МУК 4.1.4149-25. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций проквиназида в воде методом газовой хроматографии. Методические указания по методам контроля
(утв. Роспотребнадзором 25.07.2025)
Примечание
Документ введен в действие с 25.10.2025. Взамен строки 2 (вода) таблицы 1, строки 2 (вода) таблицы 2 и пункта 9.1.1 МУК 4.1.2268-07.
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 25 июля 2025 года
Дата введения 25 октября 2025 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ПРОКВИНАЗИДА В ВОДЕ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ МУК 4.1.4149-25
1. Разработаны ФБУН «ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Кузьмин С.В., Синицкая Т.А., Горячева Л.В., Егорченкова О.Е., Ларькина М.В., Гордиюк А.В., Молчанов М.Д.).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 25 июля 2025 г.
3. МУК 4.1.4149-25 введены взамен строки 2 (вода) таблицы 1, строки 2 (вода) таблицы 2 и пункта 9.1.1 МУК 4.1.2268-07 «Определение остаточных количеств проквиназида в воде, почве, ягодах и соке винограда методом капиллярной газожидкостной хроматографии», утвержденных руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 24.09.2007.
I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания по методам контроля (далее — МУК) описывают порядок применения метода газовой хроматографии с детектором по захвату электронов (далее — ГХ-ЭЗД) и с масс-спектрометрическим детектированием (далее — ГХ-МС) для определения массовой концентрации проквиназида в воде питьевой централизованного и нецентрализованного водоснабжения, водоисточников хозяйственно-питьевого, культурно-бытового и рекреационного водопользования, природной воде (поверхностные и грунтовые воды) в диапазонах концентраций 0,002 — 0,02 мг/дм3 без учета разбавления и 0,002 — 1,000 мг/дм3 с учетом разбавления в 50 раз при детектировании методом ГХ-ЭЗД и в диапазонах концентраций 0,0001 — 0,0010 мг/дм3 без учета разбавления и 0,0001 — 0,0500 мг/дм3 с учетом разбавления в 50 раз при детектировании методом ГХ-МС.
1.2 МУК носят рекомендательный характер.
II. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
2.1. Проквиназид-6-иодо-2-пропокси-3-пропилхиназолин-4(3Н)-он. Класс — хинозолины. Брутто-формула C14H17ClN2O2. Молекулярная масса 372,2 г/моль. CAS № 189278-12-4 <1>.
<1> В соответствии с классификацией Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) (англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
2.2 Физические и химические свойства:
Твердое вещество белого цвета без запаха. Температура плавления плюс 61,5 — 62 °C. Давление паров при температуре плюс 20 °C: 9,0 x 10-5 мПа (А). Плотность при температуре плюс 20 °C: 1,57 г/см3. Коэффициент распределения н-октанол-вода KowlogP — 5,48. Растворимость в воде 0,93 мг/дм3 (pH 7). Растворимость в органических растворителях (в г/дм3): ацетон, дихлорметан, диметилформамид, н-гексан, н-октанол, о-ксилол, этилацетат > 250, ацетонитрил — 154, метанол — 136. Проквиназид гидролитически стабилен при pH 4, 7 и 9; быстро разлагается после воздействия света путем водного фотолиза: DT50 0,03 дня.
2.3 Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность проквиназида (LD50) для крыс самцов — 4864 мг/кг, для крыс самок — более 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность проквиназида (LD50) для крыс — более 5000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LC50) — более 5200 мг/м3.
2.4 Область применения.
Проквиназид — фунгицид, обладающий потенциалом для борьбы с мучнистой росой в различных культурах, включая зерновые и лозы.
III. ПОГРЕШНОСТЬ ИЗМЕРЕНИЙ
3.1. При соблюдении условий проведения анализа и методики, изложенной в настоящих МУК, погрешность (и ее составляющие) <2> результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
<2> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения», введенный в действие постановлением Госстандарта Российской Федерации от 23.04.2002 № 161-ст.
Метрологические характеристики
| Анализируемый объект и вещество | Диапазон определяемых концентраций, мг/дм3 | Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95), \pm \delta , % | Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), \sigma_{r} , % | Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), \sigma_{R} , % | Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, % | Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %, (P = 0,95) |
| Вода <*> | 0,002 — 1,000 | 50 | 3,5 | 4,9 | 10 | 14 |
| Вода <**> | 0,0001 — 0,0500 | 50 | 8,3 | 11,7 | 23 | 33 |
| Примечание: <*> — измерения проведены методом ГХ-ЭЗД; <**> — измерения проведены методом ГХ-МС. Диапазон определяемых концентраций приведен с учетом разбавления экстракта образца в 50 раз. | ||||||
IV. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
4.1. Измерения концентраций проквиназида выполняют методами ГХ-ЭЗД или ГХ-МС.
4.2. При измерениях методом ГХ-ЭЗД определение проквиназида в пробах воды производится после экстракции его из воды диэтиловым эфиром и очистки экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися растворителями.
4.3. При измерениях методом ГХ-МС концентрирование проквиназида из проб воды проводят на патронах (картриджах) для твердофазной экстракции (далее — ТФЭ), заполненных сорбционным материалом на основе силикагеля с привитыми гидрофобными октадецил-группами.
4.4. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы воды при измерениях методом ГХ-ЭЗД 0,1 нг. Средняя полнота извлечения из воды — 96%.
4.5. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы воды при измерениях методом ГХ-МС 0,01 нг. Средняя полнота извлечения из воды — 92%.
4.6. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
V. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы, приведенные в таблицах 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Весы аналитические | С пределом допустимой погрешности не менее +/- 0,0005 г, ГОСТ Р 53228-2008 |
| Газовый хроматограф, оснащенный масс-спектрометрическим детектором и/или детектором электронного захвата, предназначенный для работы с капиллярной колонкой | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Колбы мерные | 2-го класса точности 2-100-2, 2-50-2, вместимостью 100 и 50 см3, ГОСТ 1770-74 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111-1-2009 |
| Микрошприц | Вместимостью 10 мм3 |
| Пипетки градуированные | Вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 типа 1-1(2)-2-1, 1-1(2)-2-2, 1-1(2)-2-5 и 1-1(2)-2-10, ГОСТ 29227-91 |
| Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Цилиндр мерный | 2-го класса точности 1(2-4)-100-2, вместимостью 100 см3, ГОСТ 1770-74 |
| Примечание: допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. | |
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Проквиназид | Аналитический стандартный образец с содержанием основного компонента не менее 95% |
| Азот газообразный | В баллонах, чистота 99,999% |
| Ацетон | Особо чистый, ГОСТ 2603-79 |
| Ацетонитрил для ВЭЖХ | Чистота не менее 99,9% |
| Вода | Для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005 |
| Гелий газообразный (сжатый) | В баллонах, марка «6». Высокой чистоты, с содержанием гелия не менее 99,9999% |
| Йод, чистый для анализа | ГОСТ 4159-79 |
| Калий марганцовокислый (перманганат калия) | Химически чистый, ГОСТ 20490-75 |
| Калий углекислый (карбонат калия, поташ) | Химически чистый, прокаленный, ГОСТ 4221-76 |
| Кислота азотная | Химически чистая, ГОСТ 4461-77 |
| Магний металлический | Химически чистый, массовая доля не менее 99,9%, гранулы |
| Метиловый спирт (метанол) | Химически чистый, ГОСТ 6995-77 |
| Натрий сернокислый безводный | Химически чистый, ГОСТ 4166-76 |
| Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора) | Химически чистый |
| Эфир диэтиловый | Квалификация «ЧДА» |
| Примечание: допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки органических растворителей. | |
Вспомогательное оборудование, устройства и материалы
| Наименование вспомогательного оборудования, устройств и материалов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
| Бумажные фильтры | Фильтры неплотные, обеззоленные изготовленные из фильтровальной бумаги марки ФБ-II, ГОСТ 12026-76 |
| Виалы с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой | Вместимостью 2 см3 |
| Воронки химические стеклянные конусные | В-(56-75)-ХС, ГОСТ 25336-82 |
| Воронки делительные | Вместимостью 250 см3, ВД-3-250ХС, ГОСТ 25336-82 |
| Груша (спринцовка) резиновая | С мягким наконечником |
| Индикаторная бумага универсальная | pH 0 — 12 или 1 — 14 |
| Колбы круглодонные (грушевидные) для упаривания | Типа К-1 или Гр-1 на шлифе вместимостью 50 см3 с взаимозаменяемым конусом 14/23, 19/26 или 29/32, ГОСТ 25336-82 |
| Ректификационная колонна | С числом теоретических тарелок не менее 30 |
| Ротационный вакуумный испаритель | Обеспечивающий вакуум до 10 мбар |
| Патрон (картридж) для твердофазной экстракции на основе октадецилсилана C18 | Площадь поверхности ~ 337 м2/г |
| Стаканы химические с носиком | Вместимостью 150 см3, типа В-1-150 или Н-1-150, ГОСТ 25336-82 |
| Система для твердофазной экстракции (манифолд) для работы с патронами (картриджами) | С мембранным насосом, с предельно допустимым уровнем давления в системе 74 кПа |
| Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении | - |
| Шприцы медицинские одноразовые | Вместимостью 10 см3, ГОСТ ISO 7886-1-2011 |
| Холодильник водяной обратный | Типа ХШ или ХСВ, ГОСТ 25336-82 |
| Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка | Длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% метилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм |
| Холодильная камера бытового холодильника | Температура плюс 2 — 6 °C, ГОСТ 26678-85 |
| Примечание: допускается использование вспомогательного оборудования, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. | |
VI. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2017, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009-83. Организуется обучение работников безопасности труда.
6.3. Работа с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), осуществляется в соответствии с законодательством Российской Федерации <3>.
<3> Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 15.12.2020 № 536 (зарегистрирован Минюстом России 31.12.2020, регистрационный № 61998).
Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.
6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, оснащенном ЭЗД и (или) МС детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха плюс 15 — 30 °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
8.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), подготовка патронов (картриджей) для ТФЭ к работе, проверка хроматографического поведения проквиназида на них, приготовление смесей растворителей для экстракции и очистки экстрактов на патронах, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики.
8.2 Очистка растворителей.
8.2.1. Ацетон. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 растворителя около 10 г перманганата калия и 30 г карбоната калия) или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Хранят при комнатной температуре не более 1 месяца.
8.2.2. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед использованием ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия).
8.2.3. Метиловый спирт (метанол). В колбу с обратным холодильником помещают 0,5 г йода, 5 г магния и 50 — 75 мл метилового спирта. Нагревают до исчезновения йода. Если реакция не начинается, добавляют еще 0,5 г йода и нагревают до тех пор, пока весь магний не переходит в метилат. Затем добавляют еще 900 мл метилового спирта и кипятят с обратным холодильником 30 минут. После чего подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.
8.3 Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения.
8.3.1. Исходный раствор проквиназида для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (0,0100 +/- 0,0005) г проквиназида, растворяют в 50 — 60 см3 ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.
Исходный раствор готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более 3 месяцев.
8.3.2. Раствор № 1 проквиназида для градуировки и внесения с концентрацией 10,0 мкг/см3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10,0 см3 исходного раствора с концентрацией проквиназида 100 мкг/см3 (п. 8.3.1), разбавляют ацетоном до метки. Раствор № 1 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более 2 месяцев.
8.3.3. Раствор № 2 проквиназида для градуировки и внесения (концентрация 1,0 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1,0 см3 исходного раствора с концентрацией проквиназида 100 мкг/см3 (п. 8.3.1), разбавляют ацетоном до метки.
Раствор № 2 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более месяца.
Растворы № 1 — 2 используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом добавок.
Растворы № 3 — 7 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
8.3.4. Рабочие растворы № 3 — 7 проквиназида для градуировки при выполнении измерений методом ГХ-ЭЗД (концентрации 0,1 — 1,0 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 0,1; 0,2; 0,5; 0,8 и 1,0 см3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией 100,0 мкг/см3 (п. 8.3.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 3 — 7 с концентрациями проквиназида 0,1; 0,2; 0,5; 0,8 и 1,0 мкг/см3 соответственно.
Рабочие растворы № 3 — 7 готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более 10 дней.
8.3.5. Рабочие растворы № 8 — 12 проквиназида для градуировки при выполнении измерений методом ГХ-МС (концентрации 0,01 — 0,1 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 1,0; 2,0; 5,0; 8,0 и 10,0 см3 градуировочного раствора № 2 с концентрацией 1,0 мкг/см3 (п. 8.3.3), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 8 — 12 с концентрациями проквиназида 0,01; 0,02; 0,05; 0,08 и 0,1 мкг/см3 соответственно.
Рабочие растворы готовят при температуре плюс 20 °C и хранят в холодильнике при температуре плюс 2 — 6 °C не более 10 дней.
8.4. Приготовление смеси вода-ацетонитрил для очистки экстрактов на концентрирующих патронах.
Смесь вода-ацетонитрил (объемное соотношение 8:2). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 20 см3 ацетонитрила и 80 см3 воды, перемешивают.
8.5. Приготовление смеси ацетонитрил-метанол для очистки экстрактов на концентрирующих патронах.
Смесь ацетонитрил-метанол (объемное соотношение 1:1). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 ацетонитрила и 50 см3 метанола, перемешивают.
8.6. Подготовка к работе патронов (картриджей) для твердофазной экстракции.
Патрон (картридж) устанавливают плотно в необходимые позиции манифолда <4>. Сверху в патрон устанавливают стеклянную пипетку вместимостью 5 см3, используемую в качестве емкости для элюента.
<4> Примечание: в отсутствие специального устройства для работы с патронами, жидкость продавливают через патрон с помощью шприца, скорость продавливания раствора не должна превышать 2 — 3 капли/сек.
Концентрирующий патрон промывают последовательно 5 см3 метанола и 10 см3 бидистиллированной (деионизированной) воды, процедуру проводят с использованием вакуума. Скорость элюирования — 1 - 2 см3/мин в минуту. Картриджи готовят непосредственно перед использованием.
8.7. Проверка поведения проквиназида на концентрирующем патроне (картридже) <5>.
<5> Примечание: проверку хроматографического поведения проквиназида следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
В дистиллированную воду объемом 10 см3 вносят 0,1 см3 раствора № 1 проквиназида для внесения с концентрацией 10,0 мкг/см3 в ацетоне (п. 8.3.1) и наносят на подготовленный концентрирующий патрон, приготовленный по п. 8.6. Патрон промывают 2 см3 смеси вода-ацетонитрил (8:2, по объему), элюат отбрасывают.
Проквиназид элюируют с патрона 6 см3 смеси ацетонитрил-метанол (1:1, по объему), отбирая фракционно (по 2 см3) элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 см3 ацетона, анализируют на содержание проквиназида по п. 10.1.2.
Фракции, содержащие проквиназид, объединяют и вновь анализируют. Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюента.
8.8. Установление градуировочной характеристики. Градуировочную характеристику, выражающую линейную зависимость площади пика от концентрации проквиназида в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки (N 2 — 6 или 8 — 12).
В испаритель хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.1.2 или по п. 10.2.2. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков проквиназида, на основании которых строят градуировочную зависимость.
8.9. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание проквиназида в которых должно входить в диапазон концентраций от 0,1 до 1,0 мкг/см3 при измерениях методом ГХ-ЭЗД или от 0,01 до 0,1 мкг/см3 при измерениях методом ГХ-МС.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение (1, 2):
A = \frac{|X - C|}{C} \times 100; (1)
где: A — величина расхождения, %;
X — концентрация проквиназида в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора проквиназида, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
B — норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (равен 20% при P = 0,95 для ГХ-МС и 10% при P = 0,95 для ГХ-ЭЗД).
Если величина расхождения (A) превышает 10% (ГХ-ЭЗД) или 20% (ГХ-МС), делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново.
IX. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ
9.1. Отбор проб осуществляют в соответствии с методическими документами <6>.
<6> ГОСТ Р 59024-2020 «Вода. Общие требования к отбору проб», введенный приказом Росстандарта от 10.09.2020 № 640-ст.
9.2. Пробы воды отбирают и хранят в стеклянных бутылях при температуре плюс 2 — 6 °C не более 5 суток. При отборе допускается консервация азотной кислотой до pH 3.
X. ВЫПОЛНЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
10.1 Выполнение определения методом ГХ-ЭЗД.
10.1.1 Приготовления пробы воды для анализа.
Пробу воды объемом 50 см3 помещают в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 10 см3 диэтилового эфира и интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в стеклянный стакан вместимостью 150 см3, а верхний органический слой собирают в круглодонную колбу для упаривания объемом 50 см3 через слой безводного сульфата натрия. Водный слой переносят в делительную воронку и повторяют экстракцию еще дважды, используя каждый раз по 10 см3 диэтилового эфира. Экстракты объединяют и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше плюс 35 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетона, тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 10.1.2.
10.1.2 Условия хроматографирования.
Газовый хроматограф, оснащенный ЭЗД.
Хроматографическая, капиллярная, кварцевая колонка, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% метилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).
Температура детектора: плюс 300 °C.
Температура испарителя: плюс 280 °C.
Температура термостата колонки программированная. Начальная температура — плюс 180 °C, нагрев колонки со скоростью 15 °C/мин до температуры плюс 270 °C, выдержка 1 минута, нагрев колонки со скоростью 10 °C/мин до температуры плюс 280 °C, выдержка 3 минуты.
Хроматографируемый объем: 1 мм3.
Линейный диапазон детектирования: 0,1 — 1,0 нг.
Ориентировочное время удерживания проквиназида: 8,576 минут.
10.2 Выполнение определения методом ГХ-МС.
10.2.1 Приготовление пробы для анализа.
Образец воды объемом 100 см3 фильтруют через бумажный (неплотный) фильтр и пропускают через патрон (картридж), подготовленный по п. 8.6, со скоростью прохождения пробы 1 — 2 см3/мин. После нанесения пробы патрон промывают 2 см3 смеси вода-ацетонитрил (8:2, по объему). Проквиназид элюируют с патрона 6 см3 смеси ацетонитрил-метанол (1:1, по объему) в круглодонную колбу вместимостью 50 см3. Полученный элюат отдувают досуха в потоке чистого газа, разводят в 1 см3 ацетона, переносят в виалу и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в п. 10.2.2.
10.2.2 Условия хроматографирования.
Хромато-масс-спектрометр с газовым хроматографом, автоматическим пробоотборником, предназначенный для работы с капиллярной колонкой.
Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм.
Температура детектора: квадруполя плюс 150 °C, источника плюс 230 °C, переходной камеры плюс 280 °C.
Температура испарителя: плюс 260 °C.
Температура термостата колонки в режиме программирования. Начальная температура — плюс 170 °C, выдержка 2 минуты, нагрев колонки со скоростью 10 °C/мин до температуры плюс 240 °C, выдержка 4 минуты, нагрев колонки со скоростью 20 °C/мин до температуры плюс 260 °C, выдержка 6 минут.
- поток в колонке: 1,2 см3/мин;
- давление 118,74 кПа;
- средняя линейная скорость 41,992 см/сек;
- хроматографируемый объем 1 мм3;
- режим сканирования — мониторинг выбранных ионов (SIM);
- характеристические ионы с m/z (отношение: масса/заряд): 288 (количественный), 245, 272;
- линейный диапазон детектирования: 0,01 — 0,10 нг.
Образцы воды, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор проквиназида с концентрацией 0,1 мкг/см3, разбавляют ацетоном, не более чем в 50 раз.
XI. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА
11.1 Содержание проквиназида <7> (X1, мг/дм3) рассчитывают по формуле (3):
где: A — концентрация вещества, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади пика, мкг/см3;
V1 — объем элюата, подготовленного для хроматографирования, см3;
Kр — коэффициент разбавления (если образец подвергался разбавлению).
<7> Примечание: идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
11.2 Проверка приемлемости результатов параллельных определений.
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости и удовлетворяет условие (4):
\frac{2*|X_{1} - X_{2}|*100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (4)
где: X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/дм3;
r — значение предела повторяемости (таблица 3.1), при этом r = 2,8 \cdot \sigma_{r} .
При невыполнении условия (4) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
XII. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
12.1 Результат анализа представляют в виде формулы (5):
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{дм}^{3} при вероятности P = 0,95, (5)
где: \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/дм3;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/дм3, рассчитанная по формуле (6);
\Delta = \delta \cdot X/100, (6)
где: \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 3.1), %.
Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
- «содержание проквиназида в пробе воды — менее 0,0001 мг/дм3» <8>;
- «содержание проквиназида в пробе воды — менее 0,002 мг/дм3» <9>.
<8> Примечание: 0,0001 мг/дм3 — предел обнаружения проквиназида в воде при определении методом ГХ-МС.
<9> Примечание: 0,002 мг/дм3 — предел обнаружения проквиназида в воде при определении методом ГХ-ЭЗД.
XIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
13.1. Контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с методическими документами <10>.
<10> ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002; ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст; ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике», введенный в действие постановлением Госстандарта России от 23.04.2002 № 161-ст.
Периодичность и формы контроля определяются руководством по качеству.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Постановление Правительства Российской Федерации от 16.11.2020 № 1847 «Об утверждении перечня измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений».
3. Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением.
4. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения».
5. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений».
6. ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений».
7. ГОСТ Р ИСО 5725-4-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений».
8. ГОСТ Р ИСО 5725-5-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений».
9. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике».
10. ГОСТ Р 53228-2008 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
11. ГОСТ 1770-74 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
12. ГОСТ 29227-91 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
13. ГОСТ OIML R 111-1-2009 «Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования».
14. ГОСТ 2603-79 «Ацетон. Технические условия».
15. ГОСТ 20490-75 «Калий марганцовокислый. Технические условия».
16. ГОСТ 4221-76 «Калий углекислый. Технические условия».
17. ГОСТ 6995-77 «Метанол-яд. Технические условия».
18. ГОСТ 4159-79 «Йод. Технические условия».
19. ГОСТ 4166-76 «Натрий сернокислый. Технические условия».
20. ГОСТ Р 52501-2005 «Вода для лабораторного анализа. Технические условия».
21. ГОСТ 4461-77 «Кислота азотная. Технические условия».
22. ГОСТ 25336-82 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
23. ГОСТ 26678-85 «Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия».
24. ГОСТ ISO 7886-1-2011 «Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования».
25. ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
26. ГОСТ 12.1.019-2017 «Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
27. ГОСТ 12.1.004-91 «Пожарная безопасность. Общие требования».
28. ГОСТ 12.4.009-2017 «Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
29. ГОСТ Р 59024-2020 «Вода. Общие требования к отбору проб».