Изменение № 2 ГОСТ Р 51600-2000 «Молоко. Методы определения наличия антибиотиков»
(утв. и введено в действие Приказом Ростехрегулирования от 23.01.2008 № 1-ст)
Примечание
Документ введен в действие с 1 июля 2008 года.
Утверждено и введено в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 23 января 2008 г. № 1-ст
ИЗМЕНЕНИЕ № 2 ГОСТ Р 51600-2000
«МОЛОКО. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯ АНТИБИОТИКОВ»
Утверждено и введено в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23.01.2008 № 1-ст.
Раздел 1. Заменить слова: «иммуноферментный» на «рецепторные».
Раздел 2 дополнить ссылкой: «ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой».
Подпункт 4.2.1 после слова «Термостат» дополнить словами: «или блок термостатируемых ячеек».
Пункт 4.2 дополнить подпунктами — 4.2.10, 4.2.11:
«4.2.10. Тестовый набор "CopanTest®" — комплект, включающий герметично укупоренные пробирки, собранные в блоки, и содержащие споры Bac. stearothermophilus var. calidolactis, помещенные в агар с питательными веществами и индикатором бромкрезолпурпуром; пипетки мерные вместимостью 0,1 см3 одноразового использования и цветовую шкалу [3].»
4.2.11. Пипетки вместимостью 0,1 см3 для отбора образцов молока для исследования по ГОСТ 29169«.»
Подпункты 4.4.2, 4.4.4 изложить в новой редакции:
«4.4.2. Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока необходимое число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют. Оставшиеся ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.»
4.4.4 Подготовка к анализу ампул или пробирок — по 4.2.9 или 4.2.10.
Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока необходимое число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют. Оставшиеся ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C».
Пункт 4.5 изложить в новой редакции:
4.5.1 Проведение анализа с использованием ампул "Delvotest®SP" , "Delvotest®SP - NT" или "Delvotest®SPMINI - NT"
4.5.1.1. Соединительной частью шприца прокалывают укупорку ампул по 4.2.3 или 4.2.9.
4.5.1.2. В каждую открытую ампулу по 4.2.3 пинцетом помещают по одной таблетке питательной среды "Delvotest®SP" , взятой из колпачка бутылочки по 4.4.3. Затем бутылочку плотно закрывают колпачком и хранят при температуре (20 +/- 2) °C.
4.5.1.3. Шприцем-дозатором отбирают 0,1 см3 анализируемого молока и вносят в каждую ампулу по 4.5.1.2 или 4.2.9. Для каждой пробы анализируемого молока используют новый наконечник. Оставшееся молоко сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.
4.5.1.4. Ампулы помещают в термостат и выдерживают при температуре (64,0 +/- 0,5) °C в течение 3 ч.
4.5.2 Проведение анализа с использованием тестового набора "CopanTest®"
4.5.2.1. Одноразовой мерной пипеткой отбирают 0,1 см3 анализируемого молока и вносят в пробирку с приоткрытой фольгой по 4.2.10. Оставшееся молоко сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.
4.5.2.2. Пробирки с анализируемым молоком закрывают фольгой и помещают в блок термостатируемых ячеек и выдерживают при температуре (64,5 +/- 0,5) °C в течение 3 ч.
4.5.2.3. Контрольное определение проводят в соответствии с 4.5.1, 4.5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно восстановленного по ГОСТ 23454 препарата СКИВ».
Подпункт 4.6.1 изложить в новой редакции:
«4.6.1. Ампулы или пробирки извлекают из термостата или блока термостатируемых ячеек и определяют цвет содержимого».
Подпункты 4.6.2, 4.6.3 после слова «ампул» дополнить словами: «или пробирок».
Подпункт 4.7.1 и таблицу 2 изложить в новой редакции:
«4.7.1. Наименьшие пределы определения антибиотиков представлены в таблице 2.»
Стандарт после таблицы 2 дополнить наименованием раздела 5: «5. Рецепторные методы».
Раздел 5. Заменить номера пунктов и подпунктов: 5 на 5.1; 5.1 на 5.1.1; 5.2 на 5.1.2; 5.2.1 на 5.1.2.1; 5.2.2 на 5.1.2.2; 5.2.3 на 5.1.2.3; 5.2.4 на 5.1.2.4; 5.3 на 5.1.3; 5.3.1 на 5.1.3.1; 5.4 на 5.1.4; 5.4.1 на 5.1.4.1; 5.4.2 на 5.1.4.2; 5.5 на 5.1.5; 5.5.1 на 5.1.5.1; 5.5.2 на 5.1.5.2; 5.5.3 на 5.1.5.3; 5.5.4 на 5.1.5.4; 5.5.5 на 5.1.5.5; 5.5.6 на 5.1.5.6; 5.6 на 5.1.6; 5.6.1 на 5.1.6.1; 5.6.2 на 5.1.6.2; 5.6.3 на 5.1.6.3.
Пункт 5.1 Заменить слово: «Метод» на «Рецепторный метод».
Подпункт 5.1.1. Заменить слова: «иммобилизованными специфическими антителами» на «специфическими белковыми рецепторами».
Подпункт 5.1.4.2. Заменить слова: «в пробирке по 5.2.4» на «в пробирке по 5.1.2.4».
Подпункт 5.1.5.1. Заменить слова: «пипетку по 5.2.4» на «пипетку по 5.1.2.4».
Раздел 5 дополнить пунктом — 5.2:
«5.2. Рецепторный метод с коллоидным золотом»
5.2.1 Сущность метода
5.2.1.1. Метод основан на проведении реакции комплексообразования антибиотиков бета-лактамного типа со специфическими белковыми рецепторами, меченными коллоидным золотом, и последующем визуальном выявлении оставшихся свободными меченых рецепторов путем хроматографии на полосках хроматографической бумаги, содержащих в виде соответствующих линий реакционную и контрольную зоны.
5.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы
5.2.2.1. Термостат или блок термостатируемых ячеек, позволяющий поддерживать температуру (47,5 +/- 0,5) °C.
5.2.2.2 Холодильник бытовой по ГОСТ 16317.
5.2.2.3 Часы механические с сигнальным устройством по ГОСТ 3145.
5.2.2.4. Тест-набор "BetaStar®" [4], включающий флаконы со специфическими рецепторами, меченными коллоидным золотом; полоски хроматографической бумаги с зоной исследуемого молока и контрольной зоной; шприц-дозатор вместимостью 0,2 см3 с наконечниками.
5.2.3 Отбор проб
Отбор проб — по ГОСТ 9225. Пробы хранят в холодильнике в течение 24 ч при температуре (6 +/- 2) °C.
5.2.4 Подготовка к анализу
5.2.4.1. Термостат или блок термостатируемых ячеек нагревают до температуры (47,5 +/- 0,5) °C и выдерживают при этой температуре не менее 5 мин.
5.2.4.2 Флакон встряхивают для осаждения содержимого в нем на дно.
5.2.5 Проведение анализа
5.2.5.1. Шприцем-дозатором с наконечником отбирают 0,2 см3 анализируемого молока и переливают во флакон по 5.2.4.2. Флакон закрывают крышкой и встряхивают до полного растворения сухих веществ без образования пены.
5.2.5.2. Помещают флакон в термостат или блок термостатируемых ячеек по 5.2.2.1.
5.2.5.3. Не менее чем через 3 мин термостатирования во флакон, находящийся в термостате или в блоке термостатируемых ячеек, помещают входящую в комплект полоску хроматографической бумаги.
5.2.5.4. Хроматографирование проводят в течение 2 мин. Затем полоску хроматографической бумаги извлекают из флакона.
5.2.6 Обработка результатов
5.2.6.1. Сравнивают интенсивность цвета окрашенных в красный цвет зон, появляющихся после проведения процедуры по 5.2.5.4 в виде линий на полосках хроматографической бумаги.
5.2.6.2. Зона на верхней части полоски является контрольной. Если ее окрашивания не произошло после выполнения требований по 5.2.5.3, 5.2.5.4, то повторяют все процедуры в соответствии с 5.2.
5.2.6.3. Зона исследуемого молока расположена под контрольной зоной. Большая или равная интенсивность цвета контрольной зоны, а также отсутствие окраски зоны образца является признаком наличия антибиотиков бета-лактамного типа в молоке.
5.2.6.4. Меньшая интенсивность цвета контрольной зоны, по сравнению с интенсивностью цвета зоны под ней, является признаком отсутствия антибиотиков.
5.2.6.5. Контрольное определение проводят в соответствии с 5.1 и 5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно восстановленного по ГОСТ 23454 препарата СКИВ».
Пункт 5.7. Заменить номер пункта: 5.7 на 5.3.
Пункт 5.3 изложить в новой редакции:
«5.3. Метрологические характеристики»
Наименьшие пределы определения антибиотиков бета-лактамного типа представлены в таблице 3.
Приложение А. Библиографию дополнить позициями — [3], [4]:
«[3] Тестовый набор "CopanTest®" Дания, CHR HANSEN. Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53, корп. 17, 3 этаж, ООО „Хр. Хансен“.
»
[4] Тест-набор "BetaStar®" Дания, CHR HANSEN. Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53, корп. 17, 3 этаж, ООО «Хр. Хансен».
Библиографические данные. Ключевые слова после слов «антибиотики бета-лактамного типа» дополнить словами: «сульфаниламидные препараты».