ФС.2.1.0320. Фармакопейная статья. Цисплатин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 № 377)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Цисплатин Цисплатин Cisplatinum	ФС
	Взамен ФС 42-3061-94

PtCl2(NH3)2 [15663-27-1]	М.м. 300,05

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(SP-4-2)-Диамминдихлорплатина(II).

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% цисплатина PtCl2(NH3)2 в пересчете на сухое вещество.

Цисплатин является высокотоксичным веществом. Необходимо принять меры для исключения возможности его вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

СВОЙСТВА

Описание. Желтый порошок или кристаллы желтого или оранжево-желтого цвета.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилформамиде, мало растворим в воде, практически не растворим в этаноле 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цисплатина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цисплатина на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина (раздел «Количественное определение»).

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы защищают от действия света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем целлюлозы для ВЭТСХ.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 150 °C в течение 60 мин.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон — диметилформамид 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора диметилформамидом до метки.

Раствор стандартного образца цисплатина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца цисплатина, растворяют в диметилформамиде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят 2 мкл испытуемого раствора (4 мкг) и 2 мкл раствора стандартного образца (4 мкг) цисплатина. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают олова(II) хлорида раствором(2) и просматривают в видимом свете через 1 ч.

Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции цисплатина на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина.

4. Качественная реакция. В стеклянный бюкс помещают 50 мг субстанции, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5% и выпаривают досуха. Полученный остаток растворяют в смеси 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и 1,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают досуха, остаток должен быть оранжевого цвета. Полученный остаток растворяют в 0,5 мл воды, после прибавления 0,5 мл аммония хлорида раствора 10,7% должен образоваться желтый кристаллический осадок.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора

Раствор А. Раствор 25 мг субстанции в 25 мл натрия хлорида раствора 0,9% должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Раствор Б. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл диметилформамида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор А, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,0 (раствор А, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3). Измерение проводят сразу после приготовления раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от действия света. Не нагревают и не обрабатывают ультразвуком растворы, содержащие платину. Все растворы используют в течение 4 ч.

Подвижная фаза (ПФ). В химическом стакане растворяют 1,08 г натрия октансульфоната, 1,70 г тетрабутиламмония гидросульфата и 2,72 г калия дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до значения 5,9. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Растворитель. Натрия хлорида раствор 0,9%.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,6 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл испытуемого раствора, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси A и 5,0 мл раствора стандартного образца примеси B и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: (SP-4-1)-диамминдихлорплатина(II) [14913-33-8].

Примесь B: амминотрихлорплатинат(II) [17632-41-6].

Примесь C: тетрахлорплатинат(II) [13965-91-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 4 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 210 нм;
Объем пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	7-кратное от времени удерживания пика цисплатина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор, испытуемый раствор и растворитель.

Пик смещения — это последний пик в группе пиков на хроматограмме растворителя.

Относительное время удерживания соединений. Цисплатин — 1 (около 3,8 мин); пик смещения — около 0,5; примесь A — около 0,6; примесь B — около 0,7; цисплатин аквакомплекс — около 1,2.

Для идентификации пика цисплатин аквакомплекса используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного образца цисплатина (раздел «Количественное определение») и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цисплатина.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

• разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 2,5;
• разрешение (RS) между пиком смещения и пиком примеси A должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика примеси A не должна превышать площадь пика примеси A на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,0%);
• площадь пика примеси B не должна превышать площадь пика примеси B на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика цисплатина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10%);
• сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей A и B, не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика цисплатина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика цисплатина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%), пик цисплатин аквакомплекса и пики растворителя.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Серебро. Не более 0,025%. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл азотной кислоты при нагревании до 80 °C, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают серебра стандартный раствор 5 мкг/мл в количествах: 10 мл, 20 мл и 30 мл, прибавляют 50 мл азотной кислоты и доводят объем растворов водой до метки (получают растворы с содержанием серебра соответственно 0,5; 1,0 и 1,5 мкг/мл).

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл азотной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.

Условия испытания

Источник излучения	лампа для определения серебра с полым катодом с щелью пропускания 0,5 нм;
Длина волны	328 нм;
Атомизация	воздушно-ацетиленовое пламя.

Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание серебра в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 1,62 ЕЭ на 1 мг цисплатина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

---

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца цисплатина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цисплатина, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Объем пробы	10 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца цисплатина и испытуемый раствор.

Содержание цисплатина PtCl2(NH3)2 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 25 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца цисплатина, мг;

W — потеря в массе при высушивании, %;

P — содержание цисплатина в фармакопейном стандартном образце цисплатина, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.

---