Методические указания по определению остаточных количеств N-окиси-2,6-лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6179-91)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ N-ОКИСИ-2,6-ЛУТИДИНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ ЛЮЦЕРНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Торговое название: Люцис.

Люцис — комплекс N-оксида-2,6-лутидина и янтарной кислоты с молибденовокислым аммонием — композиционная смесь в соотношении 99:1 соответственно.

Производитель препарата: Молдова.

Структурная формула комплекса N-оксида-2,6-лутидина с янтарной кислотой:

      /\\      COOH

       N    3  COOH

       O

М.м. 241,24.

    Эмпирическая формула C  H  NO .
                          11 15  5

Содержание основного вещества — 99,8%.

Растворимость — легко растворим в воде, спирте.

Молибденовокислый аммоний по структурной формуле:

    (NH ) Mo O   x 4H O                       М.м. 1236,0.
       4 6  7 24     2

Содержание основного вещества — 99,9%.

Растворимость — вода.

ОДК в почве — 0,01 мг/кг, ПДК в воде водоемов — 0,05 мг/кг, МДУ в продуктах — не допускается.

Люцис рекомендован для применения в качестве регулятора роста растений путем опрыскивания.

Расход рабочего раствора 300 л/га, концентрация 0,001%.

Препарат устойчив в течение года при соблюдении условий хранения.

2. Методика определения остаточных количеств люциса в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на получении N-окси-2,6-диметилпиридина, экстрагировании последнего бензолом и последующем определении методом тонкослойной хроматографии.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Минимально детектируемое количество — 0,07 мкг.

Диапазон определяемых концентраций:

вода — 0,0006 — 0,05 мг/л;

почва — 0,01 — 0,3 мг/кг;

люцерна — 0,005 — 0,3 мг/кг.

Среднее значение определения:

вода — 83 — 98%;

почва — 78 — 89%;

люцерна — 90 — 95%.

Граница суммарной погрешности, %:

вода — +/- 11,0;

почва — +/- 14,0;

люцерна — +/- 12,0.

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Бензол, ГОСТ 5955-75.

Бутанол-1, ГОСТ 6006-78.

Гидроксид калия СТЕВ 1439-78 (УССР).

Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

Соляная кислота, ГОСТ 3118-78.

Уксусная кислота, ГОСТ 61-75.

Этиловый спирт, ГОСТ 5962-67.

Алюминия окись.

Хроматографические пластинки «Силуфол» UV 254, ЧССР, размер 150 x 150 и 200 x 200 мм.

2.3. Приборы, посуда и аппаратура

Весы технические.

Весы аналитические 2 кл., ГОСТ 19401-74.

Колбы плоскодонные на 250 и 100 мл, ГОСТ 10054-75.

Колбы круглодонные на 250 и 100 мл, ГОСТ 9737-70.

Колбы остродонные на 50 мл, ГОСТ 23932-79.

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические на 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки мерные 8-2-1; 8-2-2; 8-2-5; 8-2-10, ГОСТ 20292-74.

Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20-292-74.

Микрошприц на 10 мкг и 1 мкг МШ-20.

Пробирки конические, градуированные на 5 мл, ГОСТ 1770-74.

Стеклянный фильтр ХУ-1 пор. 41, ГОСТ 20292-74.

Вакуумный насос, ГОСТ 10696-75.

Колонка стеклянная, ГОСТ 23932-79.

Электроплитка, ТУ 92-275-76.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-33, или аналогичный.

Хроматоскоп.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.

Воронки химические, ГОСТ 10396-65.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 23-11-317-33.

Чашки фарфоровые.

Водоструйный насос, ГОСТ 23932-79.

2.4. Отбор проб

Пробы для анализа отбираются в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за № 2051-79.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Подготовка пластинок и хроматографической камеры

Подготовить пластинки «Силуфол» UV 254 размером 5 x 10.

Хроматографическую камеру за 1 час до начала хроматографирования заполнить подвижной фазой до уровня 0,5 — 0,7 см.

2.5.2 Приготовление стандартных растворов

Стандартные растворы люциса в этиловом спирте. 0,1 г люциса переносят и растворяют этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Рабочие растворы готовят разбавлением полученного 0,1% раствора. На хроматограмму наносят: 0,001% (0,01 мг/мл) раствор — 0,1 мл (1 мкг); 0,01 мл (0,1 мкг), 0,0001% (0,001 мкг/л) раствор — 0,5 мл (0,5 мкг); 0,1 (0,1 мкг); 0,05 мл (0,05 мкг).

2.6. Проведение определения

2.6.1 Экстракция и очистка экстрактов

2.6.1.1 Вода

150 — 200 мл воды подщелачивают гидроксидом калия (натрия) до pH 7,5 — 8. Переносят в делительную воронку через бумажный фильтр. Смывают колбу и одновременно фильтр водой (2 раза по 2 мл). Экстрагируют бензолом (3 раза по 10 мл). Фильтруют бензольный раствор через окись алюминия (колонка 50 х 15 мм), промывают колонку 2 мл бензола. Объединяют с фильтратом и упаривают в остродонной колбе до объема 0,2 — 0,3 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку. Рядом наносят такие же объемы стандартных растворов, содержащие 0,05 — 0,2 мкг люциса.

2.6.1.2 Почва

20 — 25 г почвы помещают в коническую колбу, заливают 50 — 60 мл подщелоченной дистиллированной воды (pH 7,5 — 8,0), встряхивают несколько минут и оставляют на 16 — 18 часов (на ночь). Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр, промывают почву водой по 10 мл 2 раза, объединяют с экстрактом, переносят в делительную воронку через воронку с бумажным фильтром, смывая колбу и воронку 2 мл воды, и экстрагируют люцис бензолом (3 раза по 5 мл). Экстракт фильтруют через окись алюминия и переносят в остродонную колбу. Упаривают до объема 0,2 — 0,3 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку. Рядом наносят стандартные растворы.

2.6.1.3 Растения люцерны

20 г образца измельчают, переносят в коническую колбу и заливают 100 мл подщелоченной воды. Встряхивают в течение 1 часа, фильтруют и проводят определение, как в почве.

2.6.2 Условия хроматографирования

    Пластинку   с   нанесенными   анализируемыми   пробами  и  стандартными
растворами  помещают  в  хроматографическую  камеру  с  подвижной  фазой, в
качестве  которой  служит смесь бутанол-1:уксусная  кислота и вода (7:3:1).
Когда  растворитель  поднимется  на  5 см, пластинку вынимают и помещают на
водяную  баню  на 1 час до удаления запаха кислоты, сушат на воздухе. После
удаления  растворителя  просматривают  пластинку  под  хроматоскопом. Люцис
обнаруживается в виде фиолетового пятна на светлом фоне, R  = 0,48.

                                                      f

2.7. Обработка результатов анализа

Количественное определение люциса проводят сравнением размеров пятен хроматографируемой пробы и стандартных растворов. Для расчета содержания люциса в анализируемой пробе выбирают пятно стандарта, наиболее близкое по размерам к пятну пробы.

Содержание препарата в пробе, мг/кг, рассчитывают по формуле:

                            A x S  x 1000
                                 2

X = -------------, S x P 1

где:

A — содержание препарата в стандарте, мкг;

S — площадь пятна стандарта, кв. мм; 1

S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2

3. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые для работы с химическими реактивами и пестицидами.