Временные методические указания по определению концентраций санмайта в воде хроматографическими методами

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6206-91)

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ САНМАЙТА В ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

         O

        CH   \\                                    C  H  ClN OS.
        │ 3    ─── Cl                               19 25   2
    H C-C───N/    \\

                                CH
                                  3

Санмайт — 4-хлор-2(1,1-диметилэтил-5///4-(1,1-диметилэтил/фенил/метил/тио-3(2H)-пиридазин — белое кристаллическое вещество с температурой плавления 111 — 112 °C. Легко растворим в ацетоне, хлороформе, растворим в спирте, бензоле, нерастворим в воде. Устойчив при комнатной температуре. Разлагается при сильном УФ-облучении.

2.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении санмайта из воды гексаном и дальнейшем хроматографировании препарата (ТСХ, ГЖХ).

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения, мг/л — 0,005.

Диапазон измеряемых концентраций, мг/л — 0,005 — 0,5.

Метод	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Относительное стандартное отклонение, %	Доверительный интервал среднего, %, при n = 5, P = 0,95
ГЖХ ТСХ	90,8 80,9	6,64 4,97	3,32 2,48	7,31 6,14

2.1.3 Избирательность метода

Определению не мешают наполнители технического препарата.

2.2. Реактивы, растворы, материалы

Ацетон, осч, 9-5 ТУ 6-09-3513-86.

Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Натрия сульфат безводный, чда, ГОСТ 4166-76.

Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкг/мл вещества.

Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более месяца.

Спирт этиловый, 96-процентный, ГОСТ 5962-81.

Универсальная индикаторная бумага, ТУ 6-09-1181-71.

К методу ГЖХ

Носитель для колонки — Хроматон N-AW с 5% SE-30.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74, в баллонах с редуктором.

К методу ТСХ

О-толидин, МРТУ 6-09-6332-75.

Кислота уксусная ледяная, хч, ГОСТ 18270-72.

Калия иодид, хч, ГОСТ 4232-74.

Калий марганцевокислый, хч, ГОСТ 20490-75.

Кислота соляная, хч, ГОСТ 3118-77.

Пластинки «Silufol» (Хемапол, ЧССР).

Подвижная фаза: ацетон — гексан 1:1.

Проявляющий реактив. Готовят раствор А: 0,2 г о-толидина растворяют в 2 мл уксусной кислоты. Раствор Б — 0,8 г иодида калия растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Растворы А и Б смешивают и доводят дистиллированной водой до 100 мл.

Раствор для хлорирования. На дно эксикатора помещают 2 — 3 г перманганата калия и добавляют 10 — 15 мл дистиллированной воды. Затем сюда же приливают 8 — 10 мл концентрированной соляной кислоты.

2.3. Приборы и посуда

Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Водяная баня, ТУ 64-1-425-72.

Колбы конические, емкостью 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 0,1 мл и 1 мл, ГОСТ 20292-74.

Воронки химические, ГОСТ 25336-82.

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.

К методу ГЖХ

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (типа «Цвет», «Газохром» или др.).

Микрошприц МШ-10, ТУ 283-3-106.

Колонка хроматографическая, стеклянная, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм.

К методу ТСХ

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1 Отбор проб

Отбор проб осуществляется в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Минздравом СССР, № 2051-79 от 21.08.79.

2.5. Проведение определения

2.5.1 Экстракция и очистка

Пробу анализируемой воды объемом 500 мл (pH воды равен 7 по универсальной индикаторной бумаге) помещают в делительную воронку на 1000 мл и экстрагируют санмайт дважды гексаном порциями по 30 мл. Водно-гексановую смесь в воронке встряхивают в течение 5 мин. Для лучшего расслаивания водной фазы и растворителя в воронку пипеткой вносят 1 мл 96-процентного этилового спирта. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия (примерно 1 столовая ложка) и отгоняют растворитель до объема 0,2 — 0,3 мл.

2.5.2 Определение методом ГЖХ

Остаток растворителя тщательно удаляют в токе воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в хроматограф 4 мкл.

Условия хроматографирования

Длина колонки — 1 м.

Диаметр колонки — 3,5 мм.

Твердый носитель Хроматон N-AW.

Жидкая фаза — 5% SE-30.

Температура колонки — 220 °C.

Температура испарителя — 240 °C.

Температура детектора — 260 °C.

Газ-носитель — азот.

Скорость потока газа-носителя — 60 мл/мин.

Скорость диаграммной ленты — 240 мм/ч.

Объем вводимой пробы — 4 мкл.

Время удерживания — 5 мин.

Нижний предел детектирования — 1 нг.

Количественное определение проводят методом расчета по соотношениям высота пика — концентрация. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 4 мкл стандартного раствора, измеряют высоты пиков и вычисляют среднее арифметическое из 3-х определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (4 мкл) конечного экстракта его концентрация превышает линейный диапазон детектирования, пробу разбавляют.

Концентрацию препарата (X) в мг/л воды вычисляют по формуле:

                       C   x V   x h   x V
                        ст    ст    пр    общ

X = ----------------------,

                           V   x h   x P
                            пр    ст

где:

C — концентрация санмайта в стандартном растворе, введенном ст в хроматограф, мкг/мл;

V — объем пробы стандарта, введенный в хроматограф, мкл; ст

h — высота пика пробы, мм; пр

V — общий объем пробы, мл; общ

V — объем пробы, введенный в хроматограф, мкл; пр

h — высота пика стандарта, мм; ст

P — навеска пробы, мл.

2.5.3 Определение методом ТСХ

    Раствор   пробы  после  упаривания  с  помощью  капилляра  или
микропипетки  количественно  наносят  на  пластинку "Silufol" так,
чтобы  диаметр  пятна  не  превышал  1  см.  Стенки  колбы смывают
несколькими  каплями  растворителя, который наносят в центр пятна.
Рядом  с  пробой наносят стандартные растворы, содержащие 1, 2, 5,
10    мкг    препарата,    после   чего   пластинку   помещают   в
хроматографическую    камеру.    После    подъема   фронта   смеси
растворителей  ацетон:гексан  1:1  на 10 см  пластинку вынимают из
камеры,  сушат  на  воздухе,  помещают в эксикатор с раствором для
хлорирования  (на  5  мин.).  Пластинку  вынимают  из  эксикатора,
выдерживают  на  воздухе  до  полного выветривания хлора (больше 1
часа)  и опрыскивают проявляющим раствором - раствором о-толидина.

Препарат проявляется в виде темно-фиолетового пятна. Нижний предел обнаружения — 1 мкг. Величина R = 0,58. f

Концентрацию санмайта (X) в воде в мг/л вычисляют по формуле:

                              A

X = -, P

где:

A — количество санмайта, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

3. Требования безопасности

Выполняются в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противопожарного режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР», № 2255-81 от 20.10.81.

---