ФС.3.1.0115.22. Фармакопейная статья. Ампициллин натрия + Оксациллин натрия, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения. Ампициллин + Оксациллин, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат ампициллин натрия + оксациллин натрия, порошок для приготовления раствора для внутривенного и внутримышечного введения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Порошки», ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения» и нижеприведенным требованиям.
Содержит ампициллин натрия C16H18N3NaO4S в количестве, эквивалентном не менее 90,0% и не более 115,0% от заявленного количества ампициллина C16H19N3O4S.
Содержит оксациллин натрия C19H18N3NaO5S в количестве, эквивалентном не менее 90,0% и не более 115,0% от заявленного количества оксациллина C19H19N3O5S.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Порошки».
1. ВЭЖХ. Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков ампициллина и оксациллина на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).
2. Качественная реакция. Препарат должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
Прозрачность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).
Цветность раствора. Оптическая плотность препарата, измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 430 нм, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
pH. От 7,0 до 10,0 (10% раствор препарата в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Время растворения. В соответствии с ОФС «Время растворения». К содержимому флакона прибавляют указанное в прилагаемой инструкции по медицинскому применению препарата количество растворителя и непрерывно встряхивают до полного растворения. Визуально определяют время, за которое произошло полное растворение содержимого флакона.
Видимые. В соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».
Невидимые. В соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».
Светопоглощающие примеси. Не более 0,3. Определение проводят методом спектрофотометрии (1% раствор препарата в воде, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Раствор А. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,0 мл уксусной кислоты разведенной 30%, 100 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 100 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.
Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,0 мл уксусной кислоты разведенной 30%, 100 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 800 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Раствор Б — раствор А 150:850.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску порошка, соответствующую около 0,107 г ампициллина, растворяют в растворе А и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.
Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 10 мг (точная навеска) стандартного образца ампициллина, растворяют в растворе А и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора раствором А до метки.
Раствор стандартного образца оксациллина натрия. Растворяют 2 мг стандартного образца оксациллина натрия в 1 мл раствора А.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг стандартного образца ампициллина и 1 мг стандартного образца цефрадина ((6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(циклогекса-1,4-диен-1-ил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 38821-53-3), растворяют в растворе А и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ампициллина и доводят объем раствора раствором А до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объем раствора раствором А до метки.
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца оксациллина натрия, раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.
Время удерживания ампициллина — около 9 мин.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ампициллина должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками цефрадина и ампициллина должно быть не менее 3,0.
На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина:
- фактор асимметрии пика (AS) ампициллина должен быть не менее 0,8 и не более 1,8;
- относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0% (6 введений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ампициллина, должна составлять не менее 1100 теоретических тарелок.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (не более 2,0%);
- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (не более 5,0%).
Не учитывают пик оксациллина и пики примесей, площадь которых менее площади ампициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).
Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 6,0 г натрия дигидрофосфата моногидрата, 0,56 г натрия гексансульфоната моногидрата и 50 мг натрия эдетата дигидрата в 800 мл воды и доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,1 +/- 0,1. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Растворитель. Ацетонитрил — вода 150:850.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску порошка, соответствующую около 53 мг оксациллина, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца оксациллина натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10,6 мг (точная навеска) стандартного образца оксациллина натрия, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг стандартного образца примеси E, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 10,6 мг стандартного образца оксациллина натрия и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца оксациллина натрия и доводят объем раствора растворителем до метки.
Примесь 1: (3S,7R,7aR)-2,2-диметил-5-(5-метил-3-фенилизоксазол-4-ил)-2,3,7,7a-тетрагидроимидазо[5,1-b]тиазол-3,7-дикарбоновая кислота.
Примесь A: (2S,5R,6R)-6-амино-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота, CAS 551-16-6
Примесь B: (4S)-2-[карбокси(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота.
Примесь C: 5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоновая кислота, CAS 1136-45-4.
Примесь D: (4S)-2-[(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота, CAS 1642559-63-4
Примесь E: (2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-[5-метил-3-(2-хлорфенил)-1,2-оксазол-4-карбоксамидо]-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота, CAS 61-72-3
Примесь F: (2R,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карботионовая кислота, CAS 5053-35-0
Примесь G: (2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-[5-метил-3-(хлорфенил)-1,2-оксазол-4-карбоксамидо]-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.
Примесь I: (2S,5R,6R)-6-[(2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.
Примесь J: (2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-[(2R,4S)-4-карбокси-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-2-ил]-2-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 3 | 90 | 10 |
| 3 — 30 | 90 \rightarrow 50 | 10 \rightarrow 50 |
| 30 — 40 | 50 \rightarrow 15 | 50 \rightarrow 85 |
| 40 — 45 | 15 | 85 |
| 45 — 50 | 15 \rightarrow 90 | 85 \rightarrow 10 |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца оксациллина натрия и испытуемый растворы.
Относительное время удерживания соединений. Оксациллин — 1 (около 19 мин); примесь A — 0,08; примеси B изомер 1 — 0,66; примесь 1 — 0,68; примеси B изомер 2 — 0,69; примеси D изомер 1 — 0,83; примеси D изомер 2 — 0,84; примесь F — 0,93; примесь C — 0,95; примесь E — 1,09; примесь G — 1,17; примесь I — 1,19; примесь J — 1,31.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика оксациллина должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками оксациллина и примеси E должно быть не менее 5,0.
На хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия:
- фактор асимметрии пика (AS) оксациллина должен быть не менее 0,8 и не более 1,8;
- относительное стандартное отклонение площади пика оксациллина должно быть не более 2,5% (6 введений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ампициллина, должна составлять не менее 10000 теоретических тарелок.
Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A — 4,5; примесь B — 2,5; примесь C — 0,5; примесь D — 1,27.
Содержание любой примеси оксациллина в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 2} ,
где S1 — площадь пика любой примеси оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия;
a0 — навеска стандартного образца оксациллина натрия, мг;
P — содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;
Допустимое содержание примесей:
- примесь 1 — не более 0,5%;
- примесь A — не более 0,5%;
- примесь B — не более 1,5%;
- примесь C — не более 0,5%;
- примесь D — не более 0,5%;
- примесь E — не более 1,0%;
- примесь F — не более 0,5%;
- примесь G — не более 0,5%;
- примесь I — не более 0,5%;
- примесь J — не более 0,7%;
- любая другая примесь — не более 0,5%;
- сумма примесей оксациллина — не более 3,0%.
Не учитывают пик ампициллина и его примеси с относительным временем удерживания по пику оксациллина 0,2; 0,42; 0,51; 0,58; 0,72 и 0,98, а также пики примесей, площадь которых менее площади оксациллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).
Вода. Не более 3,5% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 60 мг (точная навеска) препарата.
Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» (способ 1 или способ 2). При использовании способа 1 определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Количественное определение».
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают содержимое одного флакона, прибавляют 30 мл воды, встряхивают до полного растворения и доводят объем раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют.
Стандартный раствор. Растворяют в воде точные навески стандартных образцов ампициллина тригидрата и оксациллина натрия с получением концентраций, эквивалентных ожидаемым концентрациям ампициллина и оксациллина в испытуемом растворе.
Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.
Содержание ампициллина C16H19N3O4S в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot C_{0} \cdot P \cdot 50}{S_{0} \cdot L} ,
где S1 — площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика ампициллина на хроматограмме стандартного раствора;
C0 — концентрация стандартного образца ампициллина тригидрата в стандартном растворе, мг/мл;
P — содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина тригидрата, %;
L — заявленное количество ампициллина в одном флаконе, мг.
Содержание оксациллина C19H19N3O5S в препарате в процентах от заявленного количества (Y) вычисляют по формуле:
Y = \frac{S_{1} \cdot C_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 401,4}{S_{0} \cdot L \cdot 423,4} ,
где S1 — площадь пика оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика оксациллина на хроматограмме стандартного раствора;
C0 — концентрация стандартного образца оксациллина натрия в стандартном растворе, мг/мл;
P — содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;
L — заявленное количество оксациллина в одном флаконе, мг;
401,4 — молекулярная масса оксациллина;
423,4 — молекулярная масса оксациллина натрия.
Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 15 мг суммы ампициллина и оксациллина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно.
Бактериальные эндотоксины. Не более 0,07 ЕЭ на 1 мг суммы ампициллина и оксациллина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Стерильность»).
Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными.
Аммония ацетата раствор 0,2 М. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 7,7 г аммония ацетата, растворяют в 300 мл воды и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Метанол — ацетонитрил — аммония ацетата раствор 0,2 М 80:150:650.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску препарата, соответствующую около 37,5 мг ампициллина, прибавляют 40 мл ПФ, встряхивают до полного растворения и доводят объем раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют.
Стандартный раствор. Растворяют в воде точные навески стандартных образцов ампициллина тригидрата и оксациллина натрия с получением концентраций, эквивалентных ожидаемым концентрациям ампициллина и оксациллина в испытуемом растворе.
Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:
- разрешение (RS) между пиками ампициллина и оксациллина должно быть не менее 6,0;
- относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0% (6 введений);
- относительное стандартное отклонение площади пика оксациллина должно быть не более 2,0% (6 введений).
Содержание ампициллина C16H19N3O4S в препарате в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot C_{0} \cdot P \cdot G \cdot 50}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot L} ,
где S1 — площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика ампициллина на хроматограмме стандартного раствора;
C0 — концентрация стандартного образца ампициллина тригидрата в стандартном растворе, мг/мл;
P — содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина тригидрата, %;
G — средняя масса содержимого одного флакона, мг;
L — заявленное количество ампициллина в одном флаконе, мг.
Содержание оксациллина C19H19N3O5S в препарате в процентах от заявленного количества (Y) вычисляют по формуле:
Y = \frac{S_{1} \cdot C_{0} \cdot P \cdot G \cdot 50 \cdot 401,4}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot L \cdot 423,4} ,
где S1 — площадь пика оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика оксациллина на хроматограмме стандартного раствора;
C0 — концентрация стандартного образца оксациллина натрия в стандартном растворе, мг/мл;
P — содержание оксациллина натрия в стандартном образце оксациллина натрия, %;
G — средняя масса содержимого одного флакона, мг;
L — заявленное количество оксациллина в одном флаконе, мг;
401,4 — молекулярная масса оксациллина;
423,4 — молекулярная масса оксациллина натрия.
Хранение. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».