МУК 4.1.3644-20. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фипронила и его метаболита фипронил-сульфона в молоке, мясе и субпродуктах млекопитающих, продуктах яичных сухих пищевых методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 20.08.2020)
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 20 августа 2020 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФИПРОНИЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТА ФИПРОНИЛ-СУЛЬФОНА В МОЛОКЕ, МЯСЕ И СУБПРОДУКТАХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, ПРОДУКТАХ ЯИЧНЫХ СУХИХ ПИЩЕВЫХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3644-20
1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (В.Н. Ракитский, Н.Е. Федорова, В.В. Баюшева).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 20 августа 2020 г.
I. Общие положения и область применения
1.1. Настоящие методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее — ВЭЖХ) для определения массовой концентрации фипронила и его метаболита фипронил-сульфона (в эквиваленте фипронила) в молоке, мясе и субпродуктах млекопитающих в диапазоне 0,001 — 0,05 мг/кг и 0,00096 — 0,048 мг/кг, в продуктах яичных сухих пищевых в диапазоне 0,002 — 0,1 мг/кг и 0,00192 — 0,096 мг/кг, соответственно.
1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими контроль качества и безопасности объектов окружающей среды.
1.3 МУК носят рекомендательный характер.
II. Физико-химические и токсикологические свойства
2.1. Фипронил — (+/-)-5-амино-1-(2,6-дихлор- \alpha,\alpha,\alpha -трифтор-n-толил)-4-трифторметилсульфинил-пиразол-3-карбонитрил <1>. Брутто-формула C12H4Cl2F6N4OS. Фипронил представляет собой бесцветный кристаллический порошок с запахом плесени. Температура плавления: 203 °C. Давление паров: 3,7·10-4 мПа (при 25 °C). Удельная плотность 1,71 г/см3. Коэффициент распределения в системе н-октанол/вода: KowlogP = 3,75 (при pH 7 и 20 °C). Растворимость в воде (мг/дм3, 20 °C): 3,78. Растворимость в органических растворителях (мг/дм3, 20 °C): ацетон — 545 900; метанол — 137 500; толуол — 3000; гексан — 28. Не устойчив к фотолизу: DT50 — 0,33 дня.
2.2. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс — 92 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для кроликов — 354 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс — 0,36 мг/дм3 воздуха.
2.3. Основным продуктом метаболитической деградации (окисление) фипронила в воде, растениях и почве является фипронил-сульфон.
2.4. Фипронил-сульфон (MB46136). (+/-)-5-амино-1-(2,6-дихлор- \alpha,\alpha,\alpha -трифтор-n-толил)-4-трифторметилсульфонил-пиразол-3-карбонитрил <1>.
<1> В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).
2.5. Фипронил — инсектицид широкого спектра действия — контактный и кишечный яд. Имеет умеренные системные свойства и высокую остаточную активность при обрабатывании листьев, может применяться для обработки и протравливания семян. Блокирует рецепторы насекомых и членистоногих, нарушает передачу нервных импульсов, что приводит к параличу и гибели паразитов.
III. Погрешность измерений
3.1. При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности p = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Метрологические параметры (метод ВЭЖХ-МС-МС)
| Определяемое вещество | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности, P = 0,95) \pm \delta , % | Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), \sigma_{r} , % | Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), \sigma_{R} , % | Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, % | Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, % |
| Фипронил | ||||||
| Молоко | 0,001 — 0,05 | 50 | 4,3 | 6,1 | 12 | 17 |
| Мясо и субпродукты млекопитающих | 0,001 — 0,05 | 50 | 8,6 | 12,0 | 24 | 34 |
| Продукты яичные сухие пищевые | 0,002 — 0,1 | 50 | 7,5 | 10,4 | 21 | 29 |
| Фипронил-сульфон (фипронил-сульфон в эквиваленте фипронила) <2> | ||||||
| Молоко | 0,001 — 0,05 (0,00096 — 0,048) | 50 | 1,5 | 2,1 | 4 | 6 |
| Мясо и субпродукты млекопитающих | 0,001 — 0,05 (0,00096 — 0,048) | 50 | 2,4 | 3,4 | 7 | 9 |
| Продукты яичные сухие пищевые | 0,002 — 0,1 (0,00192 — 0,096) | 50 | 2,3 | 3,3 | 7 | 9 |
<2> В скобках приведен диапазон определяемых концентраций фипронил-сульфона (в эквиваленте фипронила), рассчитанный с учетом коэффициента пересчета содержания фипронил-сульфона на эквивалент фипронила, по соотношению молекулярных масс (К = 0,96).
3.2. Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3.2.
Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для n = 20, P = 0,95
| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/м3 | Диапазон определяемых концентраций, мг/м3 | Полнота извлечения вещества, % | Стандартное отклонение, % | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
| Фипронил | |||||
| Молоко | 0,001 | 0,001 — 0,05 | 95,1 | 13,2 | 6,9 |
| Мясо и субпродукты млекопитающих | 0,001 | 0,001 — 0,05 | 94,4 | 14,5 | 7,6 |
| Продукты яичные сухие пищевые | 0,002 | 0,002 — 0,1 | 102,5 | 16,5 | 8,6 |
| Фипронил-сульфон (фипронил-сульфон в эквиваленте фипронила) <3> | |||||
| Молоко | 0,001 (0,00096) | 0,001 — 0,05 (0,00096 — 0,048) | 93,5 | 6,4 | 3,3 |
| Мясо и субпродукты млекопитающих | 0,001 (0,00096) | 0,001 — 0,05 (0,00096 — 0,048) | 91,4 | 14,3 | 7,4 |
| Продукты яичные сухие пищевые | 0,002 (0,00192) | 0,002 — 0,1 (0,00192 — 0,096) | 102,2 | 13,4 | 7,0 |
<3> В скобках приведен диапазон определяемых концентраций фипронил-сульфона (в эквиваленте фипронила), рассчитанный с учетом коэффициента пересчета содержания фипронил-сульфона на эквивалент фипронила, по соотношению молекулярных масс (К = 0,96).
IV. Метод измерений
4.1. Методика основана на определении веществ с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором.
4.2. Экстракцию веществ из анализируемых проб выполняют ацетонитрилом, содержащим 1% уксусной кислоты, с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния и хлорида натрия), очистку экстрактов проводят методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе амина, октадецилсилана и графитизированной сажи.
4.3. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы
5.1. При выполнении измерений и подготовке проб применяют средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы, приведенные в табл. 5.1 - 5.3.
| Наименование средств измерения | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки | Внесено в Реестр «Утвержденные типы средств измерений» Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений |
| Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5 — 790 мм рт. ст. | ГОСТ 6359 |
| Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 110 г, предел допустимой погрешности +/- 0,1 мг | ГОСТ Р 53228 |
| Весы лабораторные, наибольший предел взвешивания 420 г, предел допустимой погрешности +/- 0,01 г | ГОСТ Р 53228 |
| Колбы мерные вместимостью 50, 100, 1000 см3 | ГОСТ 1770 |
| Меры массы | ГОСТ OIML R 111 |
| Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0 и 10 см3 | ГОСТ 29227 |
| Микропипетки градуированные 1-го класса точности вместимостью 0,1 и 0,2 см3 | ГОСТ 8.100 |
| Термометр с диапазоном измерений от 0 °C до 55 °C и ценой деления 0,1 °C | ГОСТ 28498 |
| Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 100, 250 и 500 см3 | ГОСТ 1770 |
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
| Наименование реактивов | Обозначение и наименование документов, технические характеристики |
|---|---|
| Фипронил, аналитический стандарт | Содержание основного компонента не менее 95% |
| Фипронил-сульфон, аналитический стандарт | Содержание основного компонента не менее 95% |
| Азот осч, из баллона | ГОСТ 9293 |
| Ацетонитрил для хроматографии, хч | Чистота не менее 99,9% |
| Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная) | ГОСТ Р 52501 |
| Калий углекислый (карбонат калия, поташ), химически чистый, прокаленный | ГОСТ 4221 |
| Магний сернокислый (сульфат магния), безводный химически чистый | ГОСТ 4523 |
| Натрий хлористый (хлорид натрия), химически чистый | ГОСТ 4233 |
| Сорбент для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина | - |
| Сорбент для твердофазной экстракции на основе октадецильных групп | - |
| Графитизированная сажа | - |
| Метиловый спирт (метанол), хч | ГОСТ 6995 |
| Муравьиная кислота, 99,7%, чда | ГОСТ 5848 |
| Уксусная кислота, 99,5%, чда | ГОСТ 61 |
| Аммоний уксуснокислый (ацетат аммония) чистый для анализа | Чистота не менее 99,0% |
| Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч | Чистота не менее 99,0% |
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.
Вспомогательные устройства, материалы
Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
VI. Требования безопасности
6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.
6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см2), необходимо соблюдать нормы и правила <4>. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.
<4> Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 № 116.
6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
VII. Условия измерений
7.1 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
VIII. Подготовка к выполнению измерений
8.1 Очистка органических растворителей.
8.1.1. Ацетонитрил. Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм3 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм3 ацетонитрила 10 г карбоната калия).
8.2 Подготовка подвижной фазы.
Компонент А: раствор 5 мМ (вес/объем) ацетата аммония + 0,1% (по объему) раствор муравьиной кислоты в воде. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 0,385 г ацетата аммония, растворяют в 300 — 00 см3 бидистиллированной воды, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки водой, перемешивают.
Компонент Б: раствор 0,1% (по объему) муравьиной кислоты в метаноле. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 метанола, вносят 1,0 см3 муравьиной кислоты, доводят до метки метанолом, перемешивают.
Растворы компонентов подвижной фазы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.
8.3. Кондиционирование хроматографической колонки. Промывают колонку подвижной фазой (смесь компонентов А и Б, приготовленных по п. 8.2, в соотношении 1 : 1) при скорости подачи растворителя 0,3 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
8.4. Приготовление раствора уксусной кислоты в ацетонитриле с объемной долей 1% (1%-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 300 — 400 см3 ацетонитрила, вносят 10 см3 ледяной уксусной кислоты, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.
8.5 Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения.
8.5.1. Исходный раствор фипронила для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,01 +/- 0,0001 г фипронила, растворяют в 50 — 70 см3 ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике (4 +/- 2 °C) в течение 6 месяцев.
8.5.2. Исходный раствор фипронил-сульфона для градуировки (концентрация 100 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,01 +/- 0,0001 г фипронил-сульфона, растворяют в 50 — 70 см3 ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в холодильнике (4 +/- 2 °C) в течение 6 месяцев.
8.5.3. Рабочий раствор № 1 фипронила и фипронил-сульфона для градуировки и внесения (концентрация 1 мкг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают по 1,0 см3 исходных градуировочных растворов фипронила и фипронил-сульфона с концентрациями 100,0 мкг/см3 (п.п. 8.5.1 и 8.5.2), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор № 1 с концентрациями фипронила и фипронил-сульфона по 1,0 мкг/см3.
Раствор хранят в холодильнике при температуре 2 — 6 °C в течение месяца.
Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом «внесено-найдено», а также контроле качества результатов измерений методом добавок.
8.5.4. Рабочие растворы № 2 — 6 фипронила и фипронил-сульфона для градуировки (концентрации 0,001 — 0,05 мкг/см3). В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 0,1, 0,2, 0,5; 1,0 и 5,0 см3 градуировочного раствора № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см3 (п. 8.5.3), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2 — 6 с концентрацией фипронила и фипронил-сульфона 0,001, 0,002, 0,005; 0,01 и 0,05 мкг/см3, соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике при температуре 2 — 6 °C в течение одной недели.
8.6. Приготовление смеси солей для экстракции. Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают (4 +/- 0,01) г магния сернокислого и (1 +/- 0,01) г натрия хлористого, до использования хранят в герметичной упаковке (не более 6 месяцев).
Возможно использование наборов солей для экстракции проб фруктов и овощей массой 10 г.
8.7. Приготовление смеси сорбентов для очистки экстрактов. Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 2 см3 помещают (50 +/- 4) мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, (50 +/- 4) мг графитизированной сажи, (150 +/- 4) мг магния сернокислого и (50 +/- 4) мг твердофазного сорбента на основе октадецилсилана, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6 месяцев.
Возможно использование дисперсионных наборов для фруктов и овощей с маслом и пигментами, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 2 см3.
8.8. Установление градуировочных характеристик. Градуировочные характеристики, выражающие линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика от концентрации фипронила или фипронил-сульфона в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки NN 2 — 6.
В инжектор хроматографа вводят по 5 мм3 каждого градуировочного раствора, приготовленного по п. 8.5.4 и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков веществ, на основании которых строят градуировочную зависимость.
Контроль стабильности градуировочных характеристик проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочных характеристик проводят измерения не менее двух градуировочных растворов, содержание фипронила и фипронил-сульфона в которых должно входить в диапазон линейности градуировочной характеристики от 0,001 до 0,05 мкг/см3.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
\text{А } = \frac{(X - C) \cdot 100}{C} \leq B , где (1)
X — концентрация фипронила или фипронил-сульфона в пробе при контрольном измерении, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора фипронила или фипронил-сульфона, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
B — норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (B = 20% при P = 0,95).
Если величина расхождения (A) превышает 20%, делают вывод о невозможности применения градуировочных характеристик для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочных характеристик и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов фипронила и фипронил-сульфона, предусмотренных МУК. При повторном обнаружении нестабильности градуировочных характеристик устанавливают ее заново согласно п. 8.8.
IX. Отбор и хранение проб
9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами <5>.
<5> ГОСТ 26809.1 «Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты»; ГОСТ 31450 «Молоко питьевое. Технические условия»; ГОСТ 33818 «Мясо. Говядина высококачественная. Технические условия»; ГОСТ 32244 «Субпродукты мясные обработанные. Технические условия»; ГОСТ 30363 «Продукты яичные жидкие и сухие пищевые».
9.2. Пробы молока хранят при температуре 2 — 6 °C не более одной недели, пробы мяса и субпродуктов млекопитающих не более суток. Пробы продуктов яичных сухих пищевых хранят при комнатной температуре не более 2 недель.
9.3. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре не выше -18 °C.
X. Выполнение определения
10.1. Экстракция. Образец молока, измельченного мяса или субпродуктов млекопитающих массой 10 г, продуктов яичных сухих пищевых массой 5 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Пробу молока, измельченного мяса или субпродуктов млекопитающих помещают на 10 — 15 мин в морозильную камеру. Добавляют 10 см3 1% раствора уксусной кислоты в ацетонитриле (подготовленного по п. 8.4). В пробу меланжа вносят 10 см3 бидистиллированной воды, в пробу порошка яичного белка пастеризованного — 15 см3 бидистиллированной воды. Помещают в пробирку керамический гомогенизатор, закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 1 мин, вносят в пробирку смесь солей для экстракции (приготовленную по п. 8.6), закрывают крышкой и снова интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу помещают на 10 — 15 мин в морозильную камеру, центрифугируют в течение 5 мин при скорости вращения 4000 об./мин и подвергают очистке с применением дисперсионной твердофазной экстракции по п. 10.2.
10.2. Очистка экстракта. Надосадочную жидкость (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 1,5 — 1,8 см3 с помощью пипетки переносят в полипропиленовую центрифужную пробирку, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по п. 8.7. Закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную в течение 30 с. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4000 об./мин и помещают в морозильник на 10 — 15 мин. Отбирают с помощью медицинского шприца раствор, фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,22 мкм) в стеклянную виалу на 1,5 см3 и анализируют по п. 10.3.
10.3 Условия хроматографирования. Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь с источником ионизации, оснащенным соосной подачей горячего азота для эффективной десольвации ионов.
Хроматографическая колонка стальная, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм.
- источник ионизации: электростатическое распыление;
- режим работы: регистрация дочерних отрицательных ионов после разрушения материнских ионов (регистрация «перехода»).
Фипронил — материнский ион (масса/заряд): 434,9; дочерние ионы (масса/заряд): 329,9 (количественный расчет), 249,9; напряжение на фрагментаторе, В: 106; энергия разрушения (соударения), В: 13(434,9 \rightarrow 329,9) , 25(434,9 \rightarrow 249,9) ;
Фипронил-сульфон — материнский ион (масса/заряд): 450,9; дочерние ионы (масса/заряд): 414,9 (количественный расчет), 282,0, напряжение на фрагментаторе, В: 109; энергия разрушения (соударения), В: 13(450,9 \rightarrow 414,9) , 25(450,9 \rightarrow 282,0) ;
- скорость сканирования: 200 мс;
- давление на распылителе: 35 psi;
- скорость осушающего газа 1 (азот): 10 дм3/мин;
- температура газа 1: 250 °C;
- скорость газа 2 (азот): 11 дм3/мин;
- температура газа 2: 340 °C;
- температура квадруполей (1 и 3): 100 °C;
- температура колонки: 40 °C;
- скорость потока элюента: 0,3 см3/мин;
- объем вводимой пробы: 5 мм3.
- режим элюирования (градиентный), пробег 5 мин (табл. 10);
- линейный диапазон детектирования 5 — 250 пг.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией вещества 0,05 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).
XI. Обработка результатов анализа
11.1. Содержания фипронила и его метаболита фипронил-сульфона (в эквиваленте фипронила) в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формулам:
X = \frac{A \cdot V \cdot 100}{m \cdot f} (2)
фипронил-сульфон (в эквиваленте фипронила):
X = \frac{\text{Б} \cdot V \cdot \text{К } \cdot 100}{m \cdot f} , где (3)
А — концентрация фипронила, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
Б — концентрация фипронил-сульфона, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г;
f — полнота извлечения метрибузина (табл. 3.2), %;
К — коэффициент пересчета содержания фипронил-сульфона на эквивалент фипронила, по соотношению молекулярных масс (К = 0,96).
Если в процессе анализа идентифицируются оба вещества (фипронил и фипронил-сульфон), то их содержания суммируются.
XII. Оформление результатов
12.1 Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta)\text{мг}/\text{кг} при вероятности P = 0,95, где
\overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг.
\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} , где (4)
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности, равен 50%, табл. 3.1).
Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание фипронила (фипронил-сульфона в эквиваленте фипронила) в пробе молока, мяса и субпродуктов млекопитающих менее 0,001 (0,00096) мг/кг, в пробе продуктов яичных сухих пищевых менее 0,002 (0,00192) мг/кг» <6>.
<6> 0,001 (0,00096) мг/кг — нижний предел количественного определения в пробе молока, мяса и субпродуктов млекопитающих, 0,002 (0,00192) мг/кг — в пробе продуктов яичных сухих пищевых.
XIII. Контроль качества результатов измерений
13.1. Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
C_{\text{д}} \geq \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime} , где (5)
\pm \Delta_{\text{л},X} ( \pm \Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta , где (6)
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} , где
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1), %.
Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:
\text{К}_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\text{д}} , где (7)
\overline{X}\prime , \overline{X} , Cд — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми в главе XII) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}} (8)
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (10) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (10) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости. Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R , где (10)
X1, X2 - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1, 3.2), %.
Библиографические ссылки
1. ГОСТ Р ИСО 5725 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
2. ГОСТ Р 53228 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания».
3. ГОСТ 29227 «Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования».
4. ГОСТ 28498 «Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний».
5. ГОСТ 1770 «Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия».
6. ГОСТ OIML R 111 «Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов E(1), E(2), F(1), F(2), M(1), M(1-2), M(2), M(2-3) и M(3). Часть 1. Метрологические и технические требования».
7. ГОСТ 2603 «Реактивы. Ацетон. Технические условия».
8. ГОСТ 20490 «Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия».
9. ГОСТ 4221 «Реактивы. Калий углекислый. Технические условия».
10. ГОСТ 4233 «Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия».
11. ГОСТ 25336 «Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры».
12. ГОСТ 12.1.007 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности».
13. ГОСТ 12.1.019 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты».
14. ГОСТ 12.1.004 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования».
15. ГОСТ 12.4.009 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание».
16. ГОСТ 12.0.004 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Организация обучения безопасности труда. Общие положения».
17. ГОСТ 26809.1 «Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты».
18. ГОСТ 31450 «Молоко питьевое. Технические условия».
19. ГОСТ 33818 «Мясо. Говядина высококачественная. Технические условия».
20. ГОСТ 32244 «Субпродукты мясные обработанные. Технические условия».
21. ГОСТ 30363 «Продукты яичные жидкие и сухие пищевые».
22. Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением, утвержденные приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 № 116.