Методические указания по определению рамрода, лассо и дуала в воде, почве и растительных пробах хроматографией в тонком слое
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 2998-84)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
27 апреля 1984 г. № 2998-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РАМРОДА, ЛАССО И ДУАЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНЫХ ПРОБАХ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ
1. Краткая характеристика препаратов
1.1 Рамрод
1.1.1 N-изопропил-2-хлорацетанилид — пропахлор.
1.1.2 Структурная формула (не приводится).
1.1.3 Синонимы: пропахлор, нитицид, ацилид.
1.1.4. Белое кристаллическое вещество, трудно растворимое в воде, хорошо — в бензоле, ацетоне, хлороформе, спирте, эфире, гексане. Температура плавления — 70 — 72 °C.
Рамрод малотоксичен для теплокровных. ЛД при оральном введении для 50 крыс — 1200 мг/кг, кроликов — 710 мг/кг.
Разрешен к применению в виде 65% смачивающегося порошка на капусте, луке, чесноке, брюкве, турнепсе.
МДУ в капусте и других овощах (кроме картофеля) — 0,2 мг/кг, растительных пищевых продуктах — 0,05 мг/кг. ПДК в воде — 0,01 мг/л.
1.2 Лассо
1.2.1. 2-Хлор-2',6'-диэтил-N-метоксиметилацетанилид — алахлор.
1.2.2 Структурная формула (не приводится).
1.2.3 Синонимы: алахлор, лассо, худор.
1.2.4. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 40 — 41 °C. Трудно растворим в воде, хорошо — в ацетоне, бензоле, спирте этиловом, хлороформе, этилацетате.
Разрушается в сильных кислотах и щелочах.
Относится к малотоксичным соединениям. ЛД для крыс — 1200 — 1500 50 мг/кг при оральном введении.
Выпускается в виде концентрата эмульсии и гранулятов.
1.3 Дуал
1.3.1. 2-Этил-6-метил-N-(1-метил-2'-метоксиэтил)-хлорацетанилидметолахлор.
1.3.2 Структурная формула (не приводится).
1.3.3 Синоним: ЦГА 24705.
1.3.4. Бесцветная жидкость с температурой кипения 100 °C. Растворимость в воде — 5 мг/л (20 °C). Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.
Разрушается в сильных кислотах и щелочах.
Малотоксичен для теплокровных животных. ЛД при оральном введении для 50 крыс — 3170 мг/кг.
Разрешен для опытно-производственного применения в виде 50% концентрата эмульсии на посевах свеклы, сои, клещевины.
2. Методика определения
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении гербицидов из растительных проб, почвы и воды органическим растворителем, очистке экстрактов осаждением коэкстрактивных веществ и перераспределением в системе двух несмешивающихся фаз. Количественное определение производят методом хроматографии в тонком слое. Минимально детектируемое количество — 2 - 4 мкг препаратов в анализируемой пробе. Нижний предел определения 0,02 — 0,<...> мг/кг почвы и растений, 0,02 мг/л воды.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
рамрод лассо дуал растения 84,6 - 92,3 89,5 - 93,7 86,0 - 91,5 почва 93,7 - 97,3 90,1 - 96,7 92,5 - 97,5 вода 94,5 - 98,7 92,6 - 97,8 95,5 - 99,7
_ C — среднее значение определения, %
рамрод лассо дуал растения 88,4 91,6 85,5 почва 94,6 92,3 95,0 вода 96,7 94,8 97,7
_
рамрод лассо дуал растения 3,7 3,2 2,5 почва 3,4 2,6 2,5 вода 2,7 2,8 2,4
Доверительный интервал при P = 0,95 и n = 5
рамрод лассо дуал растения 88,4 +/- 3,7 91,6 +/- 3,2 85,5 +/- 2,5 почва 94,6 +/- 3,4 92,3 +/- 2,6 95,0 +/- 2,5 вода 96,7 +/- 2,7 94,8 +/- 2,8 97,7 +/- 2,4
Метод специфичен в присутствии ДДТ и линдана по R . f
2.2. Реактивы и растворы
Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.
Бензол чда, ГОСТ 5955-75.
Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Аммоний хлористый хч, ГОСТ 3773-72.
Кислота ортофосфорная ч, ГОСТ 6552-80.
Пластинки «Силуфол», «Хемапол», ЧССР.
Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-64.
Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-76.
Серебро азотнокислое хч, ГОСТ 1277-75.
Четыреххлористый углерод, ТУ 6-09-2663-77.
Стандартные растворы гербицидов в хлороформе с содержанием по д.в. 100 мкг/мл.
Коагулирующий раствор. 5 г хлористого аммония растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят до 1 л дистиллированной водой.
Проявляющий реактив. 0,5 г азотнокислого серебра, 5 мл дистиллированной воды и 2 мл 25-процентного водного аммиака доводят в мерной колбе на 100 мл.
2.3. Приборы и посуда
Колбы конические на шлифах КШ-500 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.
Колбы грушевидные ОКТ-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72.
Делительные воронки ВД-3-800, ГОСТ 8613-75.
Воронки конические, диаметр 5 см.
Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
Ротационный испаритель ИР-1M, ТУ 25-11-917-74.
Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-74.
Микропипетки, ГОСТ 1770-74.
Камера для опрыскивания, ГОСТ 11413-70.
Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1 Подготовка реактивов
Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 — 400 °C.
2.4.2 Отбор проб
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, № 2051-79 от 21.08.79.
На анализ отбирают 25 — 30 г растительной пробы, 100 г почвы и 20 мл воды.
2.5. Ход определения
2.5.1 Вода
200 мл воды в делительной воронке экстрагируют трижды по 80, 60, 50 мл хлороформом. Объединенный хлороформенный экстракт осушают сульфатом натрия б/в и отгоняют хлороформ на ротационном испарителе при температуре не выше 50 °C.
2.5.2 Почва
100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в течение 2 часов 100 мл хлороформа. Растворитель отфильтровывают через складчатый фильтр слоем безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10 — 15 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 50 °C.
2.5.3 Растительный материал
25 — 50 г измельченной растительной пробы экстрагируют хлороформом в течение 2 часов на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через слой безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10 — 15 мл. Объединенный экстракт отгоняют досуха на ротационном испарителе при температуре 50 °C. Сухой остаток растворяют в 3 мл охлажденного ацетона и прибавляют 25 — 30 мл охлажденной коагулирующей смеси. Колбу помещают на 30 — 40 мин. в холодильник, после чего содержимое отфильтровывают через плотный бумажный фильтр в делительную воронку. Препараты экстрагируют трижды н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают досуха при температуре не выше 50 °C.
2.5.4 Хроматографирование
К сухому остатку прибавляют 0,1 — 0,2 мл хлороформа и наносят образцы на хроматографическую пластинку «Силуфол». Стенки колбы ополаскивают несколькими каплями растворителя и наносят в центр пятна.
Хроматографирование проводят в системе четыреххлористый углерод - эфир (3:2). После этого пластинка высушивается от растворителей и опрыскивается
проявляющим реактивом. После облучения под УФ-лампой в течение 10 — 15 мин. препараты проявляются в виде темно-серых пятен. R рамрода — 0,42 +/- 0,03; f
R дуала - 0,50 +/- 0,03; R лассо - 0,61 +/- 0,04. f f
Для дополнительной очистки можно использовать двумерную хроматографию. В качестве первой системы подвижных растворителей используется четыреххлористый углерод, а второй — смесь четыреххлористого углерода — эфира (3:2).
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен проб и стандартных растворов.
Содержание препаратов вычисляется по формуле:
m x S
2
X = ------ мг/кг, мг/л, A x S 1
m — масса препарата, нанесенного на пластинку из стандартного раствора, мкг;
S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1
S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2
2.7. Требования безопасности
Соблюдать правила работы с токсическими соединениями II класса опасности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители) и УФ-светом.
2.8. При необходимости дополнительной идентификации и определения содержания лассо в количествах, меньших 0,02 — 0,04 мг/кг, используют «Временные методические указания по определению микроколичеств лассо в почве и зеленой массе кукурузы методом хроматографии в тонком слое» № 2997-84, принцип определения которых основан на гидролитическом расщеплении лассо до 2,6-диэтиланилина и детектировании последнего по реакции азосочетания с 1-нафтолом в тонком слое силикагеля.