Методические указания по определению феноксапроп-этила (фуроре-супер) в воде, почве, зеленой массе пшеницы хроматографическими методами
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "Методические указания по определению феноксапроп-этила (фуроре-супер) в воде, почве, зеленой массе пшеницы хроматографическими методами". 6172-91. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6172-91
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6172-91)
29 июля 1991 г. № 6172-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНОКСАПРОП-ЭТИЛА (ФУРОРЕ-СУПЕР) В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ ПШЕНИЦЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Фуроре-супер — пума-супер. Хое 046360.
Химическое название: (D+)-этил-(4-(6-хлор-2-бензоксазолилокси)фенокси)-пропионат.
N CH
| // \ ___ / \\ 2 5 18 16 5 |
Cl O М.м. 361,8. Бесцветное кристаллическое вещество, температура плавления 84,5 °C, растворимость в воде 0,7 мг/л, растворим в этаноле, н-гексане, циклогексане, легко растворим в ацетоне, толуоле,
-9
этилацетате. Давление паров при 20 °C 5,3 x 10 гПа; летучесть -5
при 20 °C 7,8 x 10 мг/куб. м. Основной метаболит фуроре - (D+)-2-(4-(6-хлор-2-
бензоксазолилокси)фенокси)-пропионовая кислота (Хое 088406).
N CH
| / \ ___ / \\ 16 12 |
Cl O М.м. 333,7. Продукт гидролиза фуроре - 6-хлор-2,3-дигидробензоксазол-2-он
(Хое 054014).
H
│ C H ClNO .
N 7 4 2
// \ /\\
| \C=O М.м. 169,6. / |
|---|
/\\ / \ /
Cl O Хроматографируемое ГЖХ производное фуроре - 3-ацетил-6-хлор-
2,3-дигидробензоксазол-2-он (Хое 083312).
H C-C=O
| 3 | C H ClNO . |
|---|
N 9 6 3
// \ /\\
| \C=O М.м. 211,6. / |
|---|
/\\ / \ /
Cl O
2. Методика определения фуроре-супер в окружающей среде
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Определение основано на извлечении препарата органическими растворителями, очистке экстрактов активированным углем и последующем анализе методом реакционной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) на неподвижной фазе XE-60 с детектором по захвату электронов (ДЭЗ или ДПР) или хроматографировании в тонком слое (ТСХ) пластинок «Силуфол» с обнаружением препарата по реакции с 2,6-дибром-N-хлорхинонимином или бромфеноловым синим.
2.1.2 Метрологическая характеристика
Метрологическая характеристика определения фуроре приведена в таблице 2.1.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРОРЕ
ТОНКОСЛОЙНОЙ И РЕАКЦИОННОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
(P = 0,95, N = 5 — 7)
| Исследуемый объект | Метод | Предел обнаружения, мг/л, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандарт. отклонение, % | Доверительный интервал, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Вода -«-» | ТСХ ГЖХ | 0,0005 0,0025 | 90 72 | 9,3 5,4 | 14,9 5,7 |
| Почва -«-» | ТСХ ГЖХ | 0,05 0,05 | 84 75 | 12,6 8,1 | 17,3 13,0 |
| Зеленая масса растений | ТСХ | 0,1 | 91 | 17,1 | 21,4 |
| Пшеница | ТСХ | 0,2 | 84 | 12,7 | 8,5 |
2.1.3 Избирательность метода
Рекомендуемые в методике условия очистки экстрактов, применение метода ТСХ с избирательным проявляющим реагентом 2,6-дибром-N-хлорхинонимином или метода реакционной ГЖХ дают возможность идентифицировать исследуемое соединение в присутствии хлор-, фосфорсодержащих пестицидов, триазинов, производных фенилмочевины, синтетических пиретроидов.
2.2. Реактивы и растворы
Хлороводородная кислота, хч, ГОСТ 3118-77, концентрированная.
Активированный уголь марки ОУ-«А».
Натрия сульфат безводный, хч, ГОСТ 4166-81.
Фильтры бумажные беззольные «красная лента», ТУ 6-09-1678-77.
Фильтры бумажные беззольные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77.
Основной стандартный раствор фуроре-супер (ОСР): 10 мг фуроре-супер растворяют в 100 мл ацетона (100 мкг/мл). Хранить в холодильнике не более 3-х месяцев.
Неподвижная фаза 3% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS.
Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллоне с редуктором.
Трифторуксусный ангидрид, ТУ 6-09-4135-75.
Пиридин, ч, ГОСТ 13647-78.
Рабочие стандартные растворы фуроре-супер 10, 5, 2 мкг/мл готовят разведением ОСР ацетоном. Хранить в холодильнике не более 2-х недель.
Хроматографируемое производное фуроре (Хое 083312), хч.
Основной стандартный раствор Хое 083312 100 мкг/мл в ацетоне.
Рабочие стандартные растворы Хое 083312 2, 1, 0,5 мкг/мл готовят разведением ОСР раствора Хое 083312 ацетоном. (При отсутствии Хое 083312 стандарт хроматографируемого производного фуроре готовят одновременно с анализируемым образцом, гидролизуя и ацилируя рабочие стандартные растворы фуроре.)
Стандартные пластинки «Силуфол» (Хемапол, Чехословакия) или отечественные пластинки «Армсорб».
Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-3719-83.
Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-81.
Кислота лимонная, ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор (или уксусная ледяная кислота, хч, ГОСТ 18270-72, 10-процентный водный раствор).
2,6-дибром-N-хлорхинонимин, хч, ТУ 6-09-06-951-79.
Едкое кали, ч, ГОСТ 9285-78.
1. Реагент на основе бромфенолового синего (БФС): в 10 мл ацетона растворяют 0,05 г БФС и доводят до 100 мл 1-процентным раствором нитрата серебра в водном ацетоне (ацетон — вода 3:1). Хранят в темной склянке.
Через 5 мин. после опрыскивания хроматограмму обрабатывают 2-процентным раствором лимонной или 10-процентным раствором уксусной кислоты.
2. Реагент на основе 2,6-дибром-N-хлорхинонимина: пластинку после хроматографирования нагревают в течение 10 мин. при 150 °C, a затем опрыскивают свежеприготовленным 0,5-процентным раствором 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в н-гексане и сразу же обрабатывают 0,5-процентным водным раствором едкого кали.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
Баня водяная электрическая, ТУ 64-1-2850-76.
Весы аналитические лабораторные, ГОСТ 19491-74.
Весы технические ВЛКТ-500 г М.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.
Колбы грушевидные на шлифах емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы плоскодонные конические емкостью 50, 100, 250 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы мерные емкостью 100, 250 мл, ГОСТ 1770-74.
Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Воронки делительные емкостью 250, 500 мл, ГОСТ 8613-81.
Воронки химические, 0,60 мм, ГОСТ 8613-81.
Пипетки емкостью 0,1, 1, ГОСТ 1770-74.
Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71.
Газовый хроматограф серии «Цвет» или аналогичный с ДЭЗ (ДПР).
Колбонагреватели для круглодонных колб (50 мл) или электроплита с закрытой спиралью и терморегулятором.
Холодильник Либиха 200 — 400 мм, ГОСТ 9499-70.
Колбы грушевидные емкостью 25, 50 мл, ГОСТ 10394-72.
Пробирки мерные емкостью 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74.
Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 см.
Термометр ртутный на 200 °C, ГОСТ 16590-71.
Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-74, или аналогичная.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Камера для опрыскивания — колпак для насосов с кнопкой диаметром 160 — 200 мм, высотой 220 мм, ТУ 25-11-1022-75.
2.4. Проведение определения
2.4.1 Отбор проб
Отбор проб производят в соответствии с требованиями, изложенными в «Унифицированных правилах отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденных заместителем Главного государственного санитарного врача СССР (N 2051-79 от 21.08.79).
2.4.2 Экстракция
2.4.2.1. Вода. 200 мл воды помещают в делительную воронку, подкисляют концентрированной хлористоводородной кислотой до pH = 4 — 5 и экстрагируют фуроре-супер хлороформом, предварительно насыщенным водой, 3 раза по 30 мл, осторожно встряхивая по 3 — 4 минуты. Объединенный хлороформный экстракт отфильтровывают в колбу для отгонки растворителей через обезжиренный ватный тампон (или бумажный фильтр «красная лента») с помещенным на него слоем безводного сульфата натрия (15 г). Отгоняют хлороформ на ротационном испарителе под вакуумом при температуре водяной бани не более 45 °C до ~= 0,5 мл. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Далее проводят определение, как описано в п. 2.4.3.
2.4.2.2. Почва. 50 г почвы помещают в коническую колбу, заливают 100 мл ацетона и экстрагируют 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр «красная лента» в делительную воронку емкостью 500 мл. Экстракцию повторяют дважды с 30 мл растворителя в течение 15 мин., экстракты объединяют в делительной воронке.
Для очистки к полученному ацетоновому экстракту приливают дистиллированной воды (по объему примерно в два раза больше, чем объем экстракта) и экстрагируют препарат хлороформом трижды по 50, 30, 30 мл, осторожно встряхивая 3 — 4 мин.
Объединенный хлороформный экстракт отфильтровывают в колбу для отгонки растворителей через обезжиренный ватный тампон (или бумажный фильтр «красная лента») с помещенным на него слоем безводного сульфата натрия (15 г) и концентрируют на ротационном вакуумном испарителе до 0,5 мл. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Далее проводят очистку активированным углем, как описано в п. 2.4.2.3.
2.4.2.3 Растительный материал (зеленая масса пшеницы)
Измельченные листья или зеленые колоски пшеницы (20 г) экстрагируют 50 мл смеси гексан — ацетон 9:1 в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе и проводят очистку активированным углем.
Для проведения очистки сухой остаток растворяют в 10 мл смеси бензол — ацетон 1:3 и добавляют 0,1 г активированного угля, хорошо перемешивают. Колбу опускают в стакан с горячей водой (60 °C) на 20 мин., затем раствор отфильтровывают через фильтр «красная лента» в колбу для отгонки растворителей. Уголь дважды промывают смесью бензол — ацетон 1:3 по 5 мл, присоединяют смывы к фильтрату. Объединенный фильтрат упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не более 40 °C.
2.4.2.4. Пшеница. Из измельченного до 1 — 2 мм зерна (навеска 25 г) экстрагируют смесью ацетон — вода (1:1) на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Дают отстояться 15 — 20 мин. и сливают растворитель, фильтруя через фильтр «красная лента». Промывают пробу дважды смесью ацетон — вода (1:1) по 20 мл, энергично встряхивая и давая отстояться по 20 мин. Объединяют отфильтрованные экстракт и смывы, переносят в делительную воронку и прибавляют 80 мл воды. Экстрагируют гексаном трижды по 50 мл, сливая верхний (гексановый) слой через безводный сульфат натрия (10 — 15 г на фильтровальной воронке с обезжиренной ватой) в колбу для отгонки. Упаривают растворитель под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °C до ~= 0,5 мл, остаток упаривают досуха при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, берут аликвоту (0,1 — 0,2 мл) и проводят определение методом ТСХ, как описано в п. 2.4.3.1.
2.4.3 Хроматографический анализ
2.4.3.1 Определение методом ТСХ
Полученный после упаривания сухой остаток растворяют в 1,0 мл ацетона или диэтилового эфира, аликвоту этого раствора (0,1 мл) количественно наносят на хроматографическую пластинку. Справа и слева от пробы наносят рабочие стандартные растворы фуроре (0,2 - 15 мкг). Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, в которую за 30 мин. до хроматографирования наливают смесь
растворителей н-гексан — ацетон 3:1. После того как подвижная фаза
поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры, дают растворителю испариться и обрабатывают либо проявляющим реагентом N 1 (на основе БФС), либо реагентом N 2 (на основе 2,6-дибром-N-хлорхинонимина). Фуроре и его кислотное производное проявляются обоими реагентами в виде голубых пятен. R фуроре 0,6
f
(идет с фронтом), R кислотного производного фуроре 0,3. f
Реагент № 2 специфичнее и чувствительнее реагента № 1. Предел обнаружения препарата реагентом № 1 — 1 мкг, реагентом № 2 — 0,2 мкг на пластинке.
Количество фуроре в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятна пробы и стандарта. Пропорциональная зависимость между концентрацией и площадью пятна соблюдается в интервале 0,2 — 20 мкг.
Содержание фуроре (X) в пробе вычисляют по формуле:
A x V
X — количество фуроре в пробе, мг/кг (мг/л);
A — количество фуроре, найденное путем сравнения со стандартными растворами препарата, мг;
V — общий объем анализируемой пробы, мл;
P — масса пробы, взятой для анализа, кг (л).
2.4.3.2 Определение методом реакционной ГЖХ
Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, отбирают аликвоту <*> (0,1 — 0,5 мл), прибавляют 1 мл трифторуксусного ангидрида, 100 мкл пиридина, присоединяют колбу к обратному холодильнику и нагревают в течение 3 часов на колбонагревателе при температуре 130 °C. Затем отсоединяют колбу от холодильника и после того, как она остынет, отдувают остаток ангидрида током азота. К остатку в колбе прибавляют 1 мл бензола, 9 мл дистиллированной воды и переносят все в мерную пробирку. Для анализа методом ГЖХ отбирают аликвоту (1 — 3 мкл) из верхнего бензольного слоя.
<*> Примечание: при определении в воде берут всю пробу.
Измерения проводят на хроматографе с ДЭЗ (ДПР).
Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 мм.
Фаза 3% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS.
Температура колонки — 160 °C, испарителя — 200 °C, детектора — 230 °C.
Скорость газа-носителя азота 65 мл/мин.
Скорость продувочного газа (ДПР) азота 150 мл/мин. -12
Рабочая шкала электрометра 2 x 10 .
Скорость диаграммной ленты 240 мм/час.
Объем вводимой пробы 1 — 3 мкл.
Линейный диапазон определения 0,2 — 10 нг.
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте хроматографируемого пика.
Содержание фуроре в пробе рассчитывают по формуле:
C x V x H x V
ст ст пр пр
H x V x P
ст a
X — содержание фуроре в пробе, мг/кг (мг/л);
C — содержание вещества в стандарте, мкг/мл; ст
V — объем стандарта, введенный в хроматограф, мкл; ст
V — общий объем анализируемой пробы, мл; пр
V — объем анализируемой пробы, введенный в хроматограф, мкл; a
H — высота пика стандарта, мм; ст
H — высота пика анализируемой пробы, мм; пр
3. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и токсическими веществами.