровных. ЛД — более 2000 мг/кг. 50
Применяется для борьбы с сорной растительностью на посевах сои и хлопчатника.
2. Методика определения
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода.
Метод основан на извлечении соналена из воды и растительных проб гексаном, а из почвы — смесью гексан — ацетон (2:1). Экстракты обрабатывают концентрированной серной кислотой, в которую переходит сонален. При разведении кислоты водой в 30 раз и последующей переходит в дистиллят, из которого его извлекают гексаном. Количественное определение проводят с помощью газовой и/или тонкослойной хроматографии.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода.
Предел обнаружения: в воде — 0,001 мг/л (ГЖХ); 0,005 мг/л (ТСХ) в почве — 0,002 мг/кг (ГЖХ); 0,01 мг/кг (ТСХ) в зеленой массе — 0,01 мг/кг (ГЖХ); 0,05 мг/кг (ТСХ).
Р — размах варьирования, % 84,6 — 93,2 в воде 79,5 — 87,4 в почве _ 76,7 — 82,7 в зеленой массе
с — среднее значение определения, % 89,0 — в воде 83,5 — в почве 79,7 — в зеленой массе
S — стандартное отклонение, % 4,4 — в воде 4,1 — в почве 3,0 — в зеленой массе
2.1.3. Метод специфичен в присутствии ДДТ и линдана по времени удерживания и величине.
Определению мешает наличие в пробах трефлана.
2.2. Реактивы и растворы
н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Кислота серная, х.ч., удельный вес 1,84, ГОСТ 4204-76.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
Стандартные растворы соналена с концентрацией 0,2 — 2,0 мкг/мл.
2.3. Приборы и посуда
Газовый хроматограф серии Цвет-100, оснащенный детектором постоянной скорости рекомбинации, или аналог.
Пластинки для тонкослойной хроматографии «Силуфол».
Колбы грушевидные на шлифах КШ 50 29-32 ТС, ГОСТ 10394-72.
Колбы конические на шлифах КШ 50 29-32 ТС, ГОСТ 10394-72.
Делительные воронки ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.
Воронки конические, диаметр 5 см, ГОСТ 8613-81.
Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-75.
Микропипетки, ГОСТ 1770-74.
Лампа кварцевая ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.
Камеры для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.
Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.
Прибор для перегонки с водяным паром.
Микрошприцы МШ-10М, ТУ 2.833.106.
2.4. Подготовка к определению
Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия безводный прокалить при температуре 300 °С.
2.4.1 Отбор проб.
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Заместителем Главного государственного врача СССР, № 2051-79 от 21.08.79.
Для анализа отбирают 20 г растительной пробы, 100 г почвы и 200 мл воды.
2.5. Ход определения
2.5.1 Вода.
200 мл воды в делительной воронке экстрагируют трижды по 50 мл гексана. Собирают гексановый экстракт. Далее — по п. 2.5.4.
2.5.2 Почва.
100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в течение 3 — 5 часов 200 мл смеси ацетон — гексан (1:2). Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 — 15 мл гексана. К объединенному экстракту прибавляют 200 мл воды и верхний гексановый слой отделяют в делительной воронке. Далее — по п. 2.5.4.
2.5.3 Зеленая масса сои.
20 г измельченной растительной пробы экстрагируют гексаном на аппарате для встряхивания в течение 3 — 5 часов в конической колбе с притертой пробкой, используя 100 — 150 мл растворителя. Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 — 15 мл гексана и собирают гексановые фракции. Далее — по п. 2.5.4.
2.5.4 Перераспределение с концентрированной серной кислотой.
К объединенному гексановому экстракту добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и в течение 1 мин. встряхивают с осторожностью в делительной воронке. После этого нижнюю сернокислотную фазу переносят в дистиллированную воду, объем которой 150 — 200 мл. Полученный таким образом кислый раствор присоединяют к прибору для перегонки с водяным паром.
2.5.5 Перегонка с водяным паром.
Включают нагрев и собирают 50 — 70 мл дистиллята. Препарат экстрагируют из дистиллята трижды по 10 мл гексана. Гексановую фазу объединяют, осушают над безводным сульфатом натрия и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 35 °С до объема 3 — 5 мл.
2.5.6 Определение методом газовой хроматографии.
Условия хроматографического разделения: - стеклянная колонка 2 м х 3 мм с 5% OV-225 на Хроматоне супер (0,16 — 0,20 мм); - температура: термостата колонок — 190 °С
термостата детекторов — 250 °С
испарителя — 250 °С; - расход газа-носителя (аргон ОСЧ или высшего сорта) — 60 мл/мин. через колонку и 180 мл/мин. — на поддувку; -12 - рабочая шкала ИМТ-05 — 10 х 10 А; - линейный динамический диапазон 0,04 — 4,0 нг; - время удерживания — 3 мин.
2.5.7 Определение методом тонкослойной хроматографии.
Очищенный экстракт, полученный по п. 2.5.5, упаривают в токе воздуха до
0,5 - 1,0 мл и количественно переносят на пластинку "Силуфол". Хроматографирование проводят в системе гексан - ацетон (4:1). Препарат определяют визуально по желтой окраске в соответствии с R = 0,7.
f
2.6. Обработка результатов анализа
Содержание препарата при использовании метода ГЖХ вычисляется по формуле:
Н х V
где:
Х — содержание гербицида, мг/кг или мг/л;
К — калибровочный коэффициент, мм/нг;
V — объем анализируемой пробы, мл;
V — объем вводимой в хроматограф аликвоты, мкл; a
Содержание препарата при использовании метода ТСХ вычисляется по формуле:
m х S
2
где:
m — масса препарата, нанесенного на пластинку из стандартного раствора, мкг;
S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 2
S — площадь пятна пробы, кв. мм; 1
Р — масса или объем пробы, взятой на анализ, г или мл;
Х — содержание гербицида в анализируемой пробе, мкг/г, мг/кг или мг/л.
3. Требования безопасности
Необходимо соблюдать правила работы с токсическими соединениями II класса токсичности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители) и с сжатыми газами (аргон под давлением).
4. Разработчики
Настоящие Методические указания подготовлены И.Ш. Кофманом и А.А. Дубровской, Институт физиологии растений АН УССР, г. Киев.
5. Методика апробирована во ВНИИГИНТОКС (Гиренко Д.Б.) и ВНИИ эфиромасличных культур (Баранов Ю.С., Хилик Л.А.).