МУК 4.1.3522-17. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 29.12.2017)
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 29 декабря 2017 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФЛУТОЛАНИЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ M-2, M-4, M-101 И M-102 В ВОДЕ, ПОЧВЕ И КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3522-17
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом — МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (А.В. Довгилевич, Е.В. Довгилевич, Е.Н. Тестова, Р.А. Стрелецкий).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 24 ноября 2017 г. № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 29 декабря 2017 г.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием для определения массовых концентраций флутоланила и его метаболитов, содержащих 2-трифторметилбензойные кислотные группы (M-2, M-4, M-101 и M-102) в воде в диапазоне 0,001 — 0,010 мг/дм3 и в почве в диапазоне 0,01 — 0,1 мг/кг, а также уровня их остаточных количеств в клубнях картофеля в диапазоне 0,01 — 0,1 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.
\alpha , \alpha , \alpha -трифтор-3'-изопропокси-орто-толуанилид.
Эмпирическая формула: C17H16F3NO2.
Агрегатное состояние: порошок.
Давление паров: 4,1 x 10-4 МПа (25 °C).
Коэффициент распределения октанол/вода (при pH 7, 20 °C): Kow logP = 3,17.
Температура плавления: 104,6 °C.
Растворимость в воде (мг/дм3, 20 °C): 8,01.
Растворимость в органических растворителях (г/дм3, при 20 °C): ацетон — 606; этилацетат — 365; метанол — 322; толуол — 35.
Гидролитически стабилен при pH от 5 до 9.
Устойчив в почве, ДТ50: 233 дня.
Краткая токсикологическая характеристика. Флутоланил относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 для крыс более 10 000 мг/кг) и по дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более 5 000 мг/кг массы тела) и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 часа) более 5 980 мг/м3). Не раздражает слизистую глаз и кожу кроликов.
Область применения. Флутоланил — фунгицид из класса оксатиинов системного действия. Ингибирует комплекс сукцинатдегидрогеназы базидиомицетов. Сукцинатдегидрогеназа представляет собой белковый комплекс, который является составной частью внутренней митохондриальной мембраны и ключевым элементом в цепи переноса электронов млекопитающих.
В России установлены следующие гигиенические нормативы: ВДСД — 0,09 мг/кг массы тела человека.
ВМДУ для импортируемой продукции (мг/кг): рис — 2,0; картофель — 0,1.
\alpha , \alpha , \alpha -трифтор-4'-гидрокси-3'-изопропокси-орто-толуанилид.
Эмпирическая формула: C17H16F3NO3.
\alpha , \alpha , \alpha -трифтор-3'-гидрокси-орто-толуанилид.
Эмпирическая формула: C14H10F3NO2.
Эмпирическая формула: C8H6F3NO.
2-(трифторметил)бензойная кислота.
Эмпирическая формула: C8H5F3O2.
ВМДУ в импортируемой продукции (мг/кг): рис — 2,0; картофель — 0,1.
1. Погрешность измерений
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Метрологические параметры для флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102
2. Метод измерений
Метод основан на определении флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием тандемного масс-спектрометрического детектора (ВЭЖХ-МС-МС).
Определение флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в воде проводится после их экстракции хлористым метиленом из подкисленного образца воды.
Определение флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в почве проводится после их экстракции подкисленным ацетонитрилом и дальнейшего концентрирования и разбавления полученного экстракта.
Определение метаболита флутоланила M-102 в почве проводится после его экстракции подкисленным ацетонитрилом и дальнейшей очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами.
Определение флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в клубнях картофеля проводится после их экстракции подкисленным ацетонитрилом и дальнейшего концентрирования и разбавления полученного экстракта.
Идентификация флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 проводится по времени удерживания, наличию характеристических ионов в масс-спектрах хроматографически выделенных веществ и соотношению интенсивностей (площадей) пиков, отвечающих характеристическим ионам идентифицируемых компонентов и аналитических стандартов на регистрируемых ионных масс-хроматограммах. Концентрацию флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 определяют по площадям соответствующих хроматографических пиков на ионных масс-хроматограммах по методу абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность метода достигается за счет использования масс-спектрометрического детектора, регистрирующего одновременно несколько специфичных дочерних ионов, характеризующих вещество.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1 Средства измерений
| Весы аналитические класса точности — специальный (I) с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г | ГОСТ Р 53228-08 |
|---|---|
| Весы лабораторные общего назначения класса точности — средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г | ГОСТ Р 53228-08 |
| Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см3 | ГОСТ 1770-74 |
| Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см3 | ГОСТ 29227-91 |
| pH-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0 — 14 pH; +/- 1 999 мВ | |
| Система высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектором, включающая: - модульный жидкостный хроматограф, состоящий из градиентного насоса на два растворителя, позволяющий регулировать поток элюента от 0,001 до 5,0 см3/мин и создавать давление от 0 до 600 бар; вакуумного дегазатора; термостата колонок с двумя независимо нагреваемыми зонами с диапазоном температур от 10 до 80 °C; автоматического дозатора проб с использованием виал на 2 см3. ВЭЖХ-система соединена с тандемным масс-спектрометрическим детектором типа тройная квадруполь с источником ионизации типа электроспрей и оснащенным двумя высокопроизводительными турбомолекулярными насосами, позволяющим регистрировать отдельные ионы с заданными массами от 5 до 3 000 а.е.м. - компьютерную систему обработки данных, контролирующую работу всего прибора, обеспечивающую сбор и хранение всех масс-хроматограмм в процессе проведения хромато-масс-спектрометрического анализа, обеспечивающую обработку результатов измерений, вывод и расчет масс-хроматограмм и количественный анализ |
|
| Цилиндры мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см3 | ГОСТ 1770-74 |
Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
| Флутоланил, CAS 66332-96-5, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,6% | |
|---|---|
| M-2, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,8% | |
| M-4, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 100,0% | |
| M-101, CAS 360-64-5, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 100,0% | |
| M-102, CAS 433-97-6, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,8% | |
| Азот, осч | ГОСТ 9293-74 |
| Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм | ТУ 6-09-2167-84 |
| Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) | ГОСТ 6709-72 |
| Гидроксид аммония, не менее 25% по аммиаку, (аммиак водный), чда | ГОСТ 3760-79 |
| Кальций хлористый, ч | ТУ 6-09-4711-81 |
| Кислота муравьиная, чда | ГОСТ 5848-73 |
| Кислота соляная, хч | ГОСТ 3118-77 |
| Метилен хлористый, хч | ТУ 2631-019-44493179-98 |
| Натрий сернокислый, безводный, хч | ГОСТ 4166-76 |
| Натрий хлористый, хч | ГОСТ 4233-77 |
Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3 Вспомогательные устройства и материалы
| Аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту | |
|---|---|
| Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 | |
| Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная | ГОСТ 5556-81 |
| Виалы объемом 2 см3, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб | |
| Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3 | |
| Воронки делительные на 250 см3 | ГОСТ 25336-82 |
| Воронки лабораторные, стеклянные | ГОСТ 25336-82 |
| Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °C | |
| Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 000 см3 | ГОСТ 25336-82 |
| Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4 000 см3 ТС | ТУ 92-891.029-91 |
| Колонка хроматографическая стальная длиной 100 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18 | |
| Насос диафрагменный, химически стойкий на 100% с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин | |
| Предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18 | |
| Стаканы стеклянные термостойкие объемом 100 — 500 см3 | ГОСТ 25336-82 |
| Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1 000 см3 | |
| Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г | ТУ 6-09-1678-95 |
| Центрифуга лабораторная настольная с максимальным рабочим числом оборотов 4 000 об./мин, с рабочим объемом ротора 200 см3 x 4 ячейки, выбираемый временной диапазон работы от 0 до 100 минут и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см3 | |
| Шарики из углеродистой стали для экстракции диаметром 8 мм |
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на комплекс жидкостного хроматографа с масс-спектрометрическим детектором.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004-91.
5. Требования к квалификации операторов
Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе с масс-спектрометрическим детектором проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению определений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочных характеристик.
7.1 Подготовка органических растворителей
7.1.1 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.
7.1.2 Приготовление бидистиллированной воды
Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов.
Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.
7.1.3 Очистка хлористого метилена
Хлористый метилен промывают равным объемом 5%-го раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 часов. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.
7.2 Приготовление растворов для проведения анализа
7.2.1 Приготовление рабочих растворов
7.2.1.1 Приготовление 5%-го раствора гидрокарбоната натрия
В мерную колбу на 1 000 см3 переносят 50 г гидрокарбоната натрия, добавляют 200 — 300 см3 дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.
7.2.1.2 Приготовление подкисленного ацетонитрила для экстракции
В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 ацетонитрила, прибавляют 10,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки ацетонитрилом.
7.2.1.3 Приготовление 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты
В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 1,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки бидистиллированной водой. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
7.2.1.4 Приготовление 0,1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле
В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 ацетонитрила, прибавляют 1,0 см3 муравьиной кислоты, перемешивают, объем доводят до метки ацетонитрилом. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
7.2.1.5 Приготовление 10 мМ водного раствора гидроксида аммония (по аммиаку)
В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 бидистиллированной воды, прибавляют 0,75 см3 25%-го раствора гидроксида аммония, перемешивают, объем доводят до метки бидистиллированной водой. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
7.2.1.6 Приготовление 10 мМ раствора гидроксида аммония в ацетонитриле
В мерную колбу объемом 1 дм3 помещают 500 см3 ацетонитрила, прибавляют 0,75 см3 25%-го раствора гидроксида аммония, перемешивают, объем доводят до метки ацетонитрилом. Раствор используется как компонент подвижной фазы.
7.2.1.7 Приготовление 6 М раствора соляной кислоты
Мерным цилиндром отбирают 246 см3 концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 500 см3, куда предварительно наливают около 100 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
7.2.2 Приготовление градуировочных растворов
7.2.2.1 Стандартный раствор № 1 с концентрацией флутоланила 1,0 мг/см3
Взвешивают 10 мг флутоланила в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.2.2 Стандартный раствор № 2 с концентрацией M-2 1,0 мг/см3
Взвешивают 10 мг M-2 в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.2.3 Стандартный раствор № 3 с концентрацией M-4 1,0 мг/см3
Взвешивают 10 мг M-4 в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 3 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 3 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.2.4 Стандартный раствор № 4 с концентрацией M-101 1,0 мг/см3
Взвешивают 10 мг M-101 в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 4 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 4 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.2.5 Стандартный раствор № 5 с концентрацией M-102 1,0 мг/см3
Взвешивают 10 мг M-102 в мерной колбе объемом 10 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор № 5 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 5 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.
7.2.2.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией флутоланила, M-2, M-4, M-101 и M-102 по 10,0 мкг/см3
Из стандартных растворов № 1, 2, 3, 4 и 5 отбирают пипеткой по 1 см3 каждого раствора и помещают в мерную колбу объемом 100 см3. Доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании. Стандартный раствор № 6 используется для приготовления стандартных растворов для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 6 хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
7.2.2.7. Стандартные растворы флутоланила, M-2, M-4, M-101 и M-102 с концентрацией по 2,0; 1,0; 0,4; 0,2 и 0,1 мкг/см3 для внесения в контрольные образцы
Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 6 готовят растворы, содержащие по 2,0; 1,0; 0,4; 0,2 и 0,1 мкг/см3 и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы.
7.2.2.8 Стандартный раствор № 7 с концентрацией флутоланила, M-2, M-4 и M-101 по 10,0 мкг/см3
Из стандартных растворов № 1, 2, 3 и 4 отбирают пипеткой по 1 см3 каждого раствора и помещают в мерную колбу объемом 100 см3. Доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании. Стандартный раствор № 7 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и для установления градуировочной зависимости. Стандартный раствор № 7 хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
7.2.2.9 Стандартный раствор № 8 с концентрацией M-102 10,0 мкг/см3
Из стандартного раствора № 5 отбирают пипеткой 1 см3 раствора и помещают в мерную колбу объемом 100 см3. Доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании. Стандартный раствор № 8 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и для установления градуировочной зависимости. Стандартный раствор № 8 хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
7.2.2.10. Стандартные растворы флутоланила, M-2, M-4 и M-101 с концентрацией по 0,025; 0,01; 0,005 и 0,002 мкг/см3
Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 7 готовят растворы, содержащие по 0,025; 0,01; 0,005 и 0,002 мкг/см3 и используют эти растворы для установления градуировочной зависимости для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в воде. Стандартные растворы хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
7.2.2.11. Стандартные растворы флутоланила, M-2, M-4 и M-101 с концентрацией по 0,025; 0,01; 0,007 и 0,002 мкг/см3
Методом последовательного разведения стандартного раствора № 7 готовят растворы, содержащие по 0,025; 0,01; 0,007 и 0,002 мкг/см3 и используют эти растворы для установления градуировочной зависимости для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в почве. Стандартные растворы готовятся на основе матрицы, т.е. в качестве растворителя используется очищенный экстракт контрольного образца почвы, подготовленный по п. 9.2. Стандартные растворы хранят в холодильнике не более 7 дней.
7.2.2.12. Стандартные растворы флутоланила, M-2, M-4 и M-101 с концентрацией по 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3
Методом последовательного разведения стандартного раствора № 7 готовят растворы, содержащие по 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3 и используют эти растворы для установления градуировочной зависимости для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в клубнях картофеля. Стандартные растворы готовятся на основе матрицы, т.е. в качестве растворителя используется очищенный экстракт контрольного образца клубней картофеля, подготовленный по п. 9.3. Стандартные растворы хранят в холодильнике не более 7 дней.
7.2.2.13 Стандартные растворы M-102 с концентрацией 0,25; 0,1; 0,05 и 0,02 мкг/см3
Методом последовательного разведения ацетонитрилом стандартного раствора № 8 готовят растворы, содержащие по 0,25; 0,1; 0,05 и 0,02 мкг/см3 и используют эти растворы для установления градуировочной зависимости для определения M-102 в воде и почве. Стандартные растворы хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
7.2.2.14 Стандартные растворы M-102 с концентрацией 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3
Методом последовательного разведения стандартного раствора № 8 готовят растворы, содержащие по 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3 и используют эти растворы для установления градуировочной зависимости для определения M-102 в клубнях картофеля. Стандартные растворы готовятся на основе матрицы, т.е. в качестве растворителя используется очищенный экстракт контрольного образца клубней картофеля, подготовленный по п. 9.3. Стандартные растворы хранят в холодильнике не более 7 дней.
7.3 Установление градуировочной характеристики
Градуировочные характеристики, выражающие отклик целевых ионов от концентрации флутоланила и его метаболитов в растворе (мкг/см3), устанавливают путем определения соотношения интенсивности (площади) пиков, отвечающих характеристичным ионам идентифицируемого компонента и аналитического стандарта на регистрируемых ионных масс-хроматограммах по 4 растворам для установления градуировочной характеристики.
Градуировочную зависимость для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в воде устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,025; 0,01; 0,005 и 0,002 мкг/см3 каждого компонента, приготовленным согласно п. 7.2.2.10.
Градуировочную зависимость для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в почве устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,025; 0,01; 0,007 и 0,002 мкг/см3 каждого компонента, приготовленным согласно п. 7.2.2.11.
Градуировочную зависимость для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101 в клубнях картофеля устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3 каждого компонента, приготовленным согласно п. 7.2.2.12.
Градуировочную зависимость для определения M-102 в воде и почве устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,25; 0,1; 0,05 и 0,02 мкг/см3, приготовленным согласно п. 7.2.2.13.
Градуировочную зависимость для определения M-102 в клубнях картофеля устанавливают по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,025; 0,015; 0,005 и 0,002 мкг/см3, приготовленным согласно п. 7.2.2.14.
В инжектор хроматографа вводят по 5 мм3 (при определении флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101) или 10 мм3 (при определении M-102) каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.4. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
7.4 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной
хроматографии
Хроматографическую колонку с предколонкой устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 40 °C 3 — 4 часа.
8. Отбор проб и хранение
Отбор проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ 31861-12 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 17.4.3.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 28168-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 7176-85 «Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый. Технические условия», ГОСТ Р 51808-13 «Картофель продовольственный. Технические условия», ГОСТ 26832-86 «Картофель свежий для переработки на продукты питания. ТУ».
Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C не более 10 суток.
Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Пробы клубней картофеля хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 — 4 °C в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °C не более 3 лет.
9. Выполнение определения
9.1 Вода
9.1.1 Экстракция
Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку объемом 250 см3. Добавляют 15 г хлорида натрия и растворяют его путем встряхивания. Подкисляют водную фазу 6 М соляной кислотой до значения pH 2.
Флутоланил и его метаболиты экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3 каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 4 см3 ацетонитрила, пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 5 мм3 (при определении флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101) или 10 мм3 (при определении M-102) пробы вводят в хроматограф.
9.2 Почва
9.2.1 Экстракция
При экстракции в каждую банку с пробой и растворителем помещается по 5 шариков для экстракции, которые перед центрифугированием удаляются.
Образец почвы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, добавляют 50 см3 подкисленного ацетонитрила (п. 7.2.1.2) и помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 15 минут на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4 000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в мерный цилиндр объемом 100 см3. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 20 см3 подкисленного ацетонитрила и помещая пробы на 5 минут в ультразвуковую ванну, а затем на 15 минут на аппарат для встряхивания проб. Пробы центрифугируют в течение 5 минут при скорости 4 000 оборотов в минуту. Экстракты фильтруют, объединяют в мерном цилиндре объемом 100 см3. Объем экстракта в цилиндре доводят до метки 100 см3 подкисленным ацетонитрилом.
9.2.2 Подготовка экстракта для определения флутоланила
и его метаболитов M-2, M-4 и M-101
Из объединенного экстракта, подготовленного по п. 9.2.1, берут аликвоту 12,5 см3 (1/8 часть), переносят ее в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают до объема менее 5 см3 на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C.
Сконцентрированный экстракт из концентратора переносят в мерный цилиндр объемом 10 см3. Исходную колбу обмывают порцией ацетонитрила, необходимой для получения общего объема экстракта 5 см3 (5 см3 минус объем экстракта, перенесенного в цилиндр), помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну и объединяют экстракт с предыдущим в мерном цилиндре объемом 10 см3. К ацетонитрильному экстракту в цилиндре добавляют 5 мл 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты.
Пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 5 мм3 пробы вводят в хроматограф.
9.2.3 Подготовка экстракта для определения метаболита
флутоланила M-102
Из объединенного экстракта, подготовленного по п. 9.2.1, берут аликвоту 50 см3 (1/2 часть), переносят ее в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C.
9.2.4 Очистка полученного экстракта перераспределением
в системе несмешивающихся растворителей
К водному остатку, полученному по п. 9.2.3, добавляют 20 см3 дистиллированной воды, обмывают стенки концентратора и переносят в делительную воронку объемом 250 см3. Добавляют в делительную воронку 5 г хлорида натрия, растворяя его путем встряхивания.
Метаболит флутоланила M-102 экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 10 см3 каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 4 см3 ацетонитрила, пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 10 мм3 пробы вводят в хроматограф.
9.3 Клубни картофеля
9.3.1 Экстракция
Образец измельченных клубней картофеля массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см3, добавляют 50 см3 подкисленного ацетонитрила (п. 7.2.1.2) и помещают на 30 минут на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 10 минут при скорости 4 000 оборотов в минуту. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в мерный цилиндр объемом 100 см3. Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 20 см3 подкисленного ацетонитрила и помещая пробы на 30 минут на аппарат для встряхивания проб. Пробы центрифугируют в течение 10 минут при скорости 4 000 оборотов в минуту. Экстракты фильтруют, объединяют в мерном цилиндре объемом 100 см3. Объем экстракта в цилиндре доводят до метки 100 см3 подкисленным ацетонитрилом.
9.3.2 Подготовка экстракта для определения флутоланила
и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102
Из объединенного экстракта, подготовленного по п. 9.3.1, берут аликвоту 12,5 см3 (1/8 часть), переносят ее в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают до объема менее 5 см3 на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °C.
Сконцентрированный экстракт из концентратора переносят в мерный цилиндр объемом 10 см3. Исходную колбу обмывают порцией ацетонитрила, необходимой для получения общего объема экстракта 5 см3 (5 см3 минус объем экстракта, перенесенного в цилиндр), помещают на 5 минут в ультразвуковую ванну и объединяют экстракт с предыдущим в мерном цилиндре объемом 10 см3. К ацетонитрильному экстракту в цилиндре добавляют 5 мл 0,1%-го водного раствора муравьиной кислоты.
Пробу переносят в виалу объемом 2 см3 для автоматического дозатора проб и 5 мм3 (при определении флутоланила и его метаболитов M-2, M-4 и M-101) или 10 мм3 (при определении M-102) пробы вводят в хроматограф.
9.4 Условия хроматографирования и масс-спектрометрирования
Система высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектором, включающая:
- модульный жидкостный хроматограф, состоящий из: градиентного насоса на два растворителя, позволяющий регулировать поток элюента от 0,001 до 5,0 см3/мин и создавать давление от 0 до 600 бар; вакуумного дегазатора; термостата колонок с двумя независимо нагреваемыми зонами с диапазоном температур от 10 до 80 °C; автоматического дозатора проб с использованием виал на 2 см3. ВЭЖХ-система соединена с тандемным масс-спектрометрическим детектором типа тройная квадруполь с источником ионизации типа электроспрей и оснащенным двумя высокопроизводительными турбомолекулярными насосами, позволяющим регистрировать отдельные ионы с заданными массами от 5 до 3 000 а.е.м.
- компьютерную систему обработки данных, контролирующую работу всего прибора, обеспечивающую сбор и хранение всех масс-хроматограмм в процессе проведения хромато-масс-спектрометрического анализа, обеспечивающую обработку результатов измерений, вывод и расчет масс-хроматограмм и количественный анализ.
9.4.1 Определение флутоланила и его метаболитов M-4, M-2
и M-101 в воде, почве и клубнях картофеля
Колонка хроматографическая стальная длиной 100 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, с внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Подвижная фаза: 0,1%-й водный раствор муравьиной кислоты — 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле (%, по объему) в градиентном режиме. Градиент потока элюента: 0 мин — 50:50, скорость потока элюента — 0,3 см3/мин; с 1-й по 10-ю мин — 0:100, скорость потока элюента — 0,3 см3/мин; с 10,5-й до 12,5-й мин — 0:100, скорость потока элюента — 1 см3/мин; 13-я мин — 50:50, скорость потока элюента — 0,3 см3/мин.
Время стабилизации хроматографической системы после анализа пробы: 7 мин (общее время анализа 20 мин).
Время подачи элюента во время анализа: 3 — 10 минут.
Газ-осушитель — азот с температурой 320 °C, расход 10 м3/мин.
Расход газа периферийного слоя: 11 м3/мин с температурой 400 °C.
Давление в распылителе: 30 psi.
Напряжение ионизации: 3 500 В.
Режим ионизации: положительный.
Режим сканирования: мониторинг множественных реакций (MRM).
Флутоланил: 324,1 \rightarrow 262,1 — количественный переход, энергия соударения — 15 В; 324,1 \rightarrow 242,2 — качественный переход, энергия соударения — 25 В. Энергия фрагментации: 90 В, время сканирования: 50 мс, напряжение на ускорителе ячейки: 5 В.
M-2: 340,1 \rightarrow 258,1 — переход количественного определения, энергия соударения — 25 В; 340,1 \rightarrow 278,2 — качественный переход, энергия соударения — 20 В. Энергия фрагментации: 100 В, время сканирования: 50 мс, напряжение на ускорителе ячейки: 5 В.
M-4: 282,1 \rightarrow 262,1 — переход количественного определения, энергия соударения — 10 В; 282,1 \rightarrow 242,2 — качественный переход, энергия соударения — 15 В. Энергия фрагментации: 90 В, время сканирования: 50 мс, напряжение на ускорителе ячейки: 5 В.
M-101: 190,1 \rightarrow 102,2 — переход количественного определения, энергия соударения — 30 В, напряжение на ускорителе ячейки — 5 В; 190,1 \rightarrow 170,1 — качественный переход, энергия соударения — 10 В, напряжение на ускорителе ячейки — 7 В. Энергия фрагментации: 90 В, время сканирования: 50 мс.
9.4.2 Определение метаболита флутоланила M-102 в воде
и почве
Предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Подвижная фаза: 0,1%-й водный раствор муравьиной кислоты — 0,1%-й раствор муравьиной кислоты в ацетонитриле в изократическом режиме 30:70 (% по объему).
Скорость потока элюента: 0,3 см3/мин.
Время подачи элюента во время анализа: непрерывно.
Газ-осушитель: азот с температурой 320 °C, расход 10 м3/мин.
Расход газа периферийного слоя: 11 м3/мин с температурой 400 °C.
Давление в распылителе: 30 psi.
Напряжение ионизации: 3 500 В.
Режим ионизации: отрицательный.
Режим сканирования: мониторинг множественных реакций (MRM).
- 188,9 \rightarrow 145,1 — переход количественного определения, время сканирования 50 мс, энергия фрагментации: 80 В, энергия соударения: 10 В, напряжение на ускорителе ячейки: 7 В;
- 188,9 \rightarrow 68,9 — качественный переход, время сканирования: 50 мс, энергия фрагментации: 70 В, энергия соударения: 40 В, напряжение на ускорителе ячейки: 7 В.
9.4.3 Определение метаболита флутоланила M-102 в клубнях
картофеля
Колонка хроматографическая стальная длиной 100 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Предколонка хроматографическая стальная длиной 12,5 мм, с внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами C18.
Подвижная фаза: 10 мМ водный раствор гидроксида аммония — 10 мМ раствор гидроксида аммония в ацетонитриле (%, по объему) в градиентном режиме. Градиент потока элюента: до 11-й мин — 50:50, скорость потока элюента — 0,2 см3/мин; с 11,5-й до 12,5-й мин — 0:100, скорость потока элюента — 0,5 см3/мин; 13-я мин — 50:50, скорость потока элюента — 0,2 см3/мин.
Время стабилизации хроматографической системы после анализа пробы: 11 мин (общее время анализа 24 мин).
Время подачи элюента во время анализа: 4,5 — 7,0 мин.
Газ-осушитель: азот с температурой 320 °C, расход 10 м3/мин.
Расход газа периферийного слоя: 11 м3/мин с температурой 400 °C.
Давление в распылителе: 30 psi.
Напряжение ионизации: 3 500 В.
Режим ионизации: отрицательный.
Режим сканирования: мониторинг множественных реакций (MRM).
- 188,9 \rightarrow 145,1 — переход количественного определения, время сканирования: 50 мс, энергия фрагментации: 80 В, энергия соударения: 10 В, напряжение на ускорителе ячейки: 7 В;
- 188,9 \rightarrow 68,9 — качественный переход, время сканирования: 50 мс, энергия фрагментации: 70 В, энергия соударения: 40 В, напряжение на ускорителе ячейки: 7 В.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартные растворы флутоланила и его метаболитов с концентрацией 0,025 мкг/см3, соответственно разбавляют.
10. Обработка результатов
Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание флутоланила или его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в пробах рассчитывают по формуле без учета полноты извлечения вещества из проб:
X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot \text{А} \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} P , где
X — содержание флутоланила или его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в пробе, мг/кг;
Sст — высота (площадь) пика стандарта, мм;
Sпр — высота (площадь) пика образца, мм;
A — концентрация стандартного раствора, мкг/см3;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m — масса анализируемого образца, г (см3);
P — содержание флутоланила или его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в аналитических стандартах, %.
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:
\frac{2|X_{1} - X_{2}|100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r , где (1)
X1, X2 - результаты параллельных определений, мг/кг;
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 \times \sigma_{r} .
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
(\overline{X} \pm \Delta) мг/кг при вероятности P = 0,95, где
\overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} , где
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг <*>».
<*> 0,01 мг/кг — предел обнаружения.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочных характеристик осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Контроль стабильности градуировочных характеристик проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в которых должно охватывать весь диапазон концентраций градуировочных характеристик.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
13.1.1. Градуировочная характеристика для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в воде:
\text{А } = \frac{(X - \text{С })100}{C} \leq 3 для флутоланила; 8 — для M-2; 3 — для M-4; 9 — для M-101 и 5 — для M-102, где
X — концентрация флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 контрольного измерения, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в ацетонитриле, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
3 (8; 3; 9; 5) — погрешность градуировочной характеристики, %.
13.1.2. Градуировочная характеристика для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в почве:
\text{А } = \frac{(X - \text{С })100}{C} \leq 9 для флутоланила; 10 — для M-2; 7 — для M-4; 6 — для M-101 и 4 — для M-102, где
X — концентрация флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 контрольного измерения, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в ацетонитриле, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
9 (10; 7; 6; 4) — погрешность градуировочной характеристики, %.
13.1.3. Градуировочная характеристика для определения флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в клубнях картофеля:
\text{А } = \frac{(X - \text{С })100}{C} \leq 8 для флутоланила; 8 — для M-2; 5 — для M-4; 10 — для M-101 и 7 — для M-102, где
X — концентрация флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 контрольного измерения, мкг/см3;
C — известная концентрация градуировочного раствора флутоланила и его метаболитов M-2, M-4, M-101 и M-102 в ацетонитриле, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;
8 (8; 5; 10; 7) — погрешность градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения (A) превышает указанные значения, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов флутоланила и его метаболитов, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 7.3.
Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом «добавок».
Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:
C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},\text{Х}} + \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime} , где
\pm \Delta_{\text{л},\text{Х}}( \pm \Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta , где
\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} , где
\delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:
\text{К}_{\text{к}} = \overline{\text{Х}}\prime - \overline{\text{Х}} - \text{С}_{\text{д}} , где
\overline{\text{Х}}\prime , \overline{\text{Х}} , Cд — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
\text{К } = \sqrt{\Delta_{\text{л},\text{Х }\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},\text{Х}}^{2}}
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
\frac{2|X_{1} - X_{2}|100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R , где (3)
X1, X2 — результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ ФЛУТОЛАНИЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ M-2, M-4, M-101 И M-102 ИЗ ВОДЫ, ПОЧВЫ И КЛУБНЕЙ КАРТОФЕЛЯ (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)