ФС.2.5.0090.18. Фармакопейная статья. Пастушьей сумки обыкновенной трава

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0090.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0090-18" "ФС.2.5.0090.18. Фармакопейная статья. Пастушьей сумки обыкновенной трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.5.0090"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0090" "ФС.2.5.0090. Фармакопейная статья. Пастушьей сумки обыкновенной трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Внешние признаки. Цельное сырье. Облиственные стебли длиной до 40 см, простые или ветвистые, с ребристой поверхностью, голые или в нижней части слабо опушенные, с цветками, бутонами и незрелыми плодами в кистевидных соцветиях, часто с розеткой прикорневых листьев. Прикорневые листья черешковые, продолговато-ланцетные, перистораздельные, с острыми треугольными струговидно-выемчатыми, цельнокрайними или зубчатыми долями; стеблевые — очередные, сидячие, продолговато-ланцетные цельнокрайние или выемчато-зубчатые; верхние — почти линейные со стреловидным основанием. Цветки мелкие до 4 мм в диаметре, правильные, раздельнолепестные. Чашечка из 4 продолговато-яйцевидных, зеленых чашелистиков. Венчик из 4 обратнояйцевидных лепестков. Плоды — стручочки, обратнотреугольно-сердцевидные, на верхушке слегка выемчатые, сплюснутые, с двумя раскрывающимися створками и с мелкими светло-коричневыми семенами.

Цвет стеблей, листьев и плодов зеленый, цветков и бутонов — беловатый. Запах слабый. Вкус водного извлечения горьковатый.

Измельченное сырье. Кусочки листьев, стеблей и соцветий различной формы, отдельные цветки, бутоны, плоды и их части, семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны кусочки листовых пластинок, на нижней и верхней сторонах которых заметны трех-, шести-, семиконечные волоски, реже — простые крупные заостренные волоски.

Цвет стеблей, листьев и плодов зеленый, цветков — беловатый, семян — светло-коричневый. Запах слабый. Вкус водного извлечения горьковатый.

Порошок. Кусочки листьев и стеблей различной формы, отдельные бутоны, части цветков и плодов, семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) на нижней и верхней сторонах кусочков листовых пластинок видны трех-, шести-, семиконечные волоски, реже — простые крупные заостренные волоски. Цвет серовато-зеленый с серовато- или желтовато-белыми, светло-коричневыми вкраплениями. Запах слабый. Вкус водного извлечения горьковатый.

Микроскопические признаки Цельное сырье. При рассмотрении листа с поверхности должны быть видны мелкие клетки эпидермиса с тонкими стенками, с верхней стороны слабоизвилистые, с нижней — сильноизвилистые. Устьица с обеих сторон, на нижней стороне их больше, мелкие, окружены тремя клетками эпидермиса, из которых одна значительно мельче двух других (анизоцитный тип). На обеих сторонах листа — многочисленные одноклеточные разветвленные волоски: трех-, шести-, реже двух-, пяти- или семиконечные с грубобородавчатой поверхностью, лучи волоска прижаты к поверхности листа; простые волоски крупные, конические (с широким основанием и узкой заостренной верхушкой) одно- или многоклеточные, с гладкой или слегка бородавчатой поверхностью.

Эпидермис основания лепестка цветка с внешней и внутренней сторон состоит из клеток удлиненной формы с тонкими прямыми стенками. Постепенно к верхушке лепестка они сменяются клетками изодиаметрической формы с сосочковидновытянутой стенкой. Клетки эпидермиса чашелистика с двух сторон имеют удлиненно-вытянутую форму, извилистые стенки и складчатую кутикулу. Встречаются многочисленные устьица анизоцитного типа. Редко обнаруживаются простые одноклеточные волоски с слабобородавчатой поверхностью, толстыми стенками и заостренной верхушкой. В микропрепарате также обнаруживаются округлые пыльцевые зерна.

Эпидермис створки плода образован клетками удлиненно-вытянутой формы с тонкими слабо извилистыми стенками. Под эпидермисом обнаруживается слой склеренхимных волокон с толстыми пористыми стенками, расположенных перпендикулярно проводящим пучкам.

При рассмотрении «давленого препарата» стебля должны быть хорошо видны клетки эпидермиса удлиненно-прямоугольной формы с прямыми стенками, основные диагностические признаки (тип устьиц, волоски), характерные для пастушьей сумки; проводящие пучки, состоящие из спиральных, кольчатых и сетчатых сосудов.

Измельченное сырье, порошок. При исследовании микропрепаратов должны быть видны фрагменты листовой пластинки с эпидермисом, состоящим из клеток со слабо извилистыми и сильно извилистыми стенками и устьицами анизоцитного типа. На некоторых фрагментах должны быть видны простые одноклеточные волоски с широким основанием и узким заостренным концом и гладкой или слабобородавчатой поверхностью, а также волоски разветвленные одноклеточные, многоконечные (3 — 7-конечные) с грубобородавчатой поверхностью. Реже встречаются фрагменты с одноклеточными двуконечными (вильчатыми) волосками. В микропрепарате могут встречаться отдельные волоски или их обломки. Кроме того, в микропрепарате обнаруживаются фрагменты цветка (лепестков, тычинок, пестика, чашелистиков, пыльцевые зерна), плода и стебля. Фрагменты цветков и стебля должны обнаруживать те же диагностические признаки (устьица анизоцитного типа, волоски), что и на фрагменты листа. Фрагменты плода должны быть представлены фрагментами эпидермиса, образованного клетками удлиненно-вытянутой формы с тонкими слабо извилистыми стенками, фрагментами склеренхимных волокон с толстыми пористыми стенками, расположенных перпендикулярно проводящим пучкам.

Определение основных групп биологически активных веществ

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) лютеолина. Около 0,005 г СО лютеолина растворяют в 25 мл спирта 96% при нагревании (70 — 80 °C). Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и тщательно перемешивают. Срок годности раствора 1 мес при хранении в прохладном защищенном от света месте.

Тонкослойная хроматография

Около 1,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл спирта 70%. Колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Охлажденное до комнатной температуры извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 10 мкл (0,01 мл) испытуемого раствора; рядом наносят 10 мкл (0,01 мл) раствора СО лютеолина и раствора А СО рутина (см. раздел «Количественное определение»). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 2 — 3 мин, затем помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин, смесью растворителей бутанол — уксусная кислота — вода (4:1:2) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета, на хроматограмме раствора СО лютеолина должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета выше зоны адсорбции СО рутина.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции коричневого цвета на уровне зон адсорбции СО рутина и СО лютеолина.

Затем пластинку обрабатывают парами аммиака и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограммах раствора СО рутина и раствора СО лютеолина должны обнаруживаться зоны адсорбции с флюоресценцией желто-зеленого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции с желто-зеленой флуоресценцией на уровне зон адсорбции СО рутина и СО лютеолина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 13%

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 10%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 2%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5%;

Посторонние примеси

Корни (в том числе отделенные при анализе), части растения, пораженные мучнистой росой, и пожелтевшие листья. Цельное сырье — не более 3%;

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 2%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок: суммы флавоноидов в пересчете на рутин — не менее 0,5%.

Приготовление растворов.

Раствор СО рутина. Около 0,005 г (точная навеска) СО рутина, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 100 — 105 °C, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в небольшом количестве спирта 96% при нагревании на водяной бане, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора 1 мес.

1,0 мл раствора А СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б СО рутина).

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 0,5 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл спирта 70% и взвешивают с точностью +/- 0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения до комнатной температуры колбу вновь взвешивают и доводят до первоначальной массы спиртом 70%. Содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр (раствор А испытуемого раствора).

1,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 1 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А испытуемого раствора, доведенный спиртом 70% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл, и перемешанный.

Оптическую плотность раствора Б испытуемого раствора измеряют через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл раствора А рутина, доведенный спиртом 70% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл, и перемешанный.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot 25 \cdot 1 \cdot 100 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 1 \cdot 25 \cdot 25 \cdot (100 - W) \cdot 100} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 200 \cdot P}{A_{0} \cdot a \cdot (100 - W)} ;

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

Ao — оптическая плотность раствора Б СО рутина;

ao — навеска СО рутина, г;

a — навеска сырья, г;

P — содержание основного вещества в СО рутина, %;

W — влажность сырья, %.

Допускается вычислять содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в абсолютно сухом сырье с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 405 нм, равный 220;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».