ФС.3.4.0030.22. Фармакопейная статья. Мед натуральный, раствор для подкожного введения
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Мед натуральный, раствор для подкожного введения |
ФС.3.4.0030.22 |
|---|---|
| Mel naturale solutio pro injectione subcutanea |
Вводится впервые |
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарата Мед натуральный, раствор для подкожного введения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения» и нижеприведенным требованиям.
Содержит не менее 78,0% и не более 122,0% суммы глюкозы и фруктозы от заявленного количества.
Описание. Прозрачная, бесцветная или слабо окрашенная жидкость.
Высокоэффективная жидкостная хроматография. Времена удерживания основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора, полученной для количественного определения, должны соответствовать временам удерживания основных пиков на хроматограмме раствора СО глюкозы и фруктозы.
Биологический тест. Препарат считается активным, если продолжительность «тиопенталового сна» в опытной группе мышей сокращается не менее чем на 15% по сравнению с продолжительностью сна в контрольной группе мышей.
Раствор тиопентала натрия 0,2%. 0,02 г тиопентала натрия растворяют в 10,0 мл 0,9% раствора натрия хлорида.
Раствор используют свежеприготовленным.
Испытания проводят на здоровых белых беспородных мышах одного пола, массой тела 19 — 21 г, которые ранее не использовались в экспериментах. За 2 ч до взвешивания и отбора животных для проведения испытания у них отбирают корм и воду. Мышей взвешивают и делят на опытную и контрольную группы, по 10 особей в каждой.
Опытной группе мышей вводят внутривенно 0,2 мл испытуемого препарата на мышь; контрольной группе вводят внутривенно 0,2 мл 0,9% раствора натрия хлорида на мышь. Через 2 мин после инъекции всем мышам обеих групп вводят внутривенно по 0,5 мл 0,2% раствора тиопентала натрия. Практически сразу после введения тиопентала натрия животные принимают боковое положение и засыпают. Длительность сна регистрируют в мин для каждой особи индивидуально, полученные величины усредняют для каждой группы.
Биологическую активность препарата в процентах (A) вычисляют по формуле:
A = \frac{(B - C) \cdot 100}{B} ,
где: A — разница «тиопенталового сна» в контрольной и опытной группах, %;
B — средняя продолжительность «тиопенталового сна» мышей в контрольной группе, мин;
C — средняя продолжительность «тиопенталового сна» мышей в опытной группе, мин.
Прозрачность раствора. Препарат должен выдерживать сравнение с эталоном I. В соответствии с требованиями ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».
Цветность раствора. Препарат должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном Y6 или BY6. В соответствии с требованиями ОФС «Степень окраски жидкостей».
pH. От 4,5 до 6,5. В соответствии с требованиями ОФС «Ионометрия» (метод 3).
Видимые. В соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».
Невидимые. В соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».
5-гидроксиметилфурфурол. Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Подвижная фаза (ПФ). Вода — ацетонитрил (80:20).
Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в защищенном от света месте.
Раствор стандартного образца (СО) 5-гидроксиметилфурфурол. Около 25 мг (точная навеска) СО 5-гидроксиметилфурфурола (CAS 67-47-0) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 25 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (0,5 мг/мл). 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 25 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (0,005 мг/мл). 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 20 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (0,0005 мг/мл).
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. 1,0 мл раствора СО 5-гидроксиметилфурфурола помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой метки и перемешивают (0,000005 мг/мл).
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор СО 5-гидроксиметилфурфурола и испытуемый препарат.
Время удерживания пика 5-гидроксиметилфурфурола — около 4,5 мин.
Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:
на хроматограмме раствора СО 5-гидроксиметилфурфурола
- фактор асимметрии пика (AS) пика 5-гидроксиметилфурфурола должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пика 5-гидроксиметилфурфурола должно быть не более 2,0% (6 введений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику 5-гидроксиметилфурфурола должна быть не менее 1000 теоретических тарелок;
- отношение сигнал/шум (S/N) для пика 5-гидроксиметилфурфурола должно быть не менее 10.
Содержание 5-гидроксиметилфурфурола в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot 5 \cdot P \cdot 1000 \cdot 100}{S_{0} \cdot 50 \cdot 100 \cdot 50 \cdot 100 \cdot (100 - W)} = \frac{S \cdot a_{0} \cdot P}{S_{0} \cdot 50 \cdot (100 - W)} ,
где: S — площадь пика 5-гидроксиметилфурфурола на хроматограмме испытуемого препарата;
So — площадь пика 5-гидроксиметилфурфурола на хроматограмме раствора СО 5-гидроксиметилфурфурола;
ao — навеска СО 5-гидроксиметилфурфурола, г;
P — содержание основного вещества в СО 5-гидроксиметилфурфурола, %;
Допустимое содержание примесей:
Спирт этиловый. Не более 180 ppm. Определение проводят методом газовой хроматографии.
Испытуемый раствор. 20,0 мл препарата и 1,0 мл раствора внутреннего стандарта помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
Раствор внутреннего стандарта. Около 360,0 мг (точная навеска) стандартного образца (СО) 2-пропанола помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 60 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
Стандартный раствор. Около 360,0 мг (точная навеска) СО этанола помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл раствора внутреннего стандарта помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 15 мл воды, перемешивают и доводят объем раствора тем же растворителем до метки и еще раз перемешивают.
Все растворы используют свежеприготовленными.
Порядок выхода пиков: этанол, 2-пропанол.
Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются для хроматограммы стандартного раствора следующие условия:
- разрешение (RS) между пиками этанола и 2-пропанола не менее 2,0;
- фактор асимметрии пика (AS) пиков этанола и 2-пропанола должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение (RSD) площадей пиков этанола к площадям пиков 2-пропанола должно быть не более 10,0% (6 введений).
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пикам этанола и 2-пропанола, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.
Хроматографируют испытуемый раствор и стандартный раствор.
Содержание этанола (C2H5OH) в препарате в ppm (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot a_{o} \cdot 1 \cdot 25 \cdot P \cdot 1000}{S_{o} \cdot 100 \cdot 25 \cdot 20 \cdot 100} = \frac{S \cdot a_{o} \cdot P}{S_{o} \cdot 200} ,
где: S — отношения площади пика этанола к площади пика 2-пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
So — отношения площади пика этанола к площади пика 2-пропанола на хроматограмме стандартного раствора;
P — содержание основного вещества в СО этанола, %.
Извлекаемый объем. Не менее номинального. В соответствии с требованиями ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения».
Пирогенность. Препарат должен быть апирогенным. В соответствии с требованиями ОФС «Пирогенность». Тест-доза — 0,5 мл препарата на 1 кг.
Аномальная токсичность. Препарат должен быть не токсичным. В соответствии с требованиями ОФС «Аномальная токсичность». Тест-доза — 0,5 мл препарата для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.
Стерильность. Препарат должен быть стерильным в соответствии с требованиями ОФС «Стерильность».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил — вода (75:25).
Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в защищенном от света месте.
Испытуемый раствор. 2,0 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 5 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.
Раствор стандартных образцов (СО) глюкозы и фруктозы. Около 25,0 мг (точная навеска) СО глюкозы и около 25,0 мг (точная навеска) СО фруктозы помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют 20 мл ПФ, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
Срок годности раствора не более 1 сут при хранении в прохладном, защищенном от света месте.
Относительные времена удерживания пиков: фруктозы — 1 (около 9 — 11 мин), глюкозы — 1,2.
Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются для хроматограммы раствора СО глюкозы и фруктозы следующие условия:
- разрешение (RS) между пиками глюкозы и фруктозы не менее 1,5;
- фактор асимметрии пика (AS) пиков глюкозы и фруктозы должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение (RSD) площадей пиков глюкозы и фруктозы должно быть не более 2,0% (6 введений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пикам глюкозы и фруктозы, должна быть не менее 1000 теоретических тарелок.
Хроматографируют испытуемый раствор и раствор СО глюкозы и фруктозы.
Содержание суммы глюкозы и фруктозы в препарате в процентах от заявленного (X) вычисляют по формуле:
,где: S1 — площадь пика глюкозы на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 — площадь пика фруктозы на хроматограмме испытуемого раствора;
So1 — площадь пика глюкозы на хроматограмме раствора СО глюкозы и фруктозы;
So2 — площадь пика фруктозы на хроматограмме раствора СО глюкозы и фруктозы;
Pгл — содержание основного вещества в СО глюкозы, %;
Pфр содержание основного вещества в СО фруктозы, %;
Lгл — заявленное количество глюкозы в препарате, г.
Lфр заявленное количество фруктозы в препарате, г.
Хранение. В соответствие с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».